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扇贝多肽经内质网应激介导抗UVB诱导的HaCaT细胞凋亡作用

中文摘要第2-3页
Abstract第3页
引言第7-10页
实验设计第10-11页
第一章 内质网应激与ROS在UVB诱导HaCaT细胞凋亡中的作用第11-48页
    1.1 内质网应激在UVB诱导HaCaT细胞凋亡中的调控作用第11-38页
        1.1.1 材料第11-16页
            1.1.1.1 细胞株第11页
            1.1.1.2 主要试剂和仪器第11-16页
        1.1.2 方法第16-21页
            1.1.2.1 人HaCaT角质形成细胞的传代培养第16页
            1.1.2.2 建立UVB诱导的HaCaT细胞凋亡模型第16-17页
            1.1.2.3 透射电镜观察内质网超微结构第17页
            1.1.2.4 半定量RT-PCR第17-19页
            1.1.2.5 RNA干扰第19-20页
            1.1.2.6 蛋白质免疫印迹实验(Western-blot)第20-21页
            1.1.2.7 统计学处理第21页
        1.1.3 结果第21-32页
            1.1.3.1 UVB诱导HaCaT细胞凋亡模型的建立第21-22页
            1.1.3.2 UVB诱导HaCaT细胞凋亡内质网超微结构的变化第22-23页
            1.1.3.3 UVB损伤HaCaT细胞对内质网未折叠伴侣蛋白GRP78mRNA、GRP94mRNA及蛋白的表达第23-25页
            1.1.3.4 UVB诱导HaCaT细胞对三种内质网应激感应分子的影响第25-27页
            1.1.3.5 PERK/eIF2α/CHOP通路参与UVB诱导HaCaT细胞凋亡第27-28页
            1.1.3.6 UVB损伤HaCaT细胞对内质网伴侣蛋白CHOP/GADD153mRNA及其蛋白表达的影响第28-29页
            1.1.3.7 UVB损伤HaCaT细胞对Bax/Bcl-2的影响第29-30页
            1.1.3.8 siRNA抑制CHOP基因对UVB诱导HaCaT细胞凋亡对Bax/Bcl-2的影响第30-32页
        讨论第32-38页
    1.2 UVB诱导HaCaT细胞凋亡中内质网应激与ROS的关系研究第38-48页
        1.2.1 实验材料第38页
        1.2.2 实验方法第38-39页
            1.2.2.1 细胞培养及实验分组第38页
            1.2.2.2 MTT法细胞活性测定第38页
            1.2.2.3 Hoechst 333258荧光染色第38-39页
            1.2.2.4 细胞内ROS含量检测第39页
            1.2.2.5 统计学分析第39页
        1.2.3 结果第39-44页
            1.2.3.1 NAC和4-PBA预处理对UVB损伤HaCaT细胞活性和细胞凋亡的影响第39-40页
            1.2.3.2 NAC和4-PBA预处理对UVB损伤HaCaT细胞ROS水平的影响第40-42页
            1.2.3.3 NAC和4-PBA预处理对UVB损伤HaCaT细胞GRP78和CHOP/GADD153表达的影响第42-43页
            1.2.3.4 NAC和4-PBA预处理对UVB损伤HaCaT细胞Bax和Bcl-2表达的影响第43-44页
        讨论第44-48页
第二章 扇贝多肽通过内质网应激通路对UVB诱导的HaCaT细胞凋亡的保护作用研究第48-60页
    2.1 实验材料第49页
    2.2 实验方法第49-50页
        2.2.1 细胞培养与分组第49页
        2.2.2 细胞活力检测第49页
        2.2.3 Hoechst 33258荧光染色第49-50页
        2.2.4 ROS含量检测第50页
        2.2.5 免疫印迹检测蛋白表达第50页
        2.2.6 统计学处理第50页
    2.3 结果第50-56页
        2.3.1 PCF对UVB诱导HaCaT细胞存活率的影响第50-51页
        2.3.2 PCF对UVB诱导HaCaT细胞凋亡的影响第51-53页
        2.3.3 PCF对UVB照射HaCaT细胞ROS产生量的影响第53-54页
        2.3.4 PCF对UVB诱导HaCaT细胞GRP78、p-PERK、p-eIF2α、CHOP/GADD153蛋白表达的影响第54-56页
    讨论第56-60页
结论第60-61页
参考文献第61-67页
综述第67-89页
    综述参考文献第80-89页
攻读学位期间的研究成果第89-90页
附录(中英文缩略词表)第90-91页
致谢第91-92页

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