| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 中英文缩略词表 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-24页 |
| 1.1 引言 | 第15页 |
| 1.2 酒精性肝损伤的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.3 河蚬及河蚬多糖概述 | 第17-19页 |
| 1.3.1 河蚬 | 第17页 |
| 1.3.2 河蚬多糖 | 第17-19页 |
| 1.3.2.1 河蚬多糖的分离提取 | 第17页 |
| 1.3.2.2 河蚬多糖的理化性质 | 第17-18页 |
| 1.3.2.3 河蚬多糖的生理活性 | 第18-19页 |
| 1.4 三相分离的研究进展 | 第19-22页 |
| 1.5 本课题研究的立项依据和主要研究内容 | 第22-24页 |
| 1.5.1 立项依据 | 第22页 |
| 1.5.2 主要研究内容 | 第22-24页 |
| 第二章 酶预处理辅助三相分离提取河蚬多糖的研究 | 第24-38页 |
| 2.1 前言 | 第24页 |
| 2.2 试验材料与仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.2.1 试验原料 | 第24页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第24页 |
| 2.2.3 主要仪器及设备 | 第24-25页 |
| 2.3 试验方法 | 第25-29页 |
| 2.3.1 基本化学组成分析 | 第25页 |
| 2.3.2 河蚬酶解液的制备 | 第25页 |
| 2.3.3 三相分离法制备河蚬多糖的工艺流程 | 第25-26页 |
| 2.3.4 三相分离技术提取河蚬多糖单因素试验 | 第26-27页 |
| 2.3.4.1 硫酸铵质量分数对多糖提取率的影响 | 第26页 |
| 2.3.4.2 .叔丁醇与酶解液比例对多糖提取率的影响 | 第26-27页 |
| 2.3.4.3 时间对多糖提取率的影响 | 第27页 |
| 2.3.4.4 温度对多糖提取率的影响 | 第27页 |
| 2.3.5 多糖含量的测定 | 第27页 |
| 2.3.6 蛋白质含量的测定 | 第27-28页 |
| 2.3.7 河蚬多糖提取率和可溶性蛋白质含量的计算公式 | 第28页 |
| 2.3.8 响应面优化试验 | 第28-29页 |
| 2.3.9 统计分析 | 第29页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第29-37页 |
| 2.4.1 基本化学组成分析 | 第29页 |
| 2.4.2 三相分离提取河蚬多糖的单因素分析 | 第29-32页 |
| 2.4.2.1 硫酸铵质量分数对多糖提取率的影响 | 第29-30页 |
| 2.4.2.2 .叔丁醇与酶解液体积比对多糖提取率的影响 | 第30-31页 |
| 2.4.2.3 时间对多糖提取率的影响 | 第31-32页 |
| 2.4.2.4 温度对多糖提取率的影响 | 第32页 |
| 2.4.3 响应面优化三相分离提取河蚬多糖 | 第32-37页 |
| 2.4.3.1 响应面模型的预测与试验结果分析 | 第32-35页 |
| 2.4.3.2 三维响应面图和二维等高线图的分析 | 第35-36页 |
| 2.4.3.3 预测模型的验证及最优条件的确定 | 第36-37页 |
| 2.5 本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 河蚬多糖的理化性质和体外抗氧化活性研究 | 第38-50页 |
| 3.1 前言 | 第38页 |
| 3.2 试验材料与仪器设备 | 第38-39页 |
| 3.2.1 试验原料 | 第38页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第38页 |
| 3.2.3 主要仪器及设备 | 第38-39页 |
| 3.3 试验方法 | 第39-42页 |
| 3.3.1 传统酶法提取河蚬多糖 | 第39页 |
| 3.3.2 多糖的提取率和基本化学组成 | 第39页 |
| 3.3.3 单糖组成分析 | 第39-40页 |
| 3.3.4 氨基酸组成分析 | 第40页 |
| 3.3.5 β-消除反应 | 第40页 |
| 3.3.6 分子量测定 | 第40页 |
| 3.3.7 红外光谱分析 | 第40页 |
| 3.3.8 河蚬多糖的体外抗氧化活性 | 第40-42页 |
| 3.3.8.1 清除羟基自由基活性的测定 | 第40页 |
| 3.3.8.2 清除DPPH自由基活性的测定 | 第40页 |
| 3.3.8.3 三价铁离子还原能力(FRAP)测定 | 第40-41页 |
| 3.3.8.4 Trolox等价抗氧化能力(TEAC)的测定 | 第41-42页 |
| 3.3.9 统计分析 | 第42页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第42-49页 |
| 3.4.1 河蚬多糖的理化性质和基本化学结构特征 | 第42-47页 |
| 3.4.1.1 多糖提取率和基本化学组成分析 | 第42-43页 |
| 3.4.1.2 单糖组成分析 | 第43-44页 |
| 3.4.1.3 氨基酸组成分析 | 第44-45页 |
| 3.4.1.4 β-消除反应 | 第45-46页 |
| 3.4.1.5 分子量及其分子量分布分析 | 第46页 |
| 3.4.1.6 红外光谱分析 | 第46-47页 |
| 3.4.2 河蚬多糖的体外抗氧化活性 | 第47-49页 |
| 3.4.2.1 清除DPPH自由基活性的测定 | 第47-48页 |
| 3.4.2.2 清除羟基自由基活性的测定 | 第48页 |
| 3.4.2.3 三价铁离子还原能力和Trolox等价抗氧化能力的测定 | 第48-49页 |
| 3.5 本章小结 | 第49-50页 |
| 第四章 河蚬多糖对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用 | 第50-66页 |
| 4.1 前言 | 第50页 |
| 4.2 试验材料与仪器设备 | 第50-51页 |
| 4.2.1 试验原料 | 第50页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第50页 |
| 4.2.3 主要仪器及设备 | 第50-51页 |
| 4.2.4 试验动物 | 第51页 |
| 4.3 试验方法 | 第51-53页 |
| 4.3.1 动物饲养与试验设计 | 第51页 |
| 4.3.2 一般状态观察 | 第51页 |
| 4.3.3 样品的采集与制备 | 第51-52页 |
| 4.3.4 脏器指数的测定 | 第52页 |
| 4.3.5 生化指标的测定 | 第52页 |
| 4.3.6 小鼠肝脏中细胞因子标准曲线的测定 | 第52-53页 |
| 4.3.7 统计分析 | 第53页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第53-65页 |
| 4.4.1 一般状态观察结果 | 第53-54页 |
| 4.4.2 小鼠肝脏的总体观察 | 第54页 |
| 4.4.3 河蚬多糖对小鼠脏器指数的影响 | 第54页 |
| 4.4.4 河蚬多糖对小鼠血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶、甘油三酯水平的影响 | 第54-57页 |
| 4.4.5 河蚬多糖对小鼠血清和肝脏中丙二醛含量的影响 | 第57-58页 |
| 4.4.6 河蚬多糖对小鼠血清和肝脏中超氧化物歧化酶活性的影响 | 第58-59页 |
| 4.4.7 河蚬多糖对小鼠血清和肝脏中谷胱甘肽含量的影响 | 第59-61页 |
| 4.4.8 河蚬多糖对小鼠血清和肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响 | 第61-62页 |
| 4.4.9 河蚬多糖对小鼠血清和肝脏中过氧化氢酶活性的影响 | 第62-63页 |
| 4.4.10 河蚬多糖对小鼠肝脏中细胞因子含量的影响 | 第63-65页 |
| 4.5 本章小结 | 第65-66页 |
| 第五章 河蚬多糖对急性酒精性肝损伤保护作用机理的初探 | 第66-75页 |
| 5.1 前言 | 第66页 |
| 5.2 试验材料与仪器设备 | 第66-67页 |
| 5.2.1 试验原料 | 第66页 |
| 5.2.2 主要试剂 | 第66-67页 |
| 5.2.3 主要仪器及设备 | 第67页 |
| 5.3 试验方法 | 第67-69页 |
| 5.3.1 肝脏病理切片制作和肝微粒体的制备 | 第67页 |
| 5.3.1.1 肝脏病理切片制作 | 第67页 |
| 5.3.1.2 肝微粒体的制备 | 第67页 |
| 5.3.2 小鼠肝微粒体中CYP2E1和HO-1的mRNA表达水平分析 | 第67-68页 |
| 5.3.2.1 引物设计 | 第67-68页 |
| 5.3.2.2 RNA提取及逆转录 | 第68页 |
| 5.3.3 小鼠肝微粒体CYP2E1和HO-1的蛋白表达水平分析 | 第68-69页 |
| 5.3.3.1 BCA法蛋白定量 | 第68页 |
| 5.3.3.2 蛋白浓度调整 | 第68-69页 |
| 5.3.3.3 目的蛋白免疫印迹试验 | 第69页 |
| 5.3.3.4 内参蛋白免疫印迹试验 | 第69页 |
| 5.3.4 图像及数据分析 | 第69页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第69-74页 |
| 5.4.1 小鼠肝组织光镜检查 | 第69-70页 |
| 5.4.2 小鼠肝微粒体CYP2E1和HO-1的mRNA相对定量表达结果 | 第70-72页 |
| 5.4.3 小鼠肝微粒体CYP2E1和HO-1的蛋白水平相对定量表达结果 | 第72-74页 |
| 5.5 本章小结 | 第74-75页 |
| 第六章 结论与展望 | 第75-77页 |
| 6.1 主要结论 | 第75-76页 |
| 6.2 展望 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 在学期间发表的学术论文及其他科研成果 | 第85-86页 |
