| 前言 | 第1-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-19页 |
| ·国内外乙醇研究现状 | 第9-10页 |
| ·本课题研究背景 | 第10-18页 |
| ·乙醇及甘油的代谢 | 第10-14页 |
| ·FpS1p 调节甘油由胞内向胞外的渗透 | 第14-16页 |
| ·过量表达GLT1 和GLN1 提高乙醇的产量 | 第16-18页 |
| ·本文的研究思路 | 第18-19页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第19-37页 |
| ·实验材料 | 第19-26页 |
| ·菌株与质粒 | 第19-22页 |
| ·主要实验仪器 | 第22页 |
| ·药品与试剂 | 第22-24页 |
| ·药品 | 第22-23页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·培养基 | 第24-26页 |
| ·实验方法 | 第26-31页 |
| ·酵母产孢及四分体孢子的拆分 | 第26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第26-27页 |
| ·质粒的提取 | 第27页 |
| ·酵母染色体的快速分离 | 第27-28页 |
| ·酵母细胞的转化 | 第28页 |
| ·PCR 扩增 | 第28-29页 |
| ·DNA 的酶切 | 第29-30页 |
| ·凝胶电泳法检测 DNA | 第30页 |
| ·DNA 片段的回收纯化 | 第30页 |
| ·DNA 连接反应 | 第30-31页 |
| ·一步基因置换法缺失目的基因 | 第31-32页 |
| ·两步基因置换法修饰目的基因 | 第32-33页 |
| ·酵母等位基因的分离及遗传分析 | 第33-35页 |
| ·验证酵母的交配型 | 第35页 |
| ·不同交配型酵母细胞之间的交配 | 第35页 |
| ·URA3 标记基因的重复利用 | 第35-36页 |
| ·发酵样品的测定方法 | 第36-37页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第37-62页 |
| ·基因FPS1 的缺失 | 第37-38页 |
| ·基因GPD1 和GPD2 的缺失 | 第38-40页 |
| ·基因GLT1 和GLN1 的过量表达 | 第40-49页 |
| ·整合型质粒YIplac133 的构建 | 第41-42页 |
| ·用于过量表达GLN1 基因的质粒构建 | 第42-45页 |
| ·用于过量表达GLT1 基因的质粒构建 | 第45-48页 |
| ·利用两步基因置换法过量表达GLN1 和 GLT1 | 第48-49页 |
| ·酵母等位基因的分离及遗传分析 | 第49-51页 |
| ·可重复利用URA3标记基因的质粒pUC18-RYUR的构建 | 第51-53页 |
| ·发酵试验结果 | 第53-62页 |
| ·发酵条件 | 第53页 |
| ·发酵数据 | 第53-62页 |
| ·第一组发酵数据 | 第53-56页 |
| ·第二组发酵 | 第56-58页 |
| ·第三组发酵 | 第58-62页 |
| 第四章 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |