| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 致谢 | 第9-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-23页 |
| ·卵磷脂(PC)及甘油磷酸胆碱(GPC) | 第15-17页 |
| ·卵磷脂(PC) | 第15页 |
| ·甘油磷酸胆碱(GPC) | 第15-17页 |
| ·磷脂酶 A1(PLA1) | 第17页 |
| ·非水相酶催化 | 第17-19页 |
| ·非水相酶催化介质体系 | 第17-18页 |
| ·非水相酶催化的优点及含水的作用 | 第18页 |
| ·促进酶在非水相催化活性的方法 | 第18-19页 |
| ·酶的处理 | 第18-19页 |
| ·酶反应体系的选择 | 第19页 |
| ·固定化方法 | 第19-21页 |
| ·吸附法 | 第20页 |
| ·包埋法 | 第20页 |
| ·交联法 | 第20-21页 |
| ·共价连接法 | 第21页 |
| ·本课题的研究内容、创新点及意义 | 第21-23页 |
| ·选题依据、意义及创新点 | 第21页 |
| ·研究内容及思路 | 第21-23页 |
| 第二章 反应体系的构建及磷脂酶催化制备 GPC 研究 | 第23-30页 |
| ·引言 | 第23页 |
| ·实验仪器及材料 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-25页 |
| ·反应体系的构建 | 第24页 |
| ·微乳体系的鉴定 | 第24页 |
| ·催化反应 | 第24页 |
| ·产物初步纯化——萃取工艺研究 | 第24-25页 |
| ·第一次萃取 | 第25页 |
| ·第二次萃取 | 第25页 |
| ·产物分析方法的建立 | 第25页 |
| ·GPC 粗品转化率的计算 | 第25页 |
| ·TLC 检测 | 第25页 |
| ·HPLC 检测 | 第25页 |
| ·实验结果与分析 | 第25-29页 |
| ·反应体系的构建 | 第25-26页 |
| ·微乳液的鉴定 | 第26页 |
| ·稳定性考察结果 | 第26页 |
| ·粒径测量 | 第26页 |
| ·萃取工艺 | 第26-27页 |
| ·第一次萃取 | 第27页 |
| ·第二次萃取 | 第27页 |
| ·产物的分析检测 | 第27-29页 |
| ·TLC 检测 | 第27-28页 |
| ·HPLC-ELSD 检测 | 第28-29页 |
| ·本章小结 | 第29-30页 |
| 第三章 酶法制备 GPC 的工艺优化及催化机理初探 | 第30-48页 |
| ·引言 | 第30页 |
| ·实验仪器及材料 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-36页 |
| ·催化工艺的优化 | 第31-34页 |
| ·酸碱滴定 | 第31页 |
| ·GPC 产率的计算 | 第31-32页 |
| ·反应时间的确定 | 第32页 |
| ·反应温度 | 第32页 |
| ·初始 pH | 第32页 |
| ·酶与缓冲液体积比 | 第32-33页 |
| ·Ca2+对产物产量的影响 | 第33页 |
| ·底物补加工艺的研究 | 第33-34页 |
| ·溶媒回收 | 第34-35页 |
| ·反应试剂的回收 | 第34-35页 |
| ·萃取试剂的回收 | 第35页 |
| ·优化后工艺放大制备 GPC 粗品 | 第35-36页 |
| ·催化机理研究——中间产物的生成与转化 | 第36页 |
| ·实验结果与分析 | 第36-47页 |
| ·催化工艺的优化 | 第36-43页 |
| ·反应时间的确定 | 第36-37页 |
| ·反应温度 | 第37页 |
| ·初始 pH | 第37-38页 |
| ·酶与缓冲液体积比 | 第38-39页 |
| ·Ca2+对产物产量的影响 | 第39页 |
| ·GPC 产率的计算 | 第39页 |
| ·初始底物浓度的确定 | 第39-40页 |
| ·补加底物浓度的确定 | 第40-41页 |
| ·补加底物质量的确定 | 第41-42页 |
| ·补加工艺反应时间的确定 | 第42-43页 |
| ·补加时间的确定 | 第43页 |
| ·补加的缓冲液量的确定 | 第43页 |
| ·溶媒的回收 | 第43-45页 |
| ·反应试剂的回收 | 第43-45页 |
| ·萃取试剂的回收 | 第45页 |
| ·优化后工艺放大制备 GPC 粗品 | 第45-46页 |
| ·HPLC 检测 GPC 粗品 | 第45页 |
| ·GPC 粗品的转化率、含量、产率 | 第45-46页 |
| ·催化机理初探——中间产物 LPC 的生成与转化 | 第46-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| 第四章 磷脂酶的固定化研究 | 第48-62页 |
| ·引言 | 第48页 |
| ·实验仪器与材料 | 第48-50页 |
| ·实验方法 | 第50-54页 |
| ·固定化率的计算 | 第50页 |
| ·固定化方法的选择 | 第50-52页 |
| ·戊二醛交联法 | 第50-51页 |
| ·吸附包埋法 | 第51页 |
| ·吸附法 | 第51-52页 |
| ·LX-1000NHF 载体的吸附固定化条件 | 第52-53页 |
| ·加酶量 | 第52页 |
| ·固定化时间 | 第52页 |
| ·固定化温度 | 第52-53页 |
| ·固定化磷脂酶非水相催化制备 GPC 的研究 | 第53-54页 |
| ·Km 值的测定 | 第53页 |
| ·最适加酶量的考察 | 第53页 |
| ·最适温度的测定 | 第53页 |
| ·最适水含量的考察 | 第53页 |
| ·固定化酶前 2 批反应产物的转化率与产率计算 | 第53-54页 |
| ·实验结果与分析 | 第54-61页 |
| ·固定化方法的选择 | 第54-56页 |
| ·戊二醛交联法 | 第54页 |
| ·吸附包埋法 | 第54页 |
| ·吸附法 | 第54-56页 |
| ·LX-1000NHF 载体的吸附固定化条件 | 第56-58页 |
| ·加酶量 | 第56页 |
| ·固定化时间 | 第56-57页 |
| ·固定化温度 | 第57页 |
| ·固定化酶的电镜观察 | 第57-58页 |
| ·固定化磷脂酶非水相催化制备 GPC 的研究 | 第58-61页 |
| ·Km 值的测定 | 第58页 |
| ·最适加酶量的考察 | 第58-59页 |
| ·最适温度的测定 | 第59页 |
| ·最适水含量的考察 | 第59页 |
| ·固定化酶前 2 批反应产物的转化率与产率 | 第59-61页 |
| ·本章小结 | 第61-62页 |
| 第五章 结论与展望 | 第62-64页 |
| ·结论 | 第62-63页 |
| ·展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第69-70页 |