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不同生长期大肠杆菌O157:H7适配体的筛选及应用研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
缩略符号说明第6-9页
1 绪论第9-20页
    1.1 大肠杆菌O157:H第9-11页
        1.1.1 大肠杆菌O157:H7概述第9-10页
        1.1.2 大肠杆菌O157:H7的检测第10-11页
    1.2 适配体第11-17页
        1.2.1 适配体概述第11页
        1.2.2 适配体的特点第11-12页
        1.2.3 适配体的筛选方法(SELEX)第12-16页
        1.2.4 适配体在食源性致病菌检测中的应用第16-17页
    1.3 金属有机骨架材料(MOF)第17-18页
        1.3.1 MOF概述第17页
        1.3.2 MOF在催化方面的应用及研究进展第17-18页
    1.4 本课题的立题意义和研究内容第18-20页
2 实验材料与方法第20-28页
    2.1 试剂与材料第20页
        2.1.1 实验菌种第20页
        2.1.2 实验试剂第20页
    2.2 主要仪器第20-21页
    2.3 随机ssDNA文库和引物的构建第21页
    2.4 实验方法第21-28页
        2.4.1 细菌生长曲线的测定与菌种处理第21页
        2.4.2 大肠杆菌O157:H7适配体的筛选第21-23页
        2.4.3 克隆、测序和序列分析第23-24页
        2.4.4 大肠杆菌O157:H7与适配体结合机理的初步研究第24页
        2.4.5 基于适配体识别-过氧化物模拟酶Cu-MOF可视化检测大肠杆菌O157:H7的方法构建第24-25页
        2.4.6 Cu-MOF的制备与修饰第25页
        2.4.7 实验条件优化第25-26页
            2.4.7.1 Cu-MOF与适配体连接条件的优化第25页
            2.4.7.2 Cu-MOF与TMB-H2O2溶液反应条件的优化第25-26页
            2.4.7.3 连接有适配体的Cu-MOF用量的优化第26页
        2.4.8 大肠杆菌O157:H7的检测第26页
        2.4.9 大肠杆菌O157:H7的实际样品检测第26-27页
        2.4.10 过氧化物模拟酶Cu-MOF与辣根过氧化物酶HRP性质比较第27-28页
3 结果与讨论第28-44页
    3.1 大肠杆菌O157:H7的生长曲线的测定第28页
    3.2 大肠杆菌O157:H7适配体的筛选第28-33页
        3.2.1 PCR循环数的优化第28-29页
        3.2.2 每轮PCR产物的电泳结果第29页
        3.2.3 适配体筛选轮数的优化第29-30页
        3.2.4 序列分析第30页
        3.2.5 亲和性分析第30-31页
        3.2.6 特异性分析第31-33页
        3.2.7 大肠杆菌O157:H7适配体结构分析第33页
    3.3 大肠杆菌O157:H7与适配体结合位点的分析第33-35页
    3.4 Cu-MOF的制备与表征第35-37页
    3.5 亲和素包被的Cu-MOF的表征第37-38页
    3.6 实验条件优化第38-41页
        3.6.1 Cu-MOF与适配体连接条件的优化第38-39页
        3.6.2 Cu-MOF与TMB-H2O2溶液反应条件的优化第39-40页
        3.6.3 连接有适配体的Cu-MOF浓度的优化第40-41页
    3.7 基于适配体识别-过氧化物模拟酶Cu-MOF可视化检测大肠杆菌O157:H7的方法构建第41-43页
        3.7.1 大肠杆菌O157:H7检测的线性范围和检出限第41-42页
        3.7.2 大肠杆菌O157:H7检测的特异性第42页
        3.7.3 大肠杆菌O157:H7的实际样品检测第42-43页
    3.8 过氧化物模拟酶Cu-MOF与辣根过氧化物酶HRP性质比较第43-44页
主要结论与展望第44-46页
    主要结论第44页
    展望第44-46页
致谢第46-47页
参考文献第47-54页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第54页

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