| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-15页 |
| ·黄酒概述 | 第7-8页 |
| ·黄酒的营养价值和保健功能 | 第7页 |
| ·中国黄酒业的现状及发展方向 | 第7-8页 |
| ·氨基甲酸乙酯的研究进展 | 第8-9页 |
| ·氨基甲酸乙酯简介 | 第8页 |
| ·氨基甲酸乙酯的代谢途径和危害 | 第8-9页 |
| ·黄酒中氨基甲酸乙酯的形成及去除 | 第9页 |
| ·黄酒中氨基甲酸乙酯的测定方法 | 第9页 |
| ·尿素—EC 的前体物质 | 第9-12页 |
| ·黄酒中的尿素 | 第9-10页 |
| ·降低酒精饮料中尿素的方法 | 第10-12页 |
| ·基因敲除技术在酿酒酵母基因工程菌中的应用 | 第12-13页 |
| ·同源重组进行基因敲除 | 第12页 |
| ·筛选标记的重复利用 | 第12页 |
| ·基因敲除组件的构建 | 第12-13页 |
| ·基因敲除技术的展望 | 第13页 |
| ·本课题的研究背景与意义 | 第13-14页 |
| ·本课题的主要研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-23页 |
| ·实验材料 | 第15-16页 |
| ·菌株和质粒 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15页 |
| ·培养基 | 第15-16页 |
| ·主要仪器和设备 | 第16页 |
| ·引物 | 第16页 |
| ·实验方法 | 第16-23页 |
| ·低产尿素黄酒酵母工程菌的构建 | 第16-20页 |
| ·精氨酸酶活力测定 | 第20-21页 |
| ·酵母发酵性能检测 | 第21页 |
| ·低产尿素工程菌单因素优化实验 | 第21页 |
| ·指标检测 | 第21-23页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第23-43页 |
| ·低产尿素黄酒酵母工程菌的构建 | 第23-32页 |
| ·黄酒酵母 85~#基因组提取 | 第23-24页 |
| ·在抗性基因 Sh ble 两端加入 loxp 位点 | 第24-25页 |
| ·Overlap-PCR 构建敲除组件 | 第25-28页 |
| ·酵母转化实验中 Zeocin 抗生素浓度的确定 | 第28-29页 |
| ·黄酒酵母 85~#菌株精氨酸酶基因(CAR1)的敲除 | 第29-30页 |
| ·抗性基因的去除 | 第30-32页 |
| ·小结 | 第32页 |
| ·低产尿素黄酒酵母工程菌发酵性能考察 | 第32-35页 |
| ·胞内精氨酸酶活力测定 | 第32页 |
| ·黄酒发酵实验中尿素含量的测定 | 第32-33页 |
| ·酵母发酵性能考察及酒液中常规指标的测定 | 第33-34页 |
| ·发酵液中 EC 含量检测和风味物质评价 | 第34页 |
| ·遗传稳定性分析 | 第34-35页 |
| ·小结 | 第35页 |
| ·低产尿素黄酒酵母工程菌发酵工艺初步研究 | 第35-43页 |
| ·主酵温度对尿素产生量的影响 | 第35-36页 |
| ·浸米时间对尿素产生量的影响 | 第36-38页 |
| ·料水比对尿素产生量的影响 | 第38-39页 |
| ·原料米品种对尿素产生量的影响 | 第39-40页 |
| ·正交实验优化 | 第40-41页 |
| ·验证实验 | 第41页 |
| ·小结 | 第41-43页 |
| 第四章 主要结论与展望 | 第43-45页 |
| ·主要结论 | 第43页 |
| ·展望 | 第43-45页 |
| 致谢 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 附录 | 第53页 |