| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| abstract | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第16-23页 |
| 1.1 食品中铅的来源及其神经毒性 | 第16-19页 |
| 1.1.1 铅的污染现状及食品中铅的来源 | 第16-17页 |
| 1.1.2 铅的神经毒性及其可能机制 | 第17-19页 |
| 1.2 表观遗传学 | 第19-21页 |
| 1.2.1 表观遗传研究机制 | 第19-20页 |
| 1.2.2 表观遗传学研究方法 | 第20-21页 |
| 1.3 课题研究的背景,意义和主要内容 | 第21-23页 |
| 1.3.1 课题研究的背景和意义 | 第21页 |
| 1.3.2 课题研究的主要内容 | 第21-22页 |
| 1.3.3 实验流程图 | 第22-23页 |
| 第二章 铅对组蛋白乙酰化的影响 | 第23-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第23页 |
| 2.1.2 实验试剂和药品 | 第23页 |
| 2.1.3 主要抗体 | 第23页 |
| 2.1.4 相关引物 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-30页 |
| 2.2.1 PC12细胞培养 | 第24-25页 |
| 2.2.2 细胞RNA的提取 | 第25页 |
| 2.2.3 反转录 | 第25-26页 |
| 2.2.4 荧光定量PCR | 第26页 |
| 2.2.5 蛋白质免疫印迹法(WesternBlot) | 第26-27页 |
| 2.2.6 细胞存活率检测 | 第27-28页 |
| 2.2.7 染色质免疫沉淀技术(CHIP) | 第28-30页 |
| 2.3 数据分析 | 第30页 |
| 2.4 实验结果 | 第30-35页 |
| 2.4.1 铅暴露影响PC12细胞突起生长 | 第30-31页 |
| 2.4.2 铅暴露降低组蛋白Ac-H3K9水平,并升高HDACs部分亚型的基因表达 | 第31-33页 |
| 2.4.3 铅暴露后曲古抑菌素(TSA)处理显著恢复PC12细胞突起生长和组蛋白Ac-H3K9水平 | 第33-35页 |
| 2.5 讨论 | 第35-38页 |
| 第三章 HDAC2在铅导致的神经毒性中发挥的关键作用 | 第38-50页 |
| 3.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 3.1.1 实验仪器 | 第38页 |
| 3.1.2 实验试剂和药品 | 第38页 |
| 3.1.3 主要抗体 | 第38页 |
| 3.1.4 相关引物 | 第38-39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-43页 |
| 3.2.1 实验动物 | 第39页 |
| 3.2.2 组织蛋白提取 | 第39页 |
| 3.2.3 BCA法检测海马区组织蛋白浓度 | 第39-40页 |
| 3.2.4 蛋白质免疫印迹(WesternBlot) | 第40页 |
| 3.2.5 染色质免疫沉淀技术(CHIP) | 第40页 |
| 3.2.6 免疫荧光实验 | 第40-41页 |
| 3.2.7 shRNA载体的构建 | 第41-42页 |
| 3.2.8 无内毒素质粒提取方法 | 第42-43页 |
| 3.2.9 脂质体转染细胞实验 | 第43页 |
| 3.3 数据分析 | 第43页 |
| 3.4 实验结果 | 第43-47页 |
| 3.4.1 铅暴露增加组蛋白去乙酰化酶HDAC2的水平 | 第43-44页 |
| 3.4.2 HDAC2在铅导致的神经毒性中发挥的关键作用 | 第44-46页 |
| 3.4.3 HDAC2自身受H3K27三甲基化调控 | 第46-47页 |
| 3.5 讨论 | 第47-50页 |
| 第四章 铅通过影响HDAC1/2表达损伤SD鼠空间记忆能力 | 第50-64页 |
| 4.1 实验材料 | 第50-51页 |
| 4.1.1 实验仪器 | 第50页 |
| 4.1.2 实验试剂和药品 | 第50页 |
| 4.1.3 主要抗体 | 第50页 |
| 4.1.4 相关引物 | 第50-51页 |
| 4.2 实验方法 | 第51-55页 |
| 4.2.1 蛋白质免疫印迹(WesternBlot) | 第51页 |
| 4.2.2 免疫共沉淀(Co-IP) | 第51-52页 |
| 4.2.3 shRNA载体构建 | 第52页 |
| 4.2.4 脂质体转染细胞实验 | 第52页 |
| 4.2.5 SD鼠海马区立体定位注射AVV病毒 | 第52-53页 |
| 4.2.6 免疫荧光实验 | 第53页 |
| 4.2.7 Y-maze实验 | 第53页 |
| 4.2.8 Morris水迷宫实验 | 第53-54页 |
| 4.2.9 Golgi-cox染色 | 第54-55页 |
| 4.3 数据分析 | 第55页 |
| 4.4 实验结果 | 第55-62页 |
| 4.4.1 铅暴露影响HDAC1/2复合物 | 第55-56页 |
| 4.4.2 HDAC1/2复合物介导铅导致PC12细胞突起生长的毒性过程 | 第56-57页 |
| 4.4.3 铅暴露通过影响HDAC1/2表达损伤SD鼠空间记忆能力 | 第57-62页 |
| 4.5 讨论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 硕士期间的学术活动及研究成果 | 第71-72页 |
