| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第13-36页 |
| 1.1 γ-谷氨酰肽的概述 | 第13页 |
| 1.2 γ-谷氨酰肽的研究现状 | 第13-18页 |
| 1.2.1 常见的γ-谷氨酰肽 | 第13-15页 |
| 1.2.2 γ-谷氨酰肽的分析检测 | 第15页 |
| 1.2.3 γ-谷氨酰肽的制备 | 第15-17页 |
| 1.2.4 γ-谷氨酰肽的呈味特性 | 第17-18页 |
| 1.3 厚味与γ-谷氨酰肽 | 第18-19页 |
| 1.3.1 厚味的呈味机理 | 第18页 |
| 1.3.2 γ-谷氨酰肽对厚味受体——钙离子敏感受体的变构调节作用 | 第18-19页 |
| 1.4 γ-谷氨酰肽的生理功能 | 第19-22页 |
| 1.4.1 γ-谷氨酰肽与胆囊收缩素的分泌 | 第21-22页 |
| 1.4.2 γ-谷氨酰肽与二肽基酶-IV抑制剂 | 第22页 |
| 1.5 本课题研究的立体依据和研究内容 | 第22-24页 |
| 1.5.1 立体依据 | 第22-23页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第23-24页 |
| 参考文献 | 第24-36页 |
| 第二章 谷氨酰胺酶的γ-谷氨酰转肽作用 | 第36-50页 |
| 2.1 引言 | 第36-37页 |
| 2.2 实验材料与设备 | 第37页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第37页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第37页 |
| 2.3 试验方法 | 第37-39页 |
| 2.3.1 谷氨酰胺酶的γ-谷氨酰转肽酶酶活测定 | 第37-38页 |
| 2.3.2 pH值和温度对谷氨酰胺酶的γ-谷氨酰转肽酶酶活的影响 | 第38页 |
| 2.3.3 氯化钠和铵根离子浓度对谷氨酰胺酶的γ-谷氨酰转肽酶酶活的影响 | 第38页 |
| 2.3.4 金属离子和酶抑制剂对谷氨酰胺酶的γ-谷氨酰转肽酶酶活的影响 | 第38页 |
| 2.3.5 谷氨酰胺酶催化γ-谷氨酰转肽反应的底物选择性 | 第38-39页 |
| 2.3.6 谷氨酰胺酶催化γ-谷氨酰转肽反应的底物亲和力 | 第39页 |
| 2.3.7 谷氨酰胺代替γ-GpNA作为γ-谷氨酰供体 | 第39页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第39-46页 |
| 2.4.1 不同微生物源谷氨酰胺酶的γ-谷氨酰转肽酶活性 | 第39-40页 |
| 2.4.2 解淀粉芽孢杆菌源谷氨酰胺酶的γ-谷氨酰转肽酶酶学特性研究 | 第40-44页 |
| 2.4.3 解淀粉芽孢杆菌源谷氨酰胺酶催化γ-谷氨酰转肽反应的底物选择性 | 第44-45页 |
| 2.4.4 解淀粉芽孢杆菌源谷氨酰胺酶催化γ-谷氨酰转肽反应的底物亲和力 | 第45-46页 |
| 2.4.5 谷氨酰胺代替γ-GpNA作为γ-谷氨酰供体 | 第46页 |
| 2.5 本章小结 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-50页 |
| 第三章 谷氨酰胺酶催化合成γ-谷氨酰肽 | 第50-74页 |
| 3.1 引言 | 第50页 |
| 3.2 实验材料与设备 | 第50-51页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第50-51页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第51页 |
| 3.3 试验方法 | 第51-53页 |
| 3.3.1 解淀粉芽孢杆菌源谷氨酰胺酶酶法合成γ-谷氨酰肽 | 第51页 |
| 3.3.2 酶促反应液中氨基酸含量的测定 | 第51-52页 |
| 3.3.3 HPLC法对γ-谷氨酰肽进行定性定量检测 | 第52页 |
| 3.3.4 利用核磁共振仪对γ-谷氨酰肽进行结构鉴定 | 第52页 |
| 3.3.5 UPLC-MS/MS法对γ-谷氨酰肽进行定性定量检测 | 第52-53页 |
| 3.3.6 谷氨酰胺酶催化反应动力学研究 | 第53页 |
| 3.3.7 D-谷氨酰胺代替L-谷氨酰胺合成γ-D-谷氨酰肽 | 第53页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第53-69页 |
| 3.4.1 氨基酸分析 | 第53-54页 |
| 3.4.2 HPLC-NMR联用法对酶促反应产物进行分析 | 第54-58页 |
| 3.4.3 UPLC-MS/MS法对各个酶促反应液进行分析 | 第58-63页 |
| 3.4.4 谷氨酰胺酶的催化动力学研究 | 第63-67页 |
| 3.4.5 D-谷氨酰胺代替L-谷氨酰胺合成γ-D-谷氨酰肽 | 第67-69页 |
| 3.5 本章小结 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 第四章 γ-谷氨酰肽呈味特性的研究 | 第74-95页 |
| 4.1 引言 | 第74-75页 |
| 4.2 实验材料与设备 | 第75页 |
| 4.2.1 主要试剂 | 第75页 |
| 4.2.2 主要仪器 | 第75页 |
| 4.3 试验方法 | 第75-78页 |
| 4.3.1 γ-谷氨酰肽的基本呈味特性 | 第75-76页 |
| 4.3.2 γ-谷氨酰肽增强基本呈味物质的呈味强度 | 第76页 |
| 4.3.3 γ-谷氨酰肽改善和增强常见食品的呈味效果 | 第76-77页 |
| 4.3.4 γ-谷氨酰肽的呈味阈值浓度 | 第77页 |
| 4.3.5 优化酶促反应条件 | 第77页 |
| 4.3.6 各个酶促反应液对食品风味的改善作用 | 第77-78页 |
| 4.3.7 电子舌评价γ-谷氨酰肽对食品鲜味的增强效果 | 第78页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第78-92页 |
| 4.4.1 γ-谷氨酰肽的呈味特性 | 第78-83页 |
| 4.4.2 γ-谷氨酰肽的作用阈值浓度 | 第83-84页 |
| 4.4.3 酶促合成具有厚味风味的γ-谷氨酰肽 | 第84-88页 |
| 4.4.4 各个酶促反应液对食品风味的增强作用 | 第88-90页 |
| 4.4.5 电子舌评价γ-谷氨酰肽对鸡汤鲜味的增加作用 | 第90-92页 |
| 4.5 本章小结 | 第92页 |
| 参考文献 | 第92-95页 |
| 第五章 γ-谷氨酰肽促进胆囊收缩素的释放 | 第95-111页 |
| 5.1 引言 | 第95页 |
| 5.2 实验材料与设备 | 第95-97页 |
| 5.2.1 主要试剂 | 第95-96页 |
| 5.2.2 主要仪器 | 第96-97页 |
| 5.3 试验方法 | 第97-99页 |
| 5.3.1 STC-1细胞培养和MTT试验 | 第97页 |
| 5.3.2 γ-谷氨酰肽促进胆囊收缩素(CCK)的分泌 | 第97-98页 |
| 5.3.3 激光扫描共聚焦显微镜测定细胞内钙离子浓度 | 第98页 |
| 5.3.4 CaSR的蛋白印迹分析——WesternBlot | 第98-99页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第99-107页 |
| 5.4.1 γ-谷氨酰肽对STC-1细胞活力的影响 | 第99-100页 |
| 5.4.2 γ-谷氨酰肽诱导CCK分泌 | 第100-103页 |
| 5.4.3 外源性钙离子([Ca2+]e)参与γ-谷氨酰肽对CCK的促分泌过程 | 第103-104页 |
| 5.4.4 γ-[Glu](0≦n≦5)-Trp/Phe诱导细胞内钙离子([Ca2+]i)的释放 | 第104-106页 |
| 5.4.5 Westernblot分析CaSR的表达 | 第106页 |
| 5.4.6 γ-谷氨酰肽对CCK促释放作用的信使通路研究 | 第106-107页 |
| 5.5 本章小结 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-111页 |
| 第六章 γ-谷氨酰二肽抑制DPP-IV酶活性的研究 | 第111-126页 |
| 6.1 引言 | 第111-112页 |
| 6.2 实验材料与设备 | 第112页 |
| 6.2.1 主要试剂 | 第112页 |
| 6.2.2 主要仪器 | 第112页 |
| 6.3 试验方法 | 第112-114页 |
| 6.3.1 AutodockVina分子模拟软件预测γ-谷氨酰二肽对DPP-IV的抑制效果 | 第112-113页 |
| 6.3.2 DPP-IV抑制实验 | 第113页 |
| 6.3.3 γ-谷氨酰二肽对DDP-IV抑制类型的确定 | 第113-114页 |
| 6.3.4 LIGPLOT软件分析γ-谷氨酰二肽与DDP-IV间结合的共价键类型 | 第114页 |
| 6.3.5 优化酶促反应条件 | 第114页 |
| 6.4 结果与讨论 | 第114-121页 |
| 6.4.1 通过分子对接预测γ-谷氨酰肽对DPP-IV酶的抑制效果 | 第114-116页 |
| 6.4.2 γ-谷氨酰肽对DPP-IV酶的抑制效果 | 第116-118页 |
| 6.4.3 γ-Glu-Met与DPP-IV酶相互结合的共价键分析 | 第118-119页 |
| 6.4.4 酶促反应液对DPP-IV酶的抑制效果 | 第119-120页 |
| 6.4.5 以提高γ-谷氨酰二肽为目标对酶促反应进行优化 | 第120-121页 |
| 6.5 本章小结 | 第121-122页 |
| 参考文献 | 第122-126页 |
| 结论与展望 | 第126-129页 |
| 一、结论 | 第126-128页 |
| 二、创新点 | 第128页 |
| 三、展望 | 第128-129页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第129-131页 |
| 致谢 | 第131-133页 |
| 附件 | 第133页 |
