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构建fks1缺陷型啤酒酵母基因工程菌改良自溶性能

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
第一章 引言第8-12页
   ·酵母自溶第8-9页
     ·酵母自溶概念及原理第8页
     ·酵母自溶对啤酒质量的影响第8-9页
     ·防治酵母自溶的措施第9页
   ·酵母自溶国内外研究进展第9-10页
     ·酵母自溶与细胞壁代谢关系第9-10页
     ·酵母自溶的应用第10页
   ·立题背景与立题意义第10-11页
     ·立题背景第10-11页
     ·立题意义第11页
   ·研究思路与研究内容第11-12页
第二章 材料与方法第12-22页
   ·材料第12-14页
     ·主要材料第12-13页
     ·主要仪器第13-14页
   ·实验方法第14-19页
     ·啤酒酵母染色体DNA 的提取第14页
     ·啤酒酵母 β-1,3-葡聚糖合成酶 fks1 和铜抗基因 cup1 的扩增第14-15页
     ·fks1 与 pMD-18-T Vector 载体连接第15页
     ·大肠杆菌E. coli JM 109 感受态的制备及转化程序第15页
     ·大肠杆菌重组质粒的抽提第15-16页
     ·重组质粒鉴定第16页
     ·啤酒酵母感受态的制备及转化程序第16页
     ·转化子筛选培养基的确定第16-17页
     ·阳性转化子鉴定第17页
     ·工程菌的遗传稳定性分析第17页
     ·细胞壁β-葡聚糖的提取测定第17页
     ·样品制备第17-18页
     ·菌种扩大培养步骤第18页
     ·麦汁的制备第18页
     ·主酵实验第18页
     ·后酵实验及成品啤酒第18页
     ·生长性能试验第18-19页
     ·工程菌G-03/C 及出发菌的继代培养第19页
   ·主要分析方法第19-22页
     ·氨基酸的测定第19页
     ·游离脂肪酸的测定第19页
     ·α-氨基氮的测定第19页
     ·总氮的测定第19-20页
     ·甲醛氮的测定第20页
     ·死亡率的测定第20页
     ·细胞形态和细胞浓度第20页
     ·热致死温度的测定第20页
     ·絮凝性的测定(光密度改良法)第20页
     ·羰基化合物含量(TBA 值)第20-21页
     ·光法测定DPPH 清除率第21页
     ·分光法测定TRAP第21页
     ·SI (Stability Index) 系数第21页
     ·啤酒风味保鲜期的预测第21页
     ·啤酒常规发酵指标的测定第21-22页
第三章 结果与讨论第22-35页
   ·构建fks1缺陷型的啤酒酵母基因工程菌第22-27页
     ·啤酒酵母fks1、cup1 获得第22-23页
     ·PCR 产物的TA 克隆以及序列测定第23页
     ·重组质粒的构建第23-25页
     ·目的片段的获得第25页
     ·酵母菌的转化以及转化子的验证第25-26页
     ·工程菌的遗传稳定性初步分析第26页
     ·工程菌细胞壁β-葡聚糖初步分析第26页
     ·工程菌与原菌电镜切片分析第26-27页
   ·酵母自溶判定指标的初步建立第27-32页
     ·酵母自溶的分析第27-28页
     ·酵母自溶对α-氨基氮的影响第28-29页
     ·酵母自溶对氨基酸的影响第29页
     ·酵母自溶对总氮的影响第29-30页
     ·酵母自溶指标的建立第30页
     ·酵母自溶指标的验证第30-31页
     ·工程菌与原菌的自溶性能比较第31-32页
   ·工程菌G-03/C 生理特性及发酵性能分析第32-35页
     ·工程菌与原菌的生长性能比较第32页
     ·工程菌与原菌的生理性能比较第32页
     ·工程菌和对照菌发酵性能比较第32-33页
     ·工程菌和对照菌主要老化指标比较第33-34页
     ·工程菌和出发菌成品啤酒品评第34-35页
主要结论与展望第35-37页
致谢第37-38页
参考文献第38-42页
附录第42-44页
攻读硕士学位期间发表论文第44页

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