| 摘要 | 第1-14页 |
| Abstract | 第14-17页 |
| 略缩词 | 第17-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-36页 |
| ·啤酒及啤酒工业的发展 | 第18-19页 |
| ·啤酒的历史 | 第18-19页 |
| ·啤酒的工业现状 | 第19页 |
| ·影响啤酒质量的因素及检测与鉴定方法的研究进展 | 第19-25页 |
| ·啤酒生产工艺 | 第19-20页 |
| ·啤酒质量指标 | 第20页 |
| ·啤酒腐败菌污染啤酒的原理 | 第20-21页 |
| ·检测与鉴定方法的研究进展 | 第21-25页 |
| ·常规的检测控制方法 | 第21-22页 |
| ·ATP生物发光检测方法 | 第22-24页 |
| ·免疫学的检测方法 | 第24-25页 |
| ·PCR技术概述 | 第25-28页 |
| ·PCR概述 | 第25页 |
| ·PCR基本原理 | 第25-26页 |
| ·PCR反应体系 | 第26-27页 |
| ·PCR循环参数 | 第27-28页 |
| ·PCR技术在啤酒工业中检测啤酒腐败菌概述 | 第28-35页 |
| ·使用一套特异引物的PCR技术 | 第28-29页 |
| ·RAPD-PCR(随机扩增多态DNA分析多聚酶链反应技术) | 第29-30页 |
| ·Nested-PCR(嵌套多聚酶链反应技术) | 第30页 |
| ·PCR技术在啤酒腐败菌鉴定中的发展动向 | 第30-35页 |
| ·PCR检测法的不足 | 第31-32页 |
| ·提高PCR检测灵敏度的方法 | 第32-35页 |
| ·本课题的目的和意义 | 第35-36页 |
| 第二章 啤酒中腐败菌的分离、纯化 | 第36-44页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·实验材料和设备 | 第36-37页 |
| ·实验材料 | 第36页 |
| ·培养基和试剂 | 第36-37页 |
| ·仪器和设备 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-39页 |
| ·过氧化氢酶反应实验 | 第37页 |
| ·氢氧化钾实验 | 第37-38页 |
| ·革兰氏染色 | 第38页 |
| ·明胶液化实验 | 第38页 |
| ·结合稀释涂布平板法和选择性培养基分离纯化细菌 | 第38-39页 |
| ·确定合理的稀释度 | 第38页 |
| ·用选择性培养基进行分离 | 第38-39页 |
| ·用改良MRS培养基纯化上述单特征单菌落 | 第39页 |
| ·API50CHL菌种鉴定 | 第39页 |
| ·API50CHL试剂盒原理 | 第39页 |
| ·实验步骤 | 第39页 |
| ·结果与讨论 | 第39-43页 |
| ·结果 | 第39-42页 |
| ·菌落形态 | 第39-40页 |
| ·生理生化实验结果 | 第40页 |
| ·API50CHL培养基及试剂条的鉴定 | 第40-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·结论 | 第43-44页 |
| 第三章 啤酒腐败菌预增菌的研究 | 第44-52页 |
| ·引言 | 第44页 |
| ·实验材料和设备 | 第44-45页 |
| ·实验材料 | 第44页 |
| ·培养基和试剂 | 第44-45页 |
| ·仪器和设备 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-46页 |
| ·菌株在不同培养基下的生长状况 | 第45页 |
| ·菌株在不同温度下的生长状况 | 第45页 |
| ·菌株在不同PH值下的生长状况 | 第45页 |
| ·预增菌PCR扩增灵敏度的检测 | 第45-46页 |
| ·啤酒有害菌的快速鉴定 | 第46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-50页 |
| ·结果 | 第46-50页 |
| ·短乳杆菌在不同培养基下的生长状况 | 第46-47页 |
| ·短乳杆菌在不同温度下的生长状况 | 第47页 |
| ·短乳杆菌在不同PH值下的生长状况 | 第47-48页 |
| ·预增菌PCR扩增灵敏度的检测 | 第48-49页 |
| ·啤酒腐败菌的快速检测 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50页 |
| ·结论 | 第50-52页 |
| 第四章 PCR法检测啤酒腐败菌模板制备方法研究 | 第52-59页 |
| ·引言 | 第52页 |
| ·实验材料和设备 | 第52-53页 |
| ·实验材料与主要试剂 | 第52页 |
| ·实验设备 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-54页 |
| ·模板制备方法 | 第53-54页 |
| ·CTAB法 | 第53页 |
| ·酶裂解煮沸法 | 第53-54页 |
| ·直接电泳及PCR扩增比较 | 第54页 |
| ·结果与讨论 | 第54-58页 |
| ·结果 | 第54-57页 |
| ·CTAB法 | 第54页 |
| ·酶裂解煮沸法 | 第54-56页 |
| ·直接电泳及PCR扩增比较 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| ·结论 | 第58-59页 |
| 第五章 PCR法检测啤酒腐败菌条件的优化 | 第59-70页 |
| ·引言 | 第59页 |
| ·实验材料与设备 | 第59-60页 |
| ·实验材料与主要试剂 | 第59-60页 |
| ·仪器和设备 | 第60页 |
| ·实验方法 | 第60-63页 |
| ·模板制备 | 第60页 |
| ·引物设计 | 第60页 |
| ·PCR体系优化(25μl) | 第60-63页 |
| ·预试验 | 第60-62页 |
| ·Taq酶浓度优化 | 第62页 |
| ·Mg~(2+)浓度优化 | 第62页 |
| ·退火温度优化 | 第62页 |
| ·循环时间优化 | 第62-63页 |
| ·循环次数优化 | 第63页 |
| ·优化后的检测 | 第63页 |
| ·优化后标准菌与啤酒厂分离纯化后得到的腐败菌的PCR比较 | 第63页 |
| ·结果与讨论 | 第63-69页 |
| ·结果 | 第63-69页 |
| ·Taq酶浓度优化 | 第63-64页 |
| ·Mg~(2+)浓度优化 | 第64-65页 |
| ·退火温度优化 | 第65-66页 |
| ·循环时间优化 | 第66-67页 |
| ·循环次数优化 | 第67页 |
| ·优化后的检测结果 | 第67-68页 |
| ·优化后标准菌与啤酒厂分离纯化后得到的腐败菌的PCR比较 | 第68-69页 |
| ·讨论 | 第69页 |
| ·结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第77页 |
