| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 引言 | 第9-17页 |
| ·研究背景 | 第9-13页 |
| ·乙酰辅酶A及其衍生物简述 | 第9页 |
| ·乙酰辅酶A代谢 | 第9-11页 |
| ·S.cerevisiae乙酰辅酶合成酶 | 第11-12页 |
| ·调控细胞内乙酰辅酶A含量在工业生产中重要的作用 | 第12-13页 |
| ·立题依据 | 第13-15页 |
| ·乙酰辅酶A的国内外研究概况 | 第13-14页 |
| ·本课题的研究意义 | 第14-15页 |
| ·研究内容 | 第15-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-23页 |
| ·菌种和培养基 | 第17页 |
| ·菌种与质粒 | 第17页 |
| ·培养基 | 第17页 |
| ·培养方法 | 第17-18页 |
| ·培养条件 | 第17-18页 |
| ·表达载体的构建 | 第18-19页 |
| ·DNA操作 | 第18页 |
| ·表达载体和过量表达菌株的构建 | 第18页 |
| ·细胞中总蛋白的测定 | 第18-19页 |
| ·细胞内乙酰辅酶A含量和乙酰辅酶A合成酶活力的测定 | 第19页 |
| ·细胞内ATP含量的测定 | 第19页 |
| ·细胞代谢副产物的测定 | 第19页 |
| ·细胞死亡率的测定 | 第19-20页 |
| ·细胞内游离氨基酸的测定 | 第20页 |
| ·关键代谢途径基因转录的测定 | 第20页 |
| ·基因芯片技术检测细胞全基因组转录变化情况 | 第20-23页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第23-48页 |
| ·乙酰辅酶A合成酶基因过量表达菌株的构建与鉴定 | 第23-26页 |
| ·过量表达载体的构建 | 第23-24页 |
| ·过量表达ACS1和ACS2的过量表达菌株的构建 | 第24页 |
| ·过量表达乙酰辅酶A合成酶后细胞内乙酰辅酶A合成酶活性变化情况 | 第24-25页 |
| ·过量表达乙酰辅酶A合成酶基因后S.cerevisiae细胞内乙酰辅酶A含量变化 | 第25-26页 |
| ·过量表达乙酰辅酶A合成基因后S.cerevisiae生理代谢的变化情况 | 第26-32页 |
| ·过量表达乙酰辅酶A合成酶基因后细胞氨基酸代谢变化情况 | 第26-27页 |
| ·过量表达乙酰辅酶A合成酶基因后细胞能量代谢变化情况 | 第27页 |
| ·过量表达乙酰辅酶A合成酶基因甲羟戊酸代谢途径转录变化 | 第27-28页 |
| ·不同浓度乙酸对过量表达菌株甲羟戊酸代谢途径转录的影响 | 第28-30页 |
| ·过量表达ACS1后细胞全基因组转录变化情况 | 第30-32页 |
| ·过量表达乙酰辅酶A合成酶基因后细胞对乙醇胁迫的抗性变化情况 | 第32-46页 |
| ·不同浓度乙醇胁迫对乙酰辅酶A合成酶途径加强菌株生长代谢的影响 | 第32-34页 |
| ·过量表达ACS1/2菌株在不同浓度乙醇胁迫下能量代谢变化情况 | 第34-35页 |
| ·过量表达ACS1/2菌株在不同浓度乙醇胁迫下副产物变化情况 | 第35-38页 |
| ·过量表达ACS1/2菌株在5%乙醇胁迫下关键途径基因转录变化情况 | 第38-42页 |
| ·对照菌株和表达ACS1/2菌株在5%乙醇胁迫下全基因组转录变化情况 | 第42-46页 |
| ·结论 | 第46-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54页 |
