| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 英文缩略语索引 | 第8-12页 |
| 1 绪论 | 第12-24页 |
| 1.1 副溶血弧菌 | 第12-13页 |
| 1.1.1 生理生化特征 | 第12页 |
| 1.1.2 致病机理 | 第12-13页 |
| 1.2 副溶血弧菌的耐药 | 第13-16页 |
| 1.2.1 副溶血弧菌的耐药现状 | 第13-14页 |
| 1.2.2 药敏实验方法 | 第14-16页 |
| 1.3 多步体外诱导 | 第16-18页 |
| 1.3.1 体外诱导的机理 | 第17页 |
| 1.3.2 体外诱导方法的应用 | 第17-18页 |
| 1.4 喹诺酮类药物耐药性研究进展 | 第18-21页 |
| 1.4.1 喹诺酮类药物及其抑菌机理 | 第18页 |
| 1.4.2 细菌的喹诺酮类药物耐药机理 | 第18-21页 |
| 1.5 研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 1.6 技术路线图 | 第22-23页 |
| 1.7 论文的主要研究内容 | 第23-24页 |
| 2 副溶血弧菌多重耐药菌株的诱导 | 第24-37页 |
| 2.1 材料、试剂与仪器设备 | 第24-26页 |
| 2.1.1 菌株与培养基 | 第24页 |
| 2.1.2 试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第25页 |
| 2.1.4 其它材料 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法与步骤 | 第26-27页 |
| 2.2.1 前期准备 | 第26页 |
| 2.2.2 体外最小抑菌浓度测定 | 第26页 |
| 2.2.3 耐药菌株的体外诱导 | 第26-27页 |
| 2.2.4 诱导后菌株MIC值测定 | 第27页 |
| 2.2.5 诱导后菌株的适应性测定实验 | 第27页 |
| 2.2.6 诱导后菌株的耐药稳定性实验 | 第27页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第27-36页 |
| 2.3.1 始发菌株的选择 | 第27-28页 |
| 2.3.2 茶多酚和 ε-聚赖氨酸诱导菌株的最小抑菌浓度测定 | 第28-29页 |
| 2.3.3 抗生素诱导菌株的最小抑菌浓度测定 | 第29-31页 |
| 2.3.4 诱导后菌株的适应性分析 | 第31-33页 |
| 2.3.5 诱导后菌株的耐药稳定性实验 | 第33-36页 |
| 2.4 小结 | 第36-37页 |
| 3 始发菌株F7的全基因组测序及序列分析 | 第37-47页 |
| 3.1 材料、试剂与仪器设备 | 第37页 |
| 3.1.1 菌株与培养基 | 第37页 |
| 3.1.2 仪器设备 | 第37页 |
| 3.1.3 其它 | 第37页 |
| 3.2 实验方法与步骤 | 第37-41页 |
| 3.2.1 样品预处理 | 第37页 |
| 3.2.2 单分子PacBio测序 | 第37-38页 |
| 3.2.3 基因预测与功能注释 | 第38-39页 |
| 3.2.4 高级分析 | 第39-41页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第41-46页 |
| 3.3.1 数据质控与统计 | 第41页 |
| 3.3.2 基因预测与基因组序列分析 | 第41-42页 |
| 3.3.3 GO注释 | 第42-43页 |
| 3.3.4 系统发育树分析 | 第43-44页 |
| 3.3.5 耐药相关基因分析 | 第44页 |
| 3.3.6 RND家族基因序列比对 | 第44-46页 |
| 3.4 小结 | 第46-47页 |
| 4 喹诺酮类药物耐药相关基因检测与分析 | 第47-59页 |
| 4.1 材料、试剂、仪器 | 第47-48页 |
| 4.1.1 材料与试剂 | 第47页 |
| 4.1.2 仪器设备 | 第47-48页 |
| 4.2 实验方法与步骤 | 第48-53页 |
| 4.2.1 前期准备实验 | 第48页 |
| 4.2.2 DNA的提取与浓度测定 | 第48-49页 |
| 4.2.3 普通PCR扩增与凝胶电泳 | 第49-50页 |
| 4.2.4 总RNA提取 | 第50-51页 |
| 4.2.5 DNA的去除与cDNA的逆转录 | 第51页 |
| 4.2.6 RND外排泵相关基因表达分析 | 第51-53页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第53-58页 |
| 4.3.1 DNA浓度和凝胶电泳测定 | 第53页 |
| 4.3.2 gyrA与parC基因PCR扩增产物检测结果 | 第53-56页 |
| 4.3.3 外排泵基因的相对表达量测定 | 第56-58页 |
| 4.4 小结 | 第58-59页 |
| 5 总结与展望 | 第59-61页 |
| 5.1 总结 | 第59-60页 |
| 5.2 创新点分析 | 第60页 |
| 5.3 展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-70页 |
| 致谢 | 第70页 |