核酸适配体文库的构建及ZEN适配体的初步筛选
| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 缩略语 | 第6-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-29页 |
| 1.1 玉米赤霉烯酮的研究进展 | 第10-15页 |
| 1.1.1 玉米赤霉烯酮的理化性质 | 第10页 |
| 1.1.2 玉米赤霉烯酮的毒性 | 第10-12页 |
| 1.1.3 玉米赤霉烯酮限量标准 | 第12-13页 |
| 1.1.4 玉米赤霉烯酮的来源及分布 | 第13页 |
| 1.1.5 玉米赤霉烯酮的检测方法 | 第13-15页 |
| 1.2 核酸适配体及SELEX技术 | 第15-28页 |
| 1.2.1 核酸适配体 | 第15-17页 |
| 1.2.2 SELEX技术基本原理 | 第17页 |
| 1.2.3 核酸适配体初始寡核苷酸随机文库构建 | 第17-20页 |
| 1.2.4 SELEX技术筛选方法 | 第20-24页 |
| 1.2.5 适配体在食品中小分子检测领域的应用 | 第24-28页 |
| 1.3 主要研究内容和意义 | 第28-29页 |
| 1.3.1 研究内容 | 第28页 |
| 1.3.2 研究意义 | 第28-29页 |
| 第2章 氧化石墨烯法筛选ZEN适配体 | 第29-50页 |
| 2.1 主要材料及设备 | 第29-31页 |
| 2.1.1 主要材料 | 第29-30页 |
| 2.1.2 主要设备 | 第30页 |
| 2.1.3 溶液配制 | 第30-31页 |
| 2.2 试验方法与步骤 | 第31-37页 |
| 2.2.1 ssDNA文库及引物 | 第31页 |
| 2.2.2 GO与ssDNA比例、孵育时间的优化 | 第31页 |
| 2.2.3 体外ZEN适配体筛选 | 第31-32页 |
| 2.2.4 PCR条件的优化 | 第32-33页 |
| 2.2.5 ssDNA制备 | 第33-34页 |
| 2.2.6 适配体的克隆测序 | 第34-36页 |
| 2.2.7 适配体序列分析和鉴定 | 第36-37页 |
| 2.3 结果 | 第37-46页 |
| 2.3.1 GO与ssDNA比例、孵育时间的优化 | 第37-38页 |
| 2.3.2 PCR扩增体系优化 | 第38-39页 |
| 2.3.3 体外ZEN适配体筛选 | 第39-41页 |
| 2.3.4 适配体的克隆 | 第41-42页 |
| 2.3.5 适配体的序列分析 | 第42-45页 |
| 2.3.6 适配体鉴定 | 第45-46页 |
| 2.4 讨论与小结 | 第46-50页 |
| 2.4.1 讨论 | 第46-49页 |
| 2.4.2 小结 | 第49-50页 |
| 第3章 基于三段库亲和层析柱法筛选ZEN适配体 | 第50-71页 |
| 3.1 主要材料及设备 | 第51-53页 |
| 3.1.1 主要材料 | 第51-52页 |
| 3.1.2 主要设备 | 第52-53页 |
| 3.1.3 溶液配制 | 第53页 |
| 3.2 试验方法与步骤 | 第53-58页 |
| 3.2.1 ssDNA制备 | 第53-55页 |
| 3.2.2 第一轮筛选 | 第55-56页 |
| 3.2.3 第二轮及以后 | 第56-57页 |
| 3.2.4 筛选过程中活性监控 | 第57页 |
| 3.2.5 筛选产物活性鉴定 | 第57-58页 |
| 3.3 结果 | 第58-68页 |
| 3.3.1 PCR扩增条件的影响 | 第58-59页 |
| 3.3.2 PCR扩增产物鉴定 | 第59-60页 |
| 3.3.3 ssDNA制备条件优化 | 第60-63页 |
| 3.3.4 适配体库固定效率 | 第63-64页 |
| 3.3.5 每轮适配体筛选效率 | 第64-66页 |
| 3.3.6 筛选过程中PCR条件优化 | 第66页 |
| 3.3.7 ssDNA次级库制备和鉴定 | 第66-67页 |
| 3.3.8 筛选过程中活性监控 | 第67-68页 |
| 3.3.9 筛选产物活性鉴定 | 第68页 |
| 3.4 讨论与小结 | 第68-71页 |
| 3.4.1 讨论 | 第68-70页 |
| 3.4.2 小结 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-81页 |
| 攻读学位期间的研究成果攻读学位期间的研究成果 | 第81页 |
