| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1 骨质疏松症 | 第13页 |
| 2 成骨细胞 | 第13-16页 |
| 2.1 成骨细胞的增殖 | 第14页 |
| 2.2 成骨细胞的分化 | 第14-15页 |
| 2.2.1 碱性磷酸酶（ALP） | 第14-15页 |
| 2.2.2 I型胶原蛋白（Col- I） | 第15页 |
| 2.2.3 骨钙素（OC） | 第15页 |
| 2.2.4 特异性因子（Runx2） | 第15页 |
| 2.3 成骨细胞的矿化 | 第15-16页 |
| 3 食源性功能成分对成骨细胞的影响 | 第16-18页 |
| 3.1 乳铁蛋白对成骨细胞分化的影响 | 第16页 |
| 3.2 胶原蛋白水解物对成骨细胞分化的影响 | 第16-17页 |
| 3.3 天然产物对成骨细胞分化的影响 | 第17-18页 |
| 4 蛋黄水解工艺与蛋黄蛋白质多肽活性 | 第18-21页 |
| 4.1 蛋黄水解工艺 | 第18-19页 |
| 4.2 蛋黄蛋白质多肽活性 | 第19-21页 |
| 4.2.1 抗氧化活性 | 第19页 |
| 4.2.2 矿物质结合能力 | 第19-20页 |
| 4.2.3 降血压活性 | 第20页 |
| 4.2.4 调节骨代谢活性 | 第20-21页 |
| 5 选题目的意义及主要研究内容 | 第21-23页 |
| 5.1 本课题目的及意义 | 第21页 |
| 5.2 主要研究内容 | 第21-23页 |
| 第二章 蛋黄促成骨活性多肽的酶系筛选 | 第23-34页 |
| 1 材料与方法 | 第23-28页 |
| 1.1 材料 | 第23-24页 |
| 1.1.1 原料 | 第23页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 1.1.3 主要仪器和设备 | 第24页 |
| 1.2 方法 | 第24-28页 |
| 1.2.1 细胞培养操作 | 第24-25页 |
| 1.2.2 蛋黄中水溶性蛋白提取 | 第25-26页 |
| 1.2.3 蛋黄水溶性蛋白的水解反应 | 第26页 |
| 1.2.4 CCK-8 法检测水解产物对MC3T3-E1细胞增殖活性的影响 | 第26-27页 |
| 1.2.5 不同水解产物对MC3T3-E1细胞增殖活性影响的比较 | 第27页 |
| 1.2.6 数据分析 | 第27-28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-32页 |
| 2.1 MC3T3-E1细胞培养不同时间形态 | 第28页 |
| 2.2 MC3T3-E1细胞不同接种量与OD值关系的标准曲线 | 第28-29页 |
| 2.3 中性蛋白酶水解产物对MC3T3-E1细胞增殖的影响 | 第29-30页 |
| 2.4 风味蛋白酶水解产物对MC3T3-E1细胞增殖的影响 | 第30页 |
| 2.5 胰蛋白酶水解产物对MC3T3-E1细胞增殖的影响 | 第30-31页 |
| 2.6 碱性蛋白酶水解产物对MC3T3-E1细胞增殖的影响 | 第31页 |
| 2.7 四种酶解产物对MC3T3-E1细胞增殖活性的比较 | 第31-32页 |
| 3 讨论 | 第32-33页 |
| 4 本章小结 | 第33-34页 |
| 第三章 蛋黄促成骨活性多肽水解条件的优化 | 第34-48页 |
| 1 材料与方法 | 第34-39页 |
| 1.1 材料 | 第34-35页 |
| 1.1.1 原料 | 第34页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第34-35页 |
| 1.1.3 主要仪器与设备 | 第35页 |
| 1.2 方法 | 第35-39页 |
| 1.2.1 细胞培养操作 | 第35页 |
| 1.2.2 蛋黄水溶性蛋白的提取 | 第35-36页 |
| 1.2.3 胰蛋白酶水解条件的优化 | 第36页 |
| 1.2.4 风味蛋白酶水解条件的优化 | 第36-37页 |
| 1.2.5 复合蛋白酶的正交实验 | 第37页 |
| 1.2.6 水解度的测定 | 第37-38页 |
| 1.2.7 水解产物对MC3T3-E1细胞的增殖影响 | 第38-39页 |
| 1.2.8 数据分析 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-45页 |
| 2.1 不同时间下胰酶水解产物对MC3T3-E1增殖的影响 | 第39-40页 |
| 2.2 不同pH下胰酶水解产物对MC3T3-E1增殖的影响 | 第40-41页 |
| 2.3 不同温度下胰酶水解产物对MC3T3-E1增殖的影响 | 第41页 |
| 2.4 不同酶与底物比的胰酶水解产物对MC3T3-E1增殖的影响 | 第41-42页 |
| 2.5 不同时间下风味酶水解产物对MC3T3-E1增殖的影响 | 第42页 |
| 2.6 不同pH下风味酶水解产物对MC3T3-E1增殖的影响 | 第42-43页 |
| 2.7 不同温度下风味酶水解产物对MC3T3-E1增殖的影响 | 第43-44页 |
| 2.8 不同酶与底物比的风味酶水解产物对MC3T3-E1增殖的影响 | 第44页 |
| 2.9 胰蛋白酶与风味蛋白酶复合的正交实验结果 | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-46页 |
| 4 本章小结 | 第46-48页 |
| 第四章 蛋黄水解产物对MC3T3-E1分化及矿化的影响 | 第48-66页 |
| 1 材料与方法 | 第48-55页 |
| 1.1 材料 | 第48-50页 |
| 1.1.1 原料 | 第48页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第48-49页 |
| 1.1.3 主要仪器与设备 | 第49-50页 |
| 1.2 方法 | 第50-55页 |
| 1.2.1 细胞培养操作 | 第50页 |
| 1.2.2 蛋黄水溶性蛋白的提取 | 第50页 |
| 1.2.3 制备蛋黄蛋白质水解产物 | 第50页 |
| 1.2.4 CCK-8 试剂盒测定MC3T3-E1增值率 | 第50-51页 |
| 1.2.5 流式细胞仪分析细胞周期 | 第51页 |
| 1.2.6 ALP活力的检测 | 第51-52页 |
| 1.2.7 OC相对含量的测定 | 第52-53页 |
| 1.2.8 RT-PCR测定成骨细胞相关基因表达 | 第53-54页 |
| 1.2.9 茜素红染色测定矿化结节 | 第54-55页 |
| 1.2.10 数据分析 | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-63页 |
| 2.1 蛋黄蛋白质水解产物对MC3T3-E1增殖的影响 | 第55-56页 |
| 2.2 蛋黄蛋白质水解产物对MC3T3-E1细胞周期的影响 | 第56-58页 |
| 2.3 蛋黄蛋白质水解产物对MC3T3-E1分化的细胞外基质影响 | 第58-60页 |
| 2.3.1 水解产物对MC3T3-E1细胞ALP活性的影响 | 第58-59页 |
| 2.3.2 水解产物对MC3T3-E1细胞OC相对含量的影响 | 第59-60页 |
| 2.4 蛋黄蛋白质水解产物对成骨细胞关联基因表达影响 | 第60-62页 |
| 2.5 蛋黄蛋白质多肽对MC3T3-E1矿化影响 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-64页 |
| 4 本章小结 | 第64-66页 |
| 第五章 蛋黄水解产物的初分离及鉴定 | 第66-80页 |
| 1 材料与方法 | 第66-70页 |
| 1.1 材料 | 第66-68页 |
| 1.1.1 原料 | 第66页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第66-67页 |
| 1.1.3 主要仪器和设备 | 第67-68页 |
| 1.2 方法 | 第68-70页 |
| 1.2.1 蛋黄蛋白质水解产物的制备 | 第68页 |
| 1.2.2 纯化系统分离水解产物 | 第68页 |
| 1.2.3 超滤分离水解产物 | 第68页 |
| 1.2.4 不同组分对MC3T3-E1细胞增殖及分化的影响 | 第68-69页 |
| 1.2.5 不同组分的蛋黄水解产物的氨基酸含量 | 第69页 |
| 1.2.6 MALDI-TOF MS/MS分析不同组分肽段的情况 | 第69页 |
| 1.2.7 数据分析 | 第69-70页 |
| 2 结果分析 | 第70-78页 |
| 2.1 Superdex peptide分离水解产物及不同组分的活性 | 第70-71页 |
| 2.2 10 kDa超滤分离得到不同组分的活性 | 第71-72页 |
| 2.3 30 kDa超滤分离得到不同组分的活性 | 第72-73页 |
| 2.4 蛋黄水解产物不同组分的氨基酸含量分析 | 第73-74页 |
| 2.5 MALDI-TOF/TOF分析EYPH的肽段组成 | 第74-78页 |
| 3 讨论 | 第78-79页 |
| 4 本章小结 | 第79-80页 |
| 第六章 结论与展望 | 第80-84页 |
| 1 结论 | 第80-82页 |
| 2 本实验创新点 | 第82页 |
| 3 展望 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-93页 |
| 附录 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
