| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略词 | 第9-10页 |
| 1 绪论 | 第10-19页 |
| 1.1 淀粉蔗糖酶 | 第10-14页 |
| 1.1.1 淀粉蔗糖酶的简介 | 第10-11页 |
| 1.1.2 淀粉蔗糖酶的结构 | 第11页 |
| 1.1.3 淀粉蔗糖酶的催化机理 | 第11-14页 |
| 1.2 淀粉蔗糖酶的应用 | 第14-17页 |
| 1.2.1 酶工程在淀粉修饰领域的作用 | 第14页 |
| 1.2.2 淀粉蔗糖酶在修饰淀粉方面的应用 | 第14-15页 |
| 1.2.3 淀粉蔗糖酶的转糖基作用 | 第15页 |
| 1.2.4 熊果苷简介与自然界来源 | 第15-16页 |
| 1.2.5 熊果苷的有机合成法 | 第16页 |
| 1.2.6 熊果苷的生物转化法 | 第16页 |
| 1.2.7 熊果苷的酶合成法 | 第16-17页 |
| 1.3 课题的研究背景及意义 | 第17-18页 |
| 1.4 课题的主要研究内容 | 第18-19页 |
| 2 实验材料与方法 | 第19-27页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第19页 |
| 2.1.1 质粒与菌种 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第19页 |
| 2.2 培养基与试剂 | 第19-21页 |
| 2.2.1 LB培养基(Luria-Bertani) | 第19-20页 |
| 2.2.2 Ni2+亲和色谱色谱柱缓冲液 | 第20页 |
| 2.2.3 Bradford法测蛋白相关试剂 | 第20页 |
| 2.2.4 SDS-PAGE电泳相关试剂 | 第20-21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-27页 |
| 2.3.1 基因克隆 | 第21页 |
| 2.3.2 E.coliBL21(DE3)感受细胞的制备 | 第21页 |
| 2.3.3 基因重组菌的构建及诱导表达 | 第21页 |
| 2.3.4 质粒DNA的提取 | 第21-22页 |
| 2.3.5 基因重组菌的纯化 | 第22页 |
| 2.3.6 重组酶的分子量大小和蛋白定量 | 第22-23页 |
| 2.3.7 重组酶的酶活测定与定义 | 第23页 |
| 2.3.8 反应pH、温度以及金属离子对酶活的影响 | 第23页 |
| 2.3.9 温度对重组酶的影响 | 第23页 |
| 2.3.10 以蔗糖为唯一底物反应体系的产物鉴定 | 第23-24页 |
| 2.3.10.1 碘显色反应 | 第23-24页 |
| 2.3.10.2 酶反应可溶性产物的分离纯化 | 第24页 |
| 2.3.10.3 红外检测与核磁检测 | 第24页 |
| 2.3.10.4 离子交换色谱 | 第24页 |
| 2.3.11 淀粉蔗糖酶在产α-熊果苷的应用 | 第24-26页 |
| 2.3.11.1 标准酶反应与定义 | 第24-25页 |
| 2.3.11.2 产物α-熊果苷的分离与纯化 | 第25页 |
| 2.3.11.3 产物结构鉴定 | 第25页 |
| 2.3.11.4 酶浓度对反应的影响 | 第25页 |
| 2.3.11.5 pH与温度对酶活的影响 | 第25-26页 |
| 2.3.11.6 抗坏血酸对α-熊果苷产率的影响 | 第26页 |
| 2.3.11.7 糖基供体和糖基受体比例以及底物浓度对α-熊果苷产率的影响 | 第26页 |
| 2.3.11.8 反应温度和时间对α-熊果苷产率的影响 | 第26页 |
| 2.3.12 数据分析 | 第26-27页 |
| 3 结果与讨论 | 第27-47页 |
| 3.1 CC-AS的基因序列和氨基酸序列对比分析 | 第27-29页 |
| 3.2 重组CC-AS的表达与分离纯化 | 第29-30页 |
| 3.3 pH和温度对重组酶CC-AS酶活的影响 | 第30-31页 |
| 3.4 温度对重组酶CC-AS稳定性的影响 | 第31-33页 |
| 3.5 金属离子对重组酶酶活的影响 | 第33页 |
| 3.6 以蔗糖为唯一底物反应体系的产物鉴定 | 第33-39页 |
| 3.6.1 碘显色反应 | 第33-34页 |
| 3.6.2 红外检测 | 第34-35页 |
| 3.6.3 核磁检测 | 第35-36页 |
| 3.6.4 离子交换色谱法 | 第36-38页 |
| 3.6.5 温度对CC-AS产α-葡聚糖的影响 | 第38-39页 |
| 3.7 淀粉蔗糖酶在产α-熊果苷的应用 | 第39-47页 |
| 3.7.1 使用CC-AS合成α-熊果苷 | 第39-40页 |
| 3.7.2 产物结构鉴定 | 第40-41页 |
| 3.7.3 pH与温度对合成α-熊果苷的影响 | 第41-42页 |
| 3.7.4 L-抗坏血酸对产α-熊果苷反应的影响 | 第42-43页 |
| 3.7.5 底物供受体比例和浓度对产α-熊果苷反应的影响 | 第43-44页 |
| 3.7.6 酶浓度对产α-熊果苷反应的影响 | 第44-45页 |
| 3.7.7 CC-AS产α-熊果苷的生物转化过程 | 第45-47页 |
| 主要结论与展望 | 第47-49页 |
| 致谢 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第57页 |
