| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略词表 | 第14-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-31页 |
| 1.0 立题背景 | 第16-18页 |
| 1.1 乳酸菌生理功能 | 第18-20页 |
| 1.1.1 维持肠道菌落平衡 | 第18页 |
| 1.1.2 缓解乳糖不耐受症 | 第18页 |
| 1.1.3 产生多糖 | 第18-19页 |
| 1.1.4 降血压 | 第19页 |
| 1.1.5 降胆固醇 | 第19-20页 |
| 1.2 植物乳杆菌与植物乳杆菌素概述 | 第20-29页 |
| 1.2.1 植物乳杆菌的性质 | 第20页 |
| 1.2.2 植物乳杆菌的分布以及作用 | 第20页 |
| 1.2.3 植物乳杆菌素特点 | 第20-25页 |
| 1.2.3.1 植物乳杆菌素分类 | 第20-21页 |
| 1.2.3.2 植物乳杆菌素的抑菌谱 | 第21页 |
| 1.2.3.3 植物乳杆菌素的基因多态性 | 第21-22页 |
| 1.2.3.4 植物乳杆菌素抑菌机理 | 第22页 |
| 1.2.3.5 植物乳杆菌素基因三组分调控系统及其位点多样性 | 第22-24页 |
| 1.2.3.6 植物乳杆菌群的群体感应机制 | 第24-25页 |
| 1.2.4 植物乳杆菌群在食品制造业的应用 | 第25-26页 |
| 1.2.5 影响植物乳杆菌生长的环境因素 | 第26页 |
| 1.2.6 植物乳杆菌群在饲料行业的应用 | 第26-27页 |
| 1.2.6.1 在家禽中的应用 | 第26页 |
| 1.2.6.2 在猪生产中的应用 | 第26-27页 |
| 1.2.6.3 在仔鱼养殖中的应用 | 第27页 |
| 1.2.7 植物乳杆菌群在医药行业的应用 | 第27页 |
| 1.2.8 乳酸菌和其它防腐剂的联合应用 | 第27页 |
| 1.2.9 利用实时荧光定量PCR技术检测植物乳杆菌素的基因表达 | 第27-29页 |
| 1.2.9.1 荧光定量PCR技术及其原理 | 第27-28页 |
| 1.2.9.2 qPCR分类 | 第28页 |
| 1.2.9.3 影响实时荧光定量PCR准确性的因素 | 第28-29页 |
| 1.3 研究目的和意义 | 第29页 |
| 1.4 研究内容 | 第29-31页 |
| 第二章 植物乳杆菌素相关基因的表达研究 | 第31-60页 |
| 2.1 引言 | 第31页 |
| 2.2 实验材料 | 第31-49页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第31-32页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第32-33页 |
| 2.2.3 实验样品 | 第33页 |
| 2.2.4 培养基及试剂配制 | 第33-35页 |
| 2.2.4.1 实验用培养基 | 第33-34页 |
| 2.2.4.2 实验用试剂的配制 | 第34-35页 |
| 2.2.5 植物乳杆菌培养 | 第35-36页 |
| 2.2.5.1 菌种活化 | 第35页 |
| 2.2.5.2 细菌培养 | 第35-36页 |
| 2.2.6 RNA的提取以及质量检验 | 第36-40页 |
| 2.2.6.1 菌体收集 | 第36页 |
| 2.2.6.2 总RNA提取 | 第36-37页 |
| 2.2.6.3 去除基因组DNA污染 | 第37-38页 |
| 2.2.6.4 检验基因组DNA污染去除结果 | 第38-39页 |
| 2.2.6.5 RNA完整性检测 | 第39页 |
| 2.2.6.6 测定RNA样品的浓度和纯度 | 第39页 |
| 2.2.6.7 合成cDNA第一条链 | 第39-40页 |
| 2.2.7 基因的选取和引物设计方法 | 第40-43页 |
| 2.2.7.1 基因选取 | 第40-41页 |
| 2.7.7.2 引物设计 | 第41页 |
| 2.2.7.3 引物的处理方法 | 第41-42页 |
| 2.2.7.4 基因组DNA的提取 | 第42页 |
| 2.2.7.5 检验细菌基因组DNA的质量 | 第42页 |
| 2.2.7.4 检测设计引物的最佳退火温度 | 第42-43页 |
| 2.2.8 半定量PCR测定基因表达量 | 第43-44页 |
| 2.2.8.1 PCR仪器扩增孔道的确定 | 第43页 |
| 2.2.8.2 半定量PCR体系 | 第43-44页 |
| 2.2.8.3 半定量检测目标基因的相对表达量 | 第44页 |
| 2.2.9 荧光引物的设计 | 第44-49页 |
| 2.2.9.1 设计的荧光引物的最佳退火温度的确定 | 第46-47页 |
| 2.2.9.2 利用荧光定量PCR检测引物质量 | 第47-48页 |
| 2.2.9.3 qPCR引物的扩增效率计算 | 第48-49页 |
| 2.2.9.3 荧光定量检测目标基因的相对表达量 | 第49页 |
| 2.3 结果与分析 | 第49-57页 |
| 2.3.1 RNA的提取以及质量检验 | 第49-50页 |
| 2.3.1.1 除去DNA污染的RNA完整性检测 | 第49-50页 |
| 2.3.1.2 RNA中基因组DNA污染检测结果 | 第50页 |
| 2.3.1.3 测定RNA样品的浓度和纯度 | 第50页 |
| 2.3.2 基因组DNA提取结果 | 第50-51页 |
| 2.3.2.1 基因组DNA的PCR结果 | 第50-51页 |
| 2.3.3 引物最佳退火温度确定 | 第51-53页 |
| 2.3.3.1 内参基因的最佳退火温度 | 第51-52页 |
| 2.3.3.2 目的基因的最佳退火温度确定 | 第52-53页 |
| 2.3.4 半定量PCR技术检测基因的差异表达结果 | 第53页 |
| 2.3.5 荧光定量PCR | 第53-57页 |
| 2.3.5.1 荧光定量PCR引物的最佳退火温度确定 | 第53-55页 |
| 2.3.5.2 荧光定量引物的特异性检测 | 第55-56页 |
| 2.3.5.4 荧光定量PCR检测基因的差异性表达结果 | 第56-57页 |
| 2.4 讨论 | 第57-58页 |
| 2.4.1 盐浓度胁迫对植物乳杆菌素基因的影响 | 第57页 |
| 2.4.2 盐浓度胁迫对植物乳杆菌素转运系统基因的影响 | 第57页 |
| 2.4.3 盐浓度胁迫对促进子基因的影响 | 第57页 |
| 2.4.4 盐浓度胁迫对信息肽分泌的影响 | 第57-58页 |
| 2.4.5 半定量PCR与qPCR结果讨论 | 第58页 |
| 2.5 小结 | 第58-60页 |
| 第三章 NaCl胁迫下的植物乳杆菌YM-4-3抑菌结果 | 第60-67页 |
| 3.1 引言 | 第60页 |
| 3.2 实验材料 | 第60-62页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第60-61页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第61页 |
| 3.2.3 培养基及试剂配制 | 第61-62页 |
| 3.2.3.1 实验用培养基 | 第61-62页 |
| 3.2.3.2 实验用试剂的配制 | 第62页 |
| 3.3 样品处理 | 第62-63页 |
| 3.3.1 上清液准备 | 第62-63页 |
| 3.3.2 指示菌的培养以及计数 | 第63页 |
| 3.4 抑菌试验 | 第63页 |
| 3.5 结果与分析 | 第63-65页 |
| 3.5.1 植物乳杆菌素对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌结果 | 第63-64页 |
| 3.5.2 植物乳杆菌素对干酪乳杆菌AS02以及植物乳杆菌S11的抑菌效果 | 第64-65页 |
| 3.6 讨论 | 第65-66页 |
| 3.6.1 植物乳杆菌素抑菌结果的讨论 | 第65-66页 |
| 3.6.2 植物乳杆菌素转运基因(plnGHSTUVW)突变对抑菌结果的影响 | 第66页 |
| 3.7 小结 | 第66-67页 |
| 第四章 总结 | 第67-68页 |
| 4.1 在NaCl胁迫下植物乳杆菌YM-4-3的细相关菌素基因的表达情况 | 第67页 |
| 4.2 在NaCl胁迫下植物乳杆菌YM-4-3的抑菌效果 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表论文目录 | 第75页 |
