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基于HepG2细胞实验方法解析PEF技术改变抗氧化肽活性的机理研究

中文摘要第4-7页
abstract第7-10页
英文缩写词表第16-18页
第1章 绪论第18-34页
    1.1 食源性抗氧化肽的研究进展第18-24页
        1.1.1 食源性抗氧化肽的制备第18-20页
        1.1.2 抗氧化肽体外活性评价方法第20-21页
        1.1.3 抗氧化肽抑制氧化应激的研究第21-23页
        1.1.4 食源性抗氧化肽的构效关系研究第23-24页
    1.2 PEF技术的研究进展第24-32页
        1.2.1 PEF技术研究概况第24-26页
        1.2.2 PEF技术在食品领域的应用研究第26-29页
        1.2.3 PEF技术对蛋白类活性物质的影响第29-31页
        1.2.4 PEF技术对蛋白类物质的作用机理研究第31-32页
    1.3 本文研究内容第32-34页
        1.3.1 研究内容第32-33页
        1.3.2 技术路线第33-34页
第2章 基于PEF技术提高两种蛋白酶解物抗氧化活性的实验研究第34-46页
    2.1 材料与设备第34-35页
        2.1.1 材料与试剂第34页
        2.1.2 仪器与设备第34-35页
    2.2 实验方法第35-36页
        2.2.1 PEF技术处理蛋白酶解物第35页
        2.2.2 DPPH自由基清除率的测定第35页
        2.2.3 PEF技术提高蛋白酶解物抗氧化活性的OFAT设计第35-36页
        2.2.4 PEF技术提高蛋白酶解物抗氧化活性的RSM优化设计第36页
        2.2.5 数据分析第36页
    2.3 结果与讨论第36-45页
        2.3.1 PEF技术提高蛋白酶解物抗氧化活性的OFAT结果第36-39页
        2.3.2 PEF技术提高蛋白酶解物抗氧化活性的RSM优化结果第39-44页
        2.3.3 PEF技术提高蛋白酶解物抗氧化活性的条件验证第44-45页
    2.4 本章小结第45-46页
第3章 PEF处理的五肽体外抗氧化活性的对比研究第46-66页
    3.1 材料与设备第46-47页
        3.1.1 材料与试剂第46-47页
        3.1.2 仪器与设备第47页
    3.2 实验方法第47-49页
        3.2.1 抗氧化肽的鉴定第47页
        3.2.2 抗氧化肽的合成第47-48页
        3.2.3 PEF技术处理抗氧化肽第48页
        3.2.4 DPPH自由基清除率的测定第48页
        3.2.5 ABTS自由基清除率的测定第48页
        3.2.6 羟基自由基清除率的测定第48-49页
        3.2.7 数据分析第49页
    3.3 结果与讨论第49-64页
        3.3.1 抗氧化肽氨基酸序列鉴定结果第49-52页
        3.3.2 抗氧化肽的合成与检测结果第52-56页
        3.3.3 PEF技术对抗氧化五肽的活性提高结果第56-64页
    3.4 本章小结第64-66页
第4章 PEF技术提高五肽对HEPG2细胞氧化损伤模型的保护作用第66-86页
    4.1 材料与设备第66-67页
        4.1.1 材料与试剂第66-67页
        4.1.2 仪器与设备第67页
    4.2 实验方法第67-70页
        4.2.1 PEF技术处理抗氧化肽第67-68页
        4.2.2 HepG2细胞的培养第68页
        4.2.3 细胞形态学观察第68-69页
        4.2.4 细胞活力的测定方法第69页
        4.2.5 抗氧化五肽对HepG2细胞的毒性测定第69页
        4.2.6 抗氧化五肽的CAA测定第69-70页
        4.2.7 HepG2细胞过氧化氢损伤模型的构建第70页
        4.2.8 抗氧化五肽对HepG2细胞氧化损伤模型的作用第70页
        4.2.9 数据分析第70页
    4.3 结果与讨论第70-84页
        4.3.1 PEF处理的抗氧化五肽对HepG2细胞形态的影响第70-71页
        4.3.2 PEF处理的抗氧化五肽对HepG2细胞活力的影响第71-73页
        4.3.3 PEF处理的抗氧化五肽对HepG2细胞内荧光强度的影响第73-76页
        4.3.4 PEF处理对五肽细胞内抗氧化活性的影响第76-78页
        4.3.5 HepG2细胞过氧化氢损伤模型的构建结果第78-80页
        4.3.6 PEF提高五肽对HepG2细胞氧化损伤模型的保护作用第80-84页
    4.4 本章小结第84-86页
第5章 PEF处理的抗氧化肽KDHCH对HEPG2细胞抗氧化系统的影响第86-106页
    5.1 材料与设备第86-87页
        5.1.1 材料与试剂第86-87页
        5.1.2 仪器与设备第87页
    5.2 实验方法第87-90页
        5.2.1 PEF技术处理抗氧化五肽KDHCH第87页
        5.2.2 KDHCH对HepG2细胞氧化损伤模型的作用第87-88页
        5.2.3 KDHCH对HepG2细胞的毒性检测第88页
        5.2.4 ROS水平检测第88页
        5.2.5 MDA以及相关酶类检测第88-89页
        5.2.6 线粒体膜电位检测第89页
        5.2.7 Caspase-3活性检测第89页
        5.2.8 数据分析第89-90页
    5.3 结果与讨论第90-103页
        5.3.1 KDHCH预处理时间对氧化损伤的HepG2细胞的作用第90-91页
        5.3.2 KDHCH对HepG2细胞的毒性检测结果第91页
        5.3.3 PEF处理对KDHCH清除细胞内ROS能力的影响第91-94页
        5.3.4 PEF处理的KDHCH对HepG2细胞MDA水平的影响第94-95页
        5.3.5 PEF处理的KDHCH对HepG2细胞LDH释放的影响第95-96页
        5.3.6 PEF处理的KDHCH对HepG2细胞抗氧化酶系的影响第96-100页
        5.3.7 PEF处理的KDHCH对HepG2细胞线粒体膜电位的影响第100-101页
        5.3.8 PEF处理的KDHCH对HepG2细胞Caspase-3的影响第101-103页
    5.4 本章小结第103-106页
第6章 基于结构分析方法探究PEF处理提高抗氧化肽活性的原因第106-126页
    6.1 材料与设备第106-107页
        6.1.1 材料与试剂第106-107页
        6.1.2 仪器与设备第107页
    6.2 实验方法第107-109页
        6.2.1 PEF技术处理抗氧化五肽第107页
        6.2.2 RP-HPLC测定方法第107-108页
        6.2.3 ~1H-NMR测定方法第108页
        6.2.4 MIR测定方法第108页
        6.2.5 CD图谱测定方法第108-109页
        6.2.6 显微红外成像测定方法第109页
        6.2.7 数据分析第109页
    6.3 结果与讨论第109-124页
        6.3.1 PEF处理对抗氧化五肽基本结构的影响第109-112页
        6.3.2 PEF处理对抗氧化五肽重水氢谱的影响第112-117页
        6.3.3 PEF处理对抗氧化五肽官能团的影响第117-119页
        6.3.4 PEF处理对抗氧化五肽二级结构的影响第119-122页
        6.3.5 PEF处理对抗氧化五肽显微红外光谱的影响第122-124页
    6.4 本章小结第124-126页
第7章 PEF作用下抗氧化肽空间构像的改变对活性影响的机理研究第126-138页
    7.1 材料与设备第126-127页
        7.1.1 材料与试剂第126页
        7.1.2 仪器与设备第126-127页
    7.2 实验方法第127-128页
        7.2.1 PEF技术处理抗氧化五肽第127页
        7.2.2 电导率测定方法第127页
        7.2.3 平均粒径和Zeta电位测定方法第127页
        7.2.4 ~1H-NMR测定方法第127页
        7.2.5 数据分析第127-128页
    7.3 结果与讨论第128-137页
        7.3.1 PEF处理对抗氧化肽溶液的作用模型第128-129页
        7.3.2 PEF处理对抗氧化肽溶液电导率的影响第129页
        7.3.3 PEF处理对抗氧化肽Zeta电位及平均粒径的影响第129-131页
        7.3.4 PEF处理对抗氧化肽活泼氢的影响第131-133页
        7.3.5 PEF处理对抗氧化肽氢-氢距离相关性的影响第133-137页
    7.4 本章小结第137-138页
第8章 结论第138-142页
    8.1 全文结论第138-140页
    8.2 创新点第140-142页
参考文献第142-162页
导师简介第162-164页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第164-168页
致谢第168页

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