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共表达CYP716A12氧化酶和ATR1还原酶重组酿酒酵母的构建及其应用研究

致谢第6-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-10页
第1章 绪论第14-28页
    1.1 白桦脂酸抗癌活性第14-18页
        1.1.1 白桦脂酸抗癌机理研究第15-17页
        1.1.2 联合治疗第17-18页
    1.2 炎症与肿瘤第18-20页
        1.2.1 白桦脂酸活性的主要分子靶标第19-20页
        1.2.2 白桦脂酸的抗炎和抗肿瘤活性机理第20页
    1.3 Anti-HIV第20-23页
    1.4 白桦脂酸的其他生物学活性第23页
    1.5 白桦脂酸制备方法研究进展第23-26页
        1.5.1 直接提取法第23-24页
        1.5.2 化学合成法第24页
        1.5.3 生物转化第24-25页
        1.5.4 代谢工程第25-26页
    1.6 论文研究内容与意义第26-28页
第2章 具有转化白桦脂醇功能的工程酿酒酵母构建研究第28-44页
    2.1 实验材料第29-31页
        2.1.1 菌株和质粒第29-30页
        2.1.2 引物第30页
        2.1.3 主要材料与试剂第30页
        2.1.4 主要仪器与设备第30-31页
        2.1.5 培养基第31页
    2.2 实验方法第31-35页
        2.2.1 CYP716A12和ATR1基因序列的获得第31-32页
        2.2.2 pESC-URA-CYP716A12质粒构建第32页
        2.2.3 克隆鉴定第32-33页
        2.2.4 pESC-ura-CYP716A12-ATR1质粒构建第33页
        2.2.5 基因工程酿酒酵母的构建第33-35页
    2.3 结果与分析第35-43页
        2.3.1 CYP716A12和ATR1基因序列的鉴定第35-36页
        2.3.2 pESC-ura-CYP716A12质粒构建第36-39页
        2.3.3 pESC-ura-CYP716A12-ATR1质粒构建研究第39-42页
        2.3.4 基于双酶共表达的工程酿酒酵母构建第42-43页
    2.4 本章小结第43-44页
第3章 微粒体蛋白制备及转化鉴定研究第44-50页
    3.1 实验材料第44-45页
        3.1.1 菌株与培养基第44-45页
        3.1.2 主要材料与试剂第45页
        3.1.3 主要仪器与设备第45页
    3.2 实验方法第45-47页
        3.2.1 微粒体蛋白制备第45-46页
        3.2.2 微粒体蛋白转化第46页
        3.2.3 高效液相色谱检测第46-47页
    3.3 结果与分析第47-49页
    3.4 本章小结第49-50页
第4章 酿酒酵母ZJUQH311转化白桦脂醇的条件优化研究第50-64页
    4.1 实验材料第50-51页
        4.1.1 菌株与培养基第50-51页
        4.1.2 主要材料与试剂第51页
        4.1.3 主要仪器与设备第51页
    4.2 研究方法第51-54页
        4.2.1 微粒体蛋白制备方法探究第51-52页
        4.2.2 转化产物白桦脂酸的分离制备第52页
        4.2.3 菌体破碎方法优化第52-53页
        4.2.4 S.cerevisiae ZJUQH311微粒体蛋白转化生成白桦脂酸的条件优化实验设计第53-54页
    4.3 结果与分析第54-62页
        4.3.1 微粒体蛋白制备方法探究第54-55页
        4.3.2 菌体破碎方法比较第55-56页
        4.3.3 S.cerevisiae ZJUQH311微粒体蛋白体外转化生成白桦脂酸的条件优化第56-62页
    4.4 本章小结第62-64页
第5章 总结与展望第64-67页
    5.1 主要结论第64-65页
    5.2 后续研究展望第65-67页
参考文献第67-78页
作者简历第78页
硕士期间主要学术成果第78页

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