摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
1 绪论 | 第8-15页 |
·稀有糖概述 | 第8页 |
·D-塔格糖概述 | 第8-10页 |
·D-塔格糖的结构与功能 | 第8-9页 |
·D-塔格糖的制备 | 第9-10页 |
·L-阿拉伯糖异构酶的研究 | 第10-13页 |
·L-阿拉伯糖异构酶简介 | 第10页 |
·L-阿拉伯糖异构酶的性质 | 第10-12页 |
·L-阿拉伯糖异构酶结构 | 第12页 |
·L-阿拉伯糖异构酶的分子改造 | 第12-13页 |
·本课题立题依据意义 | 第13-14页 |
·本课题研究的主要内容 | 第14-15页 |
2 实验材料与方法 | 第15-25页 |
·实验材料与仪器 | 第15页 |
·菌株与质粒 | 第15页 |
·主要实验试剂 | 第15页 |
·主要实验仪器 | 第15页 |
·培养基与试剂的配制 | 第15-17页 |
·培养基的配制 | 第15-16页 |
·相关试剂的配制 | 第16-17页 |
·试验方法 | 第17-25页 |
·基因克隆 | 第17页 |
·E. coli DH5α 及E. coli BL21(DE3)感受态细胞制备 | 第17页 |
·基因重组菌的构建 | 第17-18页 |
·质粒的抽提制备 | 第18页 |
·质粒的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第18页 |
·基因重组菌的保藏 | 第18页 |
·基因重组菌的诱导表达 | 第18页 |
·重组酶的分离纯化 | 第18-19页 |
·SDS-PAGE凝胶电泳检测 | 第19页 |
·重组酶的蛋白含量测定 | 第19页 |
·重组酶的酶活测定 | 第19-20页 |
·重组酶的酶学性质研究 | 第20-21页 |
·重组酶的分子改造 | 第21-25页 |
3 结果与讨论 | 第25-46页 |
·重组酶基因序列以及氨基酸序列比对分析 | 第25-29页 |
·重组酶的分离纯化 | 第29-30页 |
·重组酶的生物活性检测 | 第30页 |
·重组酶的酶学性质 | 第30-38页 |
·反应温度对酶活的影响 | 第30-31页 |
·pH对酶活的影响 | 第31-32页 |
·金属离子种类对酶活的影响 | 第32-33页 |
·最适Co~(2+)离子浓度 | 第33-34页 |
·温度对酶稳定性的影响 | 第34页 |
·pH对酶的稳定性的影响 | 第34-35页 |
·酶反应动力学参数测定 | 第35-36页 |
·D-塔格糖的生物转化 | 第36-37页 |
·L-阿拉伯糖异构酶酶学性质比较 | 第37-38页 |
·L-阿拉伯糖异构酶的分子改造 | 第38-46页 |
·L-阿拉伯糖异构酶随机突变及定点突变 | 第38-39页 |
·突变体酶的表达和纯化 | 第39页 |
·温度对突变体酶酶活的影响 | 第39-40页 |
·pH对突变体酶酶活的影响 | 第40页 |
·金属离子对突变体酶酶活的影响 | 第40-41页 |
·野生型及突变体酶动力学参数的测定 | 第41-42页 |
·酸性条件下D-塔格糖的生物合成 | 第42页 |
·同源建模 | 第42-43页 |
·L-阿拉伯糖异构酶突变体性质比较 | 第43-46页 |
主要结论及展望 | 第46-48页 |
主要结论 | 第46-47页 |
展望 | 第47-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-56页 |
附录 作者在攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第56页 |