| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 1 前言 | 第8-16页 |
| 1.1 葡萄酒概述 | 第8-11页 |
| 1.1.1 葡萄酒的营养价值 | 第8页 |
| 1.1.2 葡萄酒的酿造工艺 | 第8-10页 |
| 1.1.3 葡萄酒中风味物质的概况 | 第10-11页 |
| 1.2 葡萄酒中双乙酰的形成和控制 | 第11-13页 |
| 1.2.1 双乙酰简介 | 第11页 |
| 1.2.2 葡萄酒中双乙酰的代谢 | 第11-13页 |
| 1.3 低产双乙酰酿酒酵母菌株的选育 | 第13-14页 |
| 1.4 本课题的立题依据和研究内容 | 第14-16页 |
| 1.4.1 本课题的立题依据 | 第14-15页 |
| 1.4.2 本课题的研究内容 | 第15-16页 |
| 2 材料和方法 | 第16-38页 |
| 2.1 实验材料和仪器 | 第16-21页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第16-17页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.4 主要培养基 | 第19页 |
| 2.1.5 主要溶液 | 第19-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-32页 |
| 2.2.1 质粒构建 | 第21-28页 |
| 2.2.2 重组菌株的获得和验证 | 第28-30页 |
| 2.2.3 实时荧光定量PCR | 第30-31页 |
| 2.2.4 KanMx筛选标记的去除 | 第31-32页 |
| 2.2.5 发酵实验 | 第32页 |
| 2.3 分析方法 | 第32-38页 |
| 2.3.1 双乙酰含量的测定 | 第32-33页 |
| 2.3.2 乙偶姻和2,3-丁二醇含量的测定 | 第33页 |
| 2.3.3 还原糖的的测定 | 第33-34页 |
| 2.3.4 酒精度的测定 | 第34页 |
| 2.3.5 总酸测定 | 第34-35页 |
| 2.3.6 总酯测定 | 第35页 |
| 2.3.7 发酵速度的测定 | 第35-36页 |
| 2.3.8 生长曲线的测定 | 第36页 |
| 2.3.9 风味物质测定 | 第36-38页 |
| 3 结果和讨论 | 第38-62页 |
| 3.1 出发菌株的筛选 | 第38-43页 |
| 3.1.1 耐受性试验 | 第38-41页 |
| 3.1.2 葡萄酒酿造试验 | 第41-42页 |
| 3.1.3 小结 | 第42-43页 |
| 3.2 加糖二次发酵试验 | 第43-45页 |
| 3.2.1 不同加糖量对葡萄酒残糖量和酒精度的影响 | 第43-44页 |
| 3.2.2 加糖二次发酵与苹-乳发酵双乙酰含量比较 | 第44页 |
| 3.2.3 小结 | 第44-45页 |
| 3.3 基因BDH1/BDH2对双乙酰含量的影响 | 第45-48页 |
| 3.3.1 基因BDH1/BDH2敲除菌株的获得 | 第45-46页 |
| 3.3.2 转化子WY1Δ1和WY1Δ2对双乙酰含量的影响 | 第46-48页 |
| 3.3.3 小结与讨论 | 第48页 |
| 3.4 基因BDH1/BDH2过表达菌株的构建 | 第48-53页 |
| 3.4.1 基因BDH1/BDH2过表达载体的构建 | 第48-50页 |
| 3.4.2 基因BDH1/BDH2过表达菌株的获得 | 第50-52页 |
| 3.4.3 基因过表达菌株生长曲线的测定 | 第52页 |
| 3.4.4 基因过表达菌株转录水平的测定 | 第52-53页 |
| 3.4.5 小结 | 第53页 |
| 3.5 葡萄酒发酵实验 | 第53-62页 |
| 3.5.1 葡萄酒常规发酵实验 | 第53-55页 |
| 3.5.2 苹-乳发酵实验 | 第55-58页 |
| 3.5.3 加糖二次发酵实验 | 第58-60页 |
| 3.5.4 小结 | 第60-62页 |
| 4 结论 | 第62-63页 |
| 5 展望 | 第63-64页 |
| 6 参考文献 | 第64-70页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第70-71页 |
| 8 致谢 | 第71页 |
