| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 1 绪论 | 第8-20页 |
| 1.1 低聚糖概述 | 第8页 |
| 1.2 低聚乳果糖简述 | 第8-12页 |
| 1.2.1 低聚乳果糖的结构及理化特性 | 第8-9页 |
| 1.2.2 低聚乳果糖的功能与应用 | 第9-10页 |
| 1.2.3 低聚乳果糖的生物合成 | 第10-12页 |
| 1.3 蜜二糖及其生物合成简述 | 第12-13页 |
| 1.3.1 蜜二糖的结构及理化性质 | 第12页 |
| 1.3.2 蜜二糖的功能与应用 | 第12-13页 |
| 1.3.3 蜜二糖的生物合成 | 第13页 |
| 1.4 果聚糖蔗糖酶的研究 | 第13-18页 |
| 1.4.1 果聚糖蔗糖酶简介 | 第13-14页 |
| 1.4.2 果聚糖蔗糖酶的性质 | 第14-15页 |
| 1.4.3 果聚糖蔗糖酶的应用研究 | 第15-18页 |
| 1.5 本课题立题依据及意义 | 第18页 |
| 1.6 本课题研究的主要内容 | 第18-20页 |
| 2 实验材料与方法 | 第20-29页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第20页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第20页 |
| 2.1.2 主要实验试剂 | 第20页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第20页 |
| 2.2 培养基与试剂的配制 | 第20-22页 |
| 2.2.1 培养基的配制 | 第20-21页 |
| 2.2.2 相关试剂的配制 | 第21-22页 |
| 2.3 试验方法 | 第22-29页 |
| 2.3.1 基因克隆 | 第22页 |
| 2.3.2 感受态细胞E. coli BL21(DE3)及E. coli DH5α 的制备 | 第22-23页 |
| 2.3.3 E. coli工程菌的构建与重组酶的诱导表达 | 第23页 |
| 2.3.4 质粒的抽提制备 | 第23页 |
| 2.3.5 质粒的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第23页 |
| 2.3.6 E. coli工程菌的超低温保藏 | 第23-24页 |
| 2.3.7 重组酶的分离纯化 | 第24页 |
| 2.3.8 SDS-PAGE凝胶电泳检测 | 第24页 |
| 2.3.9 重组酶的蛋白含量测定 | 第24-25页 |
| 2.3.10 反应产物的HPLC检测 | 第25页 |
| 2.3.11 重组酶的酶活测定 | 第25页 |
| 2.3.12 重组酶的酶学性质研究 | 第25-26页 |
| 2.3.13 利用重组酶合成低聚乳果糖的研究 | 第26-27页 |
| 2.3.14 利用重组酶合成蜜二糖的研究 | 第27-29页 |
| 3 结果与讨论 | 第29-52页 |
| 3.1 重组果聚糖蔗糖酶基因序列与氨基酸序列比对分析 | 第29-32页 |
| 3.2 重组果聚糖蔗糖酶的诱导表达与分离纯化 | 第32-34页 |
| 3.3 重组果聚糖蔗糖酶的活力测定 | 第34页 |
| 3.4 重组果聚糖蔗糖酶的酶学性质 | 第34-37页 |
| 3.4.1 反应温度对酶活的影响 | 第34-35页 |
| 3.4.2 pH对酶活的影响 | 第35页 |
| 3.4.3 金属离子对酶活的影响 | 第35-36页 |
| 3.4.4 酶反应动力学参数测定 | 第36-37页 |
| 3.5 重组果聚糖蔗糖酶合成低聚乳果糖的条件研究 | 第37-46页 |
| 3.5.1 反应产物鉴定 | 第38-41页 |
| 3.5.2 pH对低聚乳果糖合成的影响 | 第41页 |
| 3.5.3 温度对低聚乳果糖合成的影响 | 第41-42页 |
| 3.5.4 底物浓度对低聚乳果糖合成的影响 | 第42-43页 |
| 3.5.5 加入底物比例对低聚乳果糖合成的影响 | 第43-44页 |
| 3.5.6 加酶量对低聚乳果糖合成的影响 | 第44-45页 |
| 3.5.7 低聚乳果糖合成的时间进程 | 第45-46页 |
| 3.5.8 低聚乳果糖酶法合成的比较 | 第46页 |
| 3.6 重组果聚糖蔗糖酶产蜜二糖的初步研究 | 第46-52页 |
| 3.6.1 转糖基产物鉴定 | 第46-49页 |
| 3.6.2 棉籽糖水解产蜜二糖 | 第49-50页 |
| 3.6.3 以乳糖为受体产蜜二糖 | 第50页 |
| 3.6.4 以半乳糖为受体产蜜二糖 | 第50-52页 |
| 主要结论与展望 | 第52-54页 |
| 主要结论 | 第52-53页 |
| 展望 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 附录 作者在攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第63页 |
