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基于肽—膜相互作用的模拟细胞膜法筛选抗菌肽的研究

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
缩略符号对照表第8-14页
第一章 绪论第14-43页
    1.1 抗菌肽的研究概状第14-24页
        1.1.1 抗菌肽的分类第14-15页
        1.1.2 抗菌肽的理化特性及生理活性第15-16页
        1.1.3 抗菌肽的应用前景第16页
        1.1.4 抗菌肽的制备方法第16-18页
        1.1.5 抗菌肽的作用机制第18-24页
    1.2 模拟细胞膜及其在抗菌肽研究中的应用第24-25页
        1.2.1 模拟细胞膜第24页
        1.2.2 模拟细胞膜在抗菌肽相关研究中的应用第24-25页
    1.3 模拟细胞膜色谱法及其应用第25-27页
        1.3.1 模拟细胞膜色谱法第25-26页
        1.3.2 模拟细胞膜色谱法在蛋白分离纯化中的应用第26页
        1.3.3 模拟细胞膜色谱法在蛋白或多肽与膜相互作用研究中的应用第26页
        1.3.4 模拟细胞膜色谱法在药物的膜分配系数测定中的应用第26页
        1.3.5 模拟细胞膜色谱法在药物筛选中的应用第26-27页
    1.4 研究目的及主要研究内容第27-29页
    参考文献第29-43页
第二章 磷脂模拟细胞膜固相萃取联用HPLC筛选抗菌肽方法的建立及应用第43-57页
    2.1 前言第43-44页
    2.2 材料与设备第44页
        2.2.1 材料与试剂第44页
        2.2.2 仪器设备第44页
    2.3 实验方法第44-47页
        2.3.1 磷脂模拟细胞膜固定相的制备第44-45页
        2.3.2 磷脂模拟细胞膜吸附等温线的测定第45页
        2.3.3 磷脂模拟细胞膜固定相的荧光泄露法表征第45页
        2.3.4 卵白蛋白水解产物的制备第45页
        2.3.5 卵白蛋白水解产物抑菌率的测定第45-46页
        2.3.6 磷脂模拟细胞膜固相萃取联用HPLC筛选卵白蛋白抗菌肽第46页
        2.3.7 卵白蛋白抗菌肽序列鉴定第46页
        2.3.8 卵白蛋白抗菌肽的化学合成第46-47页
        2.3.9 卵白蛋白抗菌肽最小抑菌浓度的测定第47页
        2.3.10 卵白蛋白抗菌肽对细菌生长曲线的影响第47页
    2.4 结果与讨论第47-54页
        2.4.1 磷脂模拟细胞膜吸附等温线的测定第47-48页
        2.4.2 磷脂模拟细胞膜固定相的荧光泄露法表征第48-49页
        2.4.3 卵白蛋白水解产物的抗菌活性分析第49-50页
        2.4.4 磷脂模拟细胞膜固相萃取联用HPLC筛选卵白蛋白抗菌肽第50-51页
        2.4.5 卵白蛋白抗菌肽序列鉴定第51-52页
        2.4.6 Opep12的最小抑菌浓度第52-53页
        2.4.7 Opep12对细菌生长曲线的影响第53-54页
    2.5 本章小结第54-55页
    参考文献第55-57页
第三章 大肠杆菌模拟细胞膜色谱筛选抗菌肽方法的建立及应用第57-75页
    3.1 前言第57-58页
    3.2 材料与设备第58页
        3.2.1 材料与试剂第58页
        3.2.2 仪器设备第58页
    3.3 实验方法第58-61页
        3.3.1 大肠杆菌脂质的提取第58页
        3.3.2 大肠杆菌模拟细胞膜固定相的制备第58-59页
        3.3.3 大肠杆菌模拟细胞膜吸附等温线的测定第59页
        3.3.4 大肠杆菌模拟细胞膜固定相的荧光泄露法表征第59页
        3.3.5 大肠杆菌模拟细胞膜色谱柱的制备及色谱条件第59页
        3.3.6 大肠杆菌模拟细胞膜色谱柱固定相的稳定性研究第59页
        3.3.7 大肠杆菌模拟细胞膜色谱条件对抗菌肽保留的影响第59-60页
        3.3.8 大肠杆菌模拟细胞膜色谱的分离重复性第60页
        3.3.9 鳀鱼粗肽提取液的制备第60页
        3.3.10 鳀鱼粗肽抑菌率的测定第60-61页
        3.3.11 大肠杆菌模拟细胞膜色谱分离鳀鱼抗菌肽第61页
        3.3.12 鳀鱼抗菌肽序列鉴定第61页
        3.3.13 鳀鱼抗菌肽的化学合成第61页
        3.3.14 鳀鱼抗菌肽最小抑菌浓度的测定第61页
        3.3.15 鳀鱼抗菌肽对细菌生长曲线的影响第61页
    3.4 结果与讨论第61-71页
        3.4.1 大肠杆菌模拟细胞膜吸附等温线的测定第61-62页
        3.4.2 大肠杆菌模拟细胞膜固定相的荧光泄露法表征第62-63页
        3.4.3 大肠杆菌模拟细胞膜色谱柱固定相的稳定性第63-65页
        3.4.4 大肠杆菌模拟细胞膜色谱条件对抗菌肽保留的影响第65-66页
        3.4.5 大肠杆菌模拟细胞膜色谱的分离重复性第66-67页
        3.4.6 大肠杆菌模拟细胞膜色谱法筛选鳀鱼抗菌肽第67-69页
        3.4.7 鳀鱼抗菌肽序列鉴定第69-70页
        3.4.8 Apep10的最小抑菌浓度第70页
        3.4.9 Apep10对细菌生长曲线的影响第70-71页
    3.5 本章小结第71-72页
    参考文献第72-75页
第四章 金黄色葡萄球菌模拟细胞膜平衡透析筛选抗菌肽方法的建立及应用第75-87页
    4.1 前言第75-76页
    4.2 材料与设备第76页
        4.2.1 材料与试剂第76页
        4.2.2 仪器设备第76页
    4.3 实验方法第76-78页
        4.3.1 金黄色葡萄球菌脂质的提取第76页
        4.3.2 金黄色葡萄球菌模拟细胞膜的制备第76页
        4.3.3 ACWPH的制备第76-77页
        4.3.4 ACWPH抗菌活性的测定第77页
        4.3.5 ACWPH分子量分布的测定第77页
        4.3.6 金黄色葡萄球菌模拟细胞膜平衡透析筛选ACWPH抗菌肽第77页
        4.3.7 平衡透析液的RP-HPLC分析第77-78页
        4.3.8 ACWPH抗菌肽序列鉴定第78页
        4.3.9 ACWPH抗菌肽的化学合成第78页
        4.3.10 ACWPH抗菌肽最小抑菌浓度的测定第78页
        4.3.11 ACWPH抗菌肽对细菌生长曲线的影响第78页
    4.4 结果与讨论第78-84页
        4.4.1 ACWPH的抗菌活性分析第78页
        4.4.2 ACWPH的分子量分布第78-79页
        4.4.3 金黄色葡萄球菌模拟细胞膜平衡透析筛选ACWPH抗菌肽第79-81页
        4.4.4 ACWPH抗菌肽序列鉴定第81-82页
        4.4.5 ACWpep10的最小抑菌浓度第82-83页
        4.4.6 ACWpep10对细菌生长曲线的影响第83-84页
    4.5 本章小结第84页
    参考文献第84-87页
第五章 Opep12、Apep10和ACWpep10对菌体膜的作用活性研究第87-103页
    5.1 前言第87页
    5.2 材料与设备第87-88页
        5.2.1 材料与试剂第87页
        5.2.2 仪器设备第87-88页
    5.3 实验方法第88-90页
        5.3.1 Opep12、Apep10和ACWpep10的化学合成第88页
        5.3.2 Opep12、Apep10和ACWpep10的理化特性分析第88页
        5.3.3 Opep12、Apep10和ACWpep10对细菌细胞膜疏水区暴露的影响第88页
        5.3.4 Opep12、Apep10和ACWpep10对细菌细胞膜透性的影响第88-89页
        5.3.5 Opep12、Apep10和ACWpep10对细菌细胞膜完整性的影响第89页
        5.3.6 Opep12、Apep10和ACWpep10对细菌表观形貌的影响第89页
        5.3.7 Opep12、Apep10和ACWpep10的溶血活性的测定第89-90页
    5.4 结果与讨论第90-99页
        5.4.1 Opep12、Apep10和ACWpep10的理化特性分析第90-91页
        5.4.2 Opep12、Apep10和ACWpep10对细菌细胞膜疏水区暴露的影响第91-92页
        5.4.3 Opep12、Apep10和ACWpep10对细菌细胞膜透性的影响第92-93页
        5.4.4 Opep12、Apep10和ACWpep10对细菌细胞膜完整性的影响第93-97页
        5.4.5 Opep12、Apep10和ACWpep10对细菌表面形貌的影响第97-99页
        5.4.6 Opep12、Apep10和ACWpep10的溶血活性第99页
    5.5 本章小结第99-100页
    参考文献第100-103页
第六章 三种方法中模拟细胞膜-抗菌肽相互作用的分析与比较第103-125页
    6.1 前言第103页
    6.2 材料与设备第103-104页
        6.2.1 材料与试剂第103-104页
        6.2.2 仪器设备第104页
    6.3 实验方法第104-106页
        6.3.1 三种方法中模拟细胞膜-抗菌肽相互作用及与抗菌活性的相关性分析第104页
        6.3.2 三种筛选方法对ACWPH中抗菌肽分离效果的比较第104-105页
        6.3.3 模拟细胞膜-ACWpep10相互作用的共聚焦显微拉曼光谱分析第105页
        6.3.4 模拟细胞膜-ACWpep10结合常数的测定第105-106页
        6.3.5 模拟细胞膜脂质成分分析第106页
    6.4 结果与讨论第106-120页
        6.4.1 三种方法中模拟细胞膜-抗菌肽相互作用及与抗菌活性的相关性分析第106-108页
        6.4.2 三种筛选方法对ACWPH中抗菌肽分离效果的比较第108-111页
        6.4.3 模拟细胞膜-ACWpep10相互作用的共聚焦显微拉曼光谱分析第111-114页
        6.4.4 模拟细胞膜-ACWpep10结合常数的测定第114-117页
        6.4.5 模拟细胞膜脂质成分分析第117-120页
    6.5 本章小结第120页
    参考文献第120-125页
主要结论与展望第125-127页
    主要结论第125-126页
    展望第126-127页
论文创新点第127-128页
致谢第128-129页
附录:作者在攻读博士学位期间发表的论文第129页

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