| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-21页 |
| ·大肠杆菌O157 及粘附作用 | 第8-9页 |
| ·大肠杆菌O157 简介 | 第8页 |
| ·大肠杆菌O157 与粘附作用 | 第8-9页 |
| ·大肠杆菌O157 粘附因子 | 第9-20页 |
| ·紧密素 | 第9-11页 |
| ·LEE编码蛋白和非LEE编码蛋白 | 第11-14页 |
| ·菌毛 | 第14-17页 |
| ·鞭毛 | 第17-18页 |
| ·脂多糖和外膜蛋白A | 第18页 |
| ·粘附因子总结 | 第18-20页 |
| ·课题研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 大肠杆菌O157 ycbR基因的克隆及分析 | 第21-32页 |
| ·实验材料 | 第21-23页 |
| ·载体与菌株 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·大肠杆菌O157 DNA提取试剂 | 第21页 |
| ·质粒提取所用试剂 | 第21-22页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳所用试剂 | 第22页 |
| ·琼脂糖凝胶的配制 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·主要器材 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-26页 |
| ·大肠杆菌YCBR蛋白表达引物的设计 | 第23页 |
| ·大肠杆菌O157 DNA的制备 | 第23页 |
| ·ycbR基因PCR扩增的反应体系及反应程序 | 第23-24页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第24页 |
| ·目的基因与T载体的连接 | 第24页 |
| ·感受态细胞E.coli DH5α的制备 | 第24-25页 |
| ·连接产物的转化 | 第25页 |
| ·T-ycbR重组质粒的鉴定 | 第25-26页 |
| ·ycbR的生物信息学分析 | 第26页 |
| ·结果与分析 | 第26-30页 |
| ·大肠杆菌O157 基因ycbR的PCR扩增 | 第26-27页 |
| ·T-ycbR重组质粒的鉴定 | 第27页 |
| ·T-ycbR测序鉴定 | 第27页 |
| ·ycbR的生物信息学分析 | 第27-30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| ·小结 | 第31-32页 |
| 第三章 大肠杆菌O157 YCBR的原核表达与纯化 | 第32-45页 |
| ·实验材料 | 第32-35页 |
| ·载体与菌株 | 第32-33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·诱导表达试剂 | 第33页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）所用试剂 | 第33-34页 |
| ·蛋白纯化试剂 | 第34-35页 |
| ·主要器材 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-39页 |
| ·质粒的制备 | 第35页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第35页 |
| ·原核重组表达载体的构建 | 第35-36页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第36页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第36-37页 |
| ·重组蛋白的Ni-NTA树脂纯化 | 第37-38页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-42页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第39-40页 |
| ·重组蛋白的诱导表达与纯化 | 第40-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| ·成功构建ycbR的表达载体 | 第42-43页 |
| ·重组蛋白的诱导表达、纯化及其稳定性 | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第四章 大肠杆菌O157 YCBR的血清制备 | 第45-53页 |
| ·实验材料 | 第45-46页 |
| ·YCBR蛋白及实验动物 | 第45页 |
| ·试剂的配制 | 第45-46页 |
| ·抗原 | 第46页 |
| ·抗体 | 第46页 |
| ·主要器材 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-49页 |
| ·制备多克隆抗体 | 第46-48页 |
| ·ELISA方法测定抗体效价 | 第48-49页 |
| ·结果与分析 | 第49-50页 |
| ·间接ELISA确定抗血清抗体效价的测定结果 | 第49-50页 |
| ·间接ELISA确定抗血清敏感性的测定结果 | 第50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| ·包涵体形式的蛋白的免疫 | 第50-51页 |
| ·关于ELISA缓冲液中保护性阻剂的加入 | 第51页 |
| ·关于ELISA中酶结合物的选择 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 第五章 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第61-62页 |
| 附录一：主要化学试剂 | 第62-63页 |
| 附录二：主要器材 | 第63-64页 |
| 附录三：缩略词 | 第64-65页 |
| 附录四：ycbR的GenBank序列 | 第65-67页 |
| 附录五：ycbR原核表达载体构建示意图 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
