摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
缩略符号说明 | 第6-9页 |
1 绪论 | 第9-20页 |
1.1 大肠杆菌O157:H | 第9-11页 |
1.1.1 大肠杆菌O157:H7概述 | 第9-10页 |
1.1.2 大肠杆菌O157:H7的检测 | 第10-11页 |
1.2 适配体 | 第11-17页 |
1.2.1 适配体概述 | 第11页 |
1.2.2 适配体的特点 | 第11-12页 |
1.2.3 适配体的筛选方法(SELEX) | 第12-16页 |
1.2.4 适配体在食源性致病菌检测中的应用 | 第16-17页 |
1.3 金属有机骨架材料(MOF) | 第17-18页 |
1.3.1 MOF概述 | 第17页 |
1.3.2 MOF在催化方面的应用及研究进展 | 第17-18页 |
1.4 本课题的立题意义和研究内容 | 第18-20页 |
2 实验材料与方法 | 第20-28页 |
2.1 试剂与材料 | 第20页 |
2.1.1 实验菌种 | 第20页 |
2.1.2 实验试剂 | 第20页 |
2.2 主要仪器 | 第20-21页 |
2.3 随机ssDNA文库和引物的构建 | 第21页 |
2.4 实验方法 | 第21-28页 |
2.4.1 细菌生长曲线的测定与菌种处理 | 第21页 |
2.4.2 大肠杆菌O157:H7适配体的筛选 | 第21-23页 |
2.4.3 克隆、测序和序列分析 | 第23-24页 |
2.4.4 大肠杆菌O157:H7与适配体结合机理的初步研究 | 第24页 |
2.4.5 基于适配体识别-过氧化物模拟酶Cu-MOF可视化检测大肠杆菌O157:H7的方法构建 | 第24-25页 |
2.4.6 Cu-MOF的制备与修饰 | 第25页 |
2.4.7 实验条件优化 | 第25-26页 |
2.4.7.1 Cu-MOF与适配体连接条件的优化 | 第25页 |
2.4.7.2 Cu-MOF与TMB-H2O2溶液反应条件的优化 | 第25-26页 |
2.4.7.3 连接有适配体的Cu-MOF用量的优化 | 第26页 |
2.4.8 大肠杆菌O157:H7的检测 | 第26页 |
2.4.9 大肠杆菌O157:H7的实际样品检测 | 第26-27页 |
2.4.10 过氧化物模拟酶Cu-MOF与辣根过氧化物酶HRP性质比较 | 第27-28页 |
3 结果与讨论 | 第28-44页 |
3.1 大肠杆菌O157:H7的生长曲线的测定 | 第28页 |
3.2 大肠杆菌O157:H7适配体的筛选 | 第28-33页 |
3.2.1 PCR循环数的优化 | 第28-29页 |
3.2.2 每轮PCR产物的电泳结果 | 第29页 |
3.2.3 适配体筛选轮数的优化 | 第29-30页 |
3.2.4 序列分析 | 第30页 |
3.2.5 亲和性分析 | 第30-31页 |
3.2.6 特异性分析 | 第31-33页 |
3.2.7 大肠杆菌O157:H7适配体结构分析 | 第33页 |
3.3 大肠杆菌O157:H7与适配体结合位点的分析 | 第33-35页 |
3.4 Cu-MOF的制备与表征 | 第35-37页 |
3.5 亲和素包被的Cu-MOF的表征 | 第37-38页 |
3.6 实验条件优化 | 第38-41页 |
3.6.1 Cu-MOF与适配体连接条件的优化 | 第38-39页 |
3.6.2 Cu-MOF与TMB-H2O2溶液反应条件的优化 | 第39-40页 |
3.6.3 连接有适配体的Cu-MOF浓度的优化 | 第40-41页 |
3.7 基于适配体识别-过氧化物模拟酶Cu-MOF可视化检测大肠杆菌O157:H7的方法构建 | 第41-43页 |
3.7.1 大肠杆菌O157:H7检测的线性范围和检出限 | 第41-42页 |
3.7.2 大肠杆菌O157:H7检测的特异性 | 第42页 |
3.7.3 大肠杆菌O157:H7的实际样品检测 | 第42-43页 |
3.8 过氧化物模拟酶Cu-MOF与辣根过氧化物酶HRP性质比较 | 第43-44页 |
主要结论与展望 | 第44-46页 |
主要结论 | 第44页 |
展望 | 第44-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-54页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54页 |