| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| 1.1 引言 | 第10页 |
| 1.2 反式脂肪酸 | 第10-13页 |
| 1.2.1 反式脂肪酸的来源 | 第11-12页 |
| 1.2.1.1 油脂的氢化 | 第11页 |
| 1.2.1.2 油脂的精炼及高温加热处理 | 第11页 |
| 1.2.1.3 反刍动物脂肪及其乳制品 | 第11-12页 |
| 1.2.2 反式脂肪酸与人类疾病 | 第12-13页 |
| 1.2.2.1 反式脂肪酸与心血管疾病 | 第12页 |
| 1.2.2.2 反式脂肪酸与糖尿病 | 第12页 |
| 1.2.2.3 反式脂肪酸与癌症 | 第12页 |
| 1.2.2.4 反式脂肪酸与老年痴呆症 | 第12-13页 |
| 1.2.2.5 反式脂肪酸与胎儿生长发育和孕妇健康 | 第13页 |
| 1.2.2.6 反式脂肪酸与肥胖 | 第13页 |
| 1.3 肥胖 | 第13-16页 |
| 1.3.1 肥胖的发生机制 | 第14-15页 |
| 1.3.1.1 中枢机制 | 第14页 |
| 1.3.1.2 脂肪细胞特征及脂肪组织代谢 | 第14-15页 |
| 1.3.1.3 脂肪细胞的形成与分化 | 第15页 |
| 1.3.2 肥胖的影响因素 | 第15-16页 |
| 1.3.2.1 遗传因素 | 第15-16页 |
| 1.3.2.2 环境因素 | 第16页 |
| 1.4 脂肪干细胞及其成脂分化 | 第16-20页 |
| 1.4.1 ADSCs | 第16-17页 |
| 1.4.1.1 ADSCs特性 | 第16-17页 |
| 1.4.1.2 ADSCs多向分化潜能 | 第17页 |
| 1.4.2 ADSCs成脂分化 | 第17-20页 |
| 1.4.2.1 ADSCs成脂分化过程 | 第17-18页 |
| 1.4.2.2 ADSCs成脂分化相关转录因子 | 第18-19页 |
| 1.4.2.3 ADSCs成脂分化相关信号通路 | 第19-20页 |
| 1.5 选题意义 | 第20-21页 |
| 1.6 研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第22-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-26页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第22页 |
| 2.1.2 材料 | 第22-24页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第24-26页 |
| 2.2 试剂配制 | 第26-29页 |
| 2.2.1 脂肪酸配制 | 第26页 |
| 2.2.2 磷酸盐缓冲溶液（PBS） | 第26页 |
| 2.2.3 双抗（100×） | 第26页 |
| 2.2.4 DMEM/F12完全培养基 | 第26页 |
| 2.2.5 细胞冻存液 | 第26页 |
| 2.2.6 胰蛋白酶 | 第26页 |
| 2.2.7 Ⅰ型胶原酶 | 第26-27页 |
| 2.2.8 成脂分化培养基 | 第27页 |
| 2.2.8.1 地塞米松（1 mmol/L） | 第27页 |
| 2.2.8.2 IBMX（0.5 mmol/L） | 第27页 |
| 2.2.8.3 吲哚美辛（200×） | 第27页 |
| 2.2.8.4 牛胰岛素（1 mg/m L） | 第27页 |
| 2.2.9 10%中性甲醛 | 第27页 |
| 2.2.10 油红O染色液 | 第27-28页 |
| 2.2.10.1 油红O储存液 | 第27页 |
| 2.2.10.2 油红O工作液 | 第27-28页 |
| 2.2.11 苏木精染色液 | 第28页 |
| 2.2.12 茜素红染色液 | 第28页 |
| 2.2.13 1% Triton X-100 | 第28页 |
| 2.2.14 10%过硫酸胺（APS） | 第28-29页 |
| 2.2.15 蛋白免疫印迹（Western blot） | 第28页 |
| 2.2.15.1 10×电泳缓冲液 | 第28页 |
| 2.2.15.2 10×转移缓冲液 | 第28页 |
| 2.2.15.3 PBST缓冲液 | 第28-29页 |
| 2.2.15.4 封闭剂（5%脱脂奶粉） | 第29页 |
| 2.2.15.5 显影液 | 第29页 |
| 2.2.15.6 定影液 | 第29页 |
| 2.2.16 4%多聚甲醛 | 第29页 |
| 2.3 实验方法 | 第29-39页 |
| 2.3.1 ADSCs原代培养 | 第29-30页 |
| 2.3.2 细胞的传代 | 第30页 |
| 2.3.3 细胞的冻存 | 第30页 |
| 2.3.4 细胞的复苏 | 第30-31页 |
| 2.3.5 ADSCs的表面标志鉴定（流式细胞术） | 第31页 |
| 2.3.5.1 单细胞悬液的制备 | 第31页 |
| 2.3.5.2 细胞荧光抗体标记 | 第31页 |
| 2.3.6 定向诱导ADSCs成脂分化 | 第31-32页 |
| 2.3.6.1 向脂肪细胞诱导分化 | 第31-32页 |
| 2.3.6.2 油红O染色 | 第32页 |
| 2.3.7 定向诱导ADSCs成骨分化 | 第32-33页 |
| 2.3.7.1 向成骨细胞诱导分化 | 第32页 |
| 2.3.7.2 ALP钙钴法染色 | 第32-33页 |
| 2.3.7.3 茜素红染色 | 第33页 |
| 2.3.8 反亚油酸对ADSCs成脂分化的影响 | 第33-34页 |
| 2.3.8.1 油红O染色法 | 第33页 |
| 2.3.8.2 甘油三酯（TG）含量测定 | 第33-34页 |
| 2.3.9 BCA法检测蛋白浓度 | 第34页 |
| 2.3.10 蛋白免疫印迹法（Western blot） | 第34-37页 |
| 2.3.10.1 细胞总蛋白提取 | 第35页 |
| 2.3.10.2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第35-36页 |
| 2.3.10.3 转膜 | 第36页 |
| 2.3.10.4 封闭 | 第36页 |
| 2.3.10.5 一抗孵育 | 第36页 |
| 2.3.10.6 洗去一抗 | 第36页 |
| 2.3.10.7 二抗孵育 | 第36-37页 |
| 2.3.10.8 洗去二抗 | 第37页 |
| 2.3.10.9 ECL显影 | 第37页 |
| 2.3.11 免疫荧光（Immunofluorescence） | 第37-38页 |
| 2.3.12 统计分析 | 第38-39页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第39-51页 |
| 3.1 ADSCs分离培养及鉴定 | 第39-42页 |
| 3.1.1 ADSCs分离培养 | 第39页 |
| 3.1.2 ADSCs表面标志鉴定 | 第39-40页 |
| 3.1.3 ADSCs多向诱导分化 | 第40-42页 |
| 3.2 反亚油酸对ADSCs成脂分化的影响 | 第42-44页 |
| 3.2.1 油红O染色法分析反亚油酸对ADSCs成脂分化的影响 | 第42-43页 |
| 3.2.2 TG含量测定法分析反亚油酸对ADSCs成脂分化的影响 | 第43-44页 |
| 3.3 反亚油酸促进ADSCs成脂分化的机制探讨 | 第44-49页 |
| 3.3.1 Western blot法分析反亚油酸对ADSCs细胞中 β-catenin蛋白表达的影响 | 第44页 |
| 3.3.2 免疫荧光法分析反亚油酸对ADSCs细胞中 β-catenin蛋白表达的影响 | 第44-46页 |
| 3.3.3 Wnt/β-catenin激活剂Li~+拮抗反亚油酸对ADSCs成脂分化的影响 | 第46-49页 |
| 3.3.3.1 油红O染色法分析Li~+拮抗反亚油酸对ADSCs成脂分化的影响 | 第46页 |
| 3.3.3.2 TG含量测定法分析Li~+拮抗反亚油酸对ADSCs成脂分化的影响 | 第46-47页 |
| 3.3.3.3 Western blot法分析Li~+抑制反亚油酸对ADSCs细胞中 β-catenin蛋白表达的下调作用 | 第47-48页 |
| 3.3.3.4 免疫荧光法分析Li~+抑制反亚油酸对ADSCs细胞中 β-catenin蛋白表达的下调作用 | 第48-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
