中文摘要 | 第2-3页 |
Abstract | 第3页 |
引言 | 第7-10页 |
实验设计 | 第10-11页 |
第一章 内质网应激与ROS在UVB诱导HaCaT细胞凋亡中的作用 | 第11-48页 |
1.1 内质网应激在UVB诱导HaCaT细胞凋亡中的调控作用 | 第11-38页 |
1.1.1 材料 | 第11-16页 |
1.1.1.1 细胞株 | 第11页 |
1.1.1.2 主要试剂和仪器 | 第11-16页 |
1.1.2 方法 | 第16-21页 |
1.1.2.1 人HaCaT角质形成细胞的传代培养 | 第16页 |
1.1.2.2 建立UVB诱导的HaCaT细胞凋亡模型 | 第16-17页 |
1.1.2.3 透射电镜观察内质网超微结构 | 第17页 |
1.1.2.4 半定量RT-PCR | 第17-19页 |
1.1.2.5 RNA干扰 | 第19-20页 |
1.1.2.6 蛋白质免疫印迹实验(Western-blot) | 第20-21页 |
1.1.2.7 统计学处理 | 第21页 |
1.1.3 结果 | 第21-32页 |
1.1.3.1 UVB诱导HaCaT细胞凋亡模型的建立 | 第21-22页 |
1.1.3.2 UVB诱导HaCaT细胞凋亡内质网超微结构的变化 | 第22-23页 |
1.1.3.3 UVB损伤HaCaT细胞对内质网未折叠伴侣蛋白GRP78mRNA、GRP94mRNA及蛋白的表达 | 第23-25页 |
1.1.3.4 UVB诱导HaCaT细胞对三种内质网应激感应分子的影响 | 第25-27页 |
1.1.3.5 PERK/eIF2α/CHOP通路参与UVB诱导HaCaT细胞凋亡 | 第27-28页 |
1.1.3.6 UVB损伤HaCaT细胞对内质网伴侣蛋白CHOP/GADD153mRNA及其蛋白表达的影响 | 第28-29页 |
1.1.3.7 UVB损伤HaCaT细胞对Bax/Bcl-2的影响 | 第29-30页 |
1.1.3.8 siRNA抑制CHOP基因对UVB诱导HaCaT细胞凋亡对Bax/Bcl-2的影响 | 第30-32页 |
讨论 | 第32-38页 |
1.2 UVB诱导HaCaT细胞凋亡中内质网应激与ROS的关系研究 | 第38-48页 |
1.2.1 实验材料 | 第38页 |
1.2.2 实验方法 | 第38-39页 |
1.2.2.1 细胞培养及实验分组 | 第38页 |
1.2.2.2 MTT法细胞活性测定 | 第38页 |
1.2.2.3 Hoechst 333258荧光染色 | 第38-39页 |
1.2.2.4 细胞内ROS含量检测 | 第39页 |
1.2.2.5 统计学分析 | 第39页 |
1.2.3 结果 | 第39-44页 |
1.2.3.1 NAC和4-PBA预处理对UVB损伤HaCaT细胞活性和细胞凋亡的影响 | 第39-40页 |
1.2.3.2 NAC和4-PBA预处理对UVB损伤HaCaT细胞ROS水平的影响 | 第40-42页 |
1.2.3.3 NAC和4-PBA预处理对UVB损伤HaCaT细胞GRP78和CHOP/GADD153表达的影响 | 第42-43页 |
1.2.3.4 NAC和4-PBA预处理对UVB损伤HaCaT细胞Bax和Bcl-2表达的影响 | 第43-44页 |
讨论 | 第44-48页 |
第二章 扇贝多肽通过内质网应激通路对UVB诱导的HaCaT细胞凋亡的保护作用研究 | 第48-60页 |
2.1 实验材料 | 第49页 |
2.2 实验方法 | 第49-50页 |
2.2.1 细胞培养与分组 | 第49页 |
2.2.2 细胞活力检测 | 第49页 |
2.2.3 Hoechst 33258荧光染色 | 第49-50页 |
2.2.4 ROS含量检测 | 第50页 |
2.2.5 免疫印迹检测蛋白表达 | 第50页 |
2.2.6 统计学处理 | 第50页 |
2.3 结果 | 第50-56页 |
2.3.1 PCF对UVB诱导HaCaT细胞存活率的影响 | 第50-51页 |
2.3.2 PCF对UVB诱导HaCaT细胞凋亡的影响 | 第51-53页 |
2.3.3 PCF对UVB照射HaCaT细胞ROS产生量的影响 | 第53-54页 |
2.3.4 PCF对UVB诱导HaCaT细胞GRP78、p-PERK、p-eIF2α、CHOP/GADD153蛋白表达的影响 | 第54-56页 |
讨论 | 第56-60页 |
结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
综述 | 第67-89页 |
综述参考文献 | 第80-89页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第89-90页 |
附录(中英文缩略词表) | 第90-91页 |
致谢 | 第91-92页 |