| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1.1 用于体外细胞培养的生物反应器类型 | 第13-16页 |
| 1.1.1 生物反应器的特性与分类 | 第13-14页 |
| 1.1.2 中空纤维式生物反应器 | 第14-15页 |
| 1.1.3 中空纤维型生物反应器的相关研究 | 第15-16页 |
| 1.2 Caco-2细胞模型 | 第16-19页 |
| 1.2.1 小肠吸收模型概述 | 第16-17页 |
| 1.2.2 Caco-2细胞模型概述 | 第17-18页 |
| 1.2.3 Caco-2细胞模型的改进 | 第18-19页 |
| 1.3 肝细胞培养模型 | 第19-22页 |
| 1.4 课题研究目标 | 第22-23页 |
| 第2章 Caco-2细胞中空纤维反应器的构建 | 第23-34页 |
| 2.1 前言 | 第23页 |
| 2.2 材料与试剂 | 第23-24页 |
| 2.2.1 细胞株 | 第23页 |
| 2.2.2 试剂 | 第23-24页 |
| 2.2.3 主要仪器设备 | 第24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-27页 |
| 2.3.1 试剂的配制 | 第24-25页 |
| 2.3.2 Caco-2细胞的培养与传代 | 第25-26页 |
| 2.3.3 Caco-2细胞在细胞模型上的培养 | 第26-27页 |
| 2.3.4 MTT法——细胞琥珀酸脱氢酶染色及酶活测定 | 第27页 |
| 2.3.5 扫描电子显微镜观察中空纤维膜结构 | 第27页 |
| 2.4 结果与分析 | 第27-32页 |
| 2.4.1 中空纤维膜材料的选择 | 第27-28页 |
| 2.4.2 Caco-2细胞在中空纤维内表面的贴壁培养 | 第28-29页 |
| 2.4.3 MTT实验结果 | 第29-31页 |
| 2.4.4 中空纤维膜材料的形态 | 第31-32页 |
| 2.5 本章小结 | 第32-34页 |
| 第3章 中空纤维反应器的Caco-2细胞功能分析 | 第34-48页 |
| 3.1 前言 | 第34页 |
| 3.2 材料与试剂 | 第34-35页 |
| 3.2.1 细胞株 | 第34页 |
| 3.2.2 材料与试剂 | 第34-35页 |
| 3.2.3 主要仪器设备 | 第35页 |
| 3.3 实验方法 | 第35-37页 |
| 3.3.1 试剂的配制 | 第35页 |
| 3.3.2 细胞琥珀酸脱氢酶染色及酶活测定(MTT法) | 第35-36页 |
| 3.3.3 扫描电子显微镜观察 | 第36页 |
| 3.3.4 荧光显微镜观察 | 第36页 |
| 3.3.5 碱性磷酸酶活性检测 | 第36-37页 |
| 3.3.6 γ-谷氨酰转肽酶活性检测 | 第37页 |
| 3.3.7 ZO-1蛋白荧光染色实验 | 第37页 |
| 3.3.8 统计学处理 | 第37页 |
| 3.4 结果与分析 | 第37-46页 |
| 3.4.1 反应器中Caco-2细胞的MTT实验结果 | 第37-38页 |
| 3.4.2 中空纤维反应器上的细胞形态 | 第38-42页 |
| 3.4.3 荧光显微镜观测结果 | 第42-44页 |
| 3.4.4 Caco-2细胞的刷状缘酶系的活性实验结果 | 第44-45页 |
| 3.4.5 Caco-2细胞层的紧密连接完整性观察 | 第45-46页 |
| 3.5 本章小结 | 第46-48页 |
| 第4章 用于肝毒性研究的中空纤维反应器的构建 | 第48-61页 |
| 4.1 引言 | 第48页 |
| 4.2 材料与试剂 | 第48-49页 |
| 4.2.1 细胞株 | 第48-49页 |
| 4.2.2 试剂 | 第49页 |
| 4.2.3 主要仪器设备 | 第49页 |
| 4.3 实验方法 | 第49-51页 |
| 4.3.1 肝细胞平皿单层培养 | 第49-50页 |
| 4.3.2 肝细胞胶原凝胶包埋 | 第50页 |
| 4.3.3 细胞琥珀酸脱氢酶染色及酶活测定(MTT法) | 第50页 |
| 4.3.4 尿素氮含量检测 | 第50页 |
| 4.3.5 乳酸脱氢酶(LDH)检测 | 第50-51页 |
| 4.3.6 白蛋白含量检测 | 第51页 |
| 4.4 结果与分析 | 第51-59页 |
| 4.4.1 HepG2细胞中空纤维反应器的胶原浓度的确定 | 第51-53页 |
| 4.4.2 HepG2细胞中空纤维反应器的细胞接种密度的确定 | 第53-54页 |
| 4.4.3 中空纤维反应器包埋和单层贴壁培养下HepG2细胞功能分析 | 第54-56页 |
| 4.4.4 LO2细胞中空纤维反应器的细胞接种密度的确定 | 第56-58页 |
| 4.4.5 中空纤维反应器包埋和单层贴壁培养下LO2细胞活性对比 | 第58-59页 |
| 4.5 本章小结 | 第59-61页 |
| 第5章 肝细胞中空纤维反应器用于肝毒性的研究 | 第61-71页 |
| 5.1 引言 | 第61-62页 |
| 5.2 材料与试剂 | 第62页 |
| 5.2.1 细胞株 | 第62页 |
| 5.2.2 材料与试剂 | 第62页 |
| 5.2.3 主要仪器设备 | 第62页 |
| 5.3 实验方法 | 第62-64页 |
| 5.3.1 试剂的配制 | 第62-63页 |
| 5.3.2 肝细胞平皿单层培养 | 第63页 |
| 5.3.3 肝细胞胶原凝胶包埋 | 第63页 |
| 5.3.4 尿素氮含量检测 | 第63页 |
| 5.3.5 白蛋白含量检测 | 第63-64页 |
| 5.4 结果与分析 | 第64-69页 |
| 5.4.1 HepG2细胞中空纤维反应器用于丙烯酰胺肝毒性研究初探 | 第64-67页 |
| 5.4.2 HepG2细胞中空纤维反应器用于桑葚花色苷肝毒性研究 | 第67-69页 |
| 5.5 本章小结 | 第69-71页 |
| 第6章 结论与展望 | 第71-73页 |
| 6.1 主要研究结论 | 第71-72页 |
| 6.2 主要创新点 | 第72页 |
| 6.3 不足之处 | 第72页 |
| 6.4 展望 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-80页 |
| 作者简介 | 第80页 |
