| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-19页 |
| ·引言 | 第9-11页 |
| ·胆固醇的研究概述 | 第9-10页 |
| ·胆盐水解酶降胆固醇作用概述 | 第10-11页 |
| ·胆盐水解酶的概述 | 第11-17页 |
| ·产胆盐水解酶的益生菌 | 第11-12页 |
| ·胆盐水解酶的功能 | 第12-14页 |
| ·胆盐水解酶酶活测定方法 | 第14-16页 |
| ·胆盐水解酶相关基因水平的研究 | 第16-17页 |
| ·胆盐水解酶研究的热点和问题 | 第17页 |
| ·立题依据和研究内容 | 第17-19页 |
| ·本研究的重要意义 | 第17-18页 |
| ·主要研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 植物乳杆菌JPP2 各胆盐水解酶相关基因的克隆、表达和序列分析 | 第19-33页 |
| ·引言 | 第19-20页 |
| ·材料与方法 | 第20-24页 |
| ·菌株和质粒 | 第20页 |
| ·试剂和仪器 | 第20-24页 |
| ·主要试剂 | 第20-21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-24页 |
| ·结果 | 第24-30页 |
| ·基因组DNA 的提取和目的基因的扩增 | 第24-25页 |
| ·BSH 相关基因片段的核酸序列分析 | 第25-26页 |
| ·BSH 相关基因片段的氨基酸序列分析 | 第26-28页 |
| ·克隆载体的构建 | 第28页 |
| ·表达载体的构建 | 第28-30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| ·本章小结 | 第31-33页 |
| 第三章 植物乳杆菌JPP2 胆盐水解酶的分离纯化 | 第33-43页 |
| ·前言 | 第33-34页 |
| ·材料与方法 | 第34-38页 |
| ·实验菌株 | 第34页 |
| ·试剂与仪器 | 第34-35页 |
| ·表达宿主菌的诱导表达 | 第35-36页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 鉴定 | 第36页 |
| ·包涵体的鉴定 | 第36页 |
| ·包涵体的提取和溶解 | 第36页 |
| ·金属螯合亲和层析法纯化目的蛋白 | 第36-37页 |
| ·重组蛋白的柱上复性 | 第37页 |
| ·重组蛋白的逐级透析复性 | 第37页 |
| ·重组蛋白的可溶表达 | 第37页 |
| ·游离氨基酸法测定酶活 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-40页 |
| ·诱导表达产物的SDS-PAGE 检测 | 第38-39页 |
| ·重组蛋白包涵体的观察 | 第39页 |
| ·金属螯合亲和层析法纯化重组蛋白 | 第39-40页 |
| ·重组蛋白的复性结果 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| ·本章小结 | 第41-43页 |
| 第四章 植物乳杆菌JPP2 胆盐水解酶诱导表达和酶活测定 | 第43-49页 |
| ·前言 | 第43-44页 |
| ·材料与方法 | 第44-47页 |
| ·实验菌株 | 第44页 |
| ·试剂与仪器 | 第44-45页 |
| ·菌种的挑选与保存 | 第45页 |
| ·表达宿主菌的扩增与诱导表达 | 第45页 |
| ·粗酶液的制备 | 第45-46页 |
| ·酶蛋白含量的测定 | 第46页 |
| ·利用HPLC 法对酶活性进行测定 | 第46-47页 |
| ·结果 | 第47-48页 |
| ·胆盐水解酶蛋白质含量测定 | 第47页 |
| ·高效液相色谱法测胆盐水解酶活 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48页 |
| ·本章小结 | 第48-49页 |
| 全文主要结论 | 第49-50页 |
| 问题与展望 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文清单 | 第56页 |