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磷脂酶A1的非水相催化及固定化研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
致谢第9-15页
第一章 绪论第15-23页
   ·卵磷脂(PC)及甘油磷酸胆碱(GPC)第15-17页
     ·卵磷脂(PC)第15页
     ·甘油磷酸胆碱(GPC)第15-17页
   ·磷脂酶 A1(PLA1)第17页
   ·非水相酶催化第17-19页
     ·非水相酶催化介质体系第17-18页
     ·非水相酶催化的优点及含水的作用第18页
     ·促进酶在非水相催化活性的方法第18-19页
       ·酶的处理第18-19页
       ·酶反应体系的选择第19页
   ·固定化方法第19-21页
     ·吸附法第20页
     ·包埋法第20页
     ·交联法第20-21页
     ·共价连接法第21页
   ·本课题的研究内容、创新点及意义第21-23页
     ·选题依据、意义及创新点第21页
     ·研究内容及思路第21-23页
第二章 反应体系的构建及磷脂酶催化制备 GPC 研究第23-30页
   ·引言第23页
   ·实验仪器及材料第23-24页
   ·实验方法第24-25页
     ·反应体系的构建第24页
     ·微乳体系的鉴定第24页
     ·催化反应第24页
     ·产物初步纯化——萃取工艺研究第24-25页
       ·第一次萃取第25页
       ·第二次萃取第25页
     ·产物分析方法的建立第25页
       ·GPC 粗品转化率的计算第25页
       ·TLC 检测第25页
       ·HPLC 检测第25页
   ·实验结果与分析第25-29页
     ·反应体系的构建第25-26页
     ·微乳液的鉴定第26页
       ·稳定性考察结果第26页
       ·粒径测量第26页
     ·萃取工艺第26-27页
       ·第一次萃取第27页
       ·第二次萃取第27页
     ·产物的分析检测第27-29页
       ·TLC 检测第27-28页
       ·HPLC-ELSD 检测第28-29页
   ·本章小结第29-30页
第三章 酶法制备 GPC 的工艺优化及催化机理初探第30-48页
   ·引言第30页
   ·实验仪器及材料第30-31页
   ·实验方法第31-36页
     ·催化工艺的优化第31-34页
       ·酸碱滴定第31页
       ·GPC 产率的计算第31-32页
       ·反应时间的确定第32页
       ·反应温度第32页
       ·初始 pH第32页
       ·酶与缓冲液体积比第32-33页
       ·Ca2+对产物产量的影响第33页
       ·底物补加工艺的研究第33-34页
     ·溶媒回收第34-35页
       ·反应试剂的回收第34-35页
       ·萃取试剂的回收第35页
     ·优化后工艺放大制备 GPC 粗品第35-36页
     ·催化机理研究——中间产物的生成与转化第36页
   ·实验结果与分析第36-47页
     ·催化工艺的优化第36-43页
       ·反应时间的确定第36-37页
       ·反应温度第37页
       ·初始 pH第37-38页
       ·酶与缓冲液体积比第38-39页
       ·Ca2+对产物产量的影响第39页
       ·GPC 产率的计算第39页
       ·初始底物浓度的确定第39-40页
       ·补加底物浓度的确定第40-41页
       ·补加底物质量的确定第41-42页
       ·补加工艺反应时间的确定第42-43页
       ·补加时间的确定第43页
       ·补加的缓冲液量的确定第43页
     ·溶媒的回收第43-45页
       ·反应试剂的回收第43-45页
       ·萃取试剂的回收第45页
     ·优化后工艺放大制备 GPC 粗品第45-46页
       ·HPLC 检测 GPC 粗品第45页
       ·GPC 粗品的转化率、含量、产率第45-46页
     ·催化机理初探——中间产物 LPC 的生成与转化第46-47页
   ·本章小结第47-48页
第四章 磷脂酶的固定化研究第48-62页
   ·引言第48页
   ·实验仪器与材料第48-50页
   ·实验方法第50-54页
     ·固定化率的计算第50页
     ·固定化方法的选择第50-52页
       ·戊二醛交联法第50-51页
       ·吸附包埋法第51页
       ·吸附法第51-52页
     ·LX-1000NHF 载体的吸附固定化条件第52-53页
       ·加酶量第52页
       ·固定化时间第52页
       ·固定化温度第52-53页
     ·固定化磷脂酶非水相催化制备 GPC 的研究第53-54页
       ·Km 值的测定第53页
       ·最适加酶量的考察第53页
       ·最适温度的测定第53页
       ·最适水含量的考察第53页
       ·固定化酶前 2 批反应产物的转化率与产率计算第53-54页
   ·实验结果与分析第54-61页
     ·固定化方法的选择第54-56页
       ·戊二醛交联法第54页
       ·吸附包埋法第54页
       ·吸附法第54-56页
     ·LX-1000NHF 载体的吸附固定化条件第56-58页
       ·加酶量第56页
       ·固定化时间第56-57页
       ·固定化温度第57页
       ·固定化酶的电镜观察第57-58页
     ·固定化磷脂酶非水相催化制备 GPC 的研究第58-61页
       ·Km 值的测定第58页
       ·最适加酶量的考察第58-59页
       ·最适温度的测定第59页
       ·最适水含量的考察第59页
       ·固定化酶前 2 批反应产物的转化率与产率第59-61页
   ·本章小结第61-62页
第五章 结论与展望第62-64页
   ·结论第62-63页
   ·展望第63-64页
参考文献第64-69页
攻读硕士学位期间发表的论文第69-70页

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