摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
中英文缩写词对照表 | 第8-13页 |
第一章 绪论 | 第13-24页 |
·豆基婴幼儿配方粉的研究概况 | 第13-14页 |
·大豆过敏原研究概况 | 第14-15页 |
·大豆致敏原检测方法研究概况 | 第15-18页 |
·以蛋白质为基础的免疫方法 | 第16-17页 |
·利用过敏者血清中特异性IgE | 第16页 |
·利用单克隆或多克隆抗体 | 第16-17页 |
·以核酸为基础的检测方法 | 第17-18页 |
·聚合酶链式反应技术(PCR) | 第17页 |
·实时荧光定量PCR技术 | 第17-18页 |
·蛋白质组学检测技术(Proteome) | 第18页 |
·其他技术 | 第18页 |
·大豆脱敏方法研究概况 | 第18-21页 |
·物理方法 | 第19-20页 |
·热处理 | 第19页 |
·辐照 | 第19页 |
·超高静压 | 第19-20页 |
·化学方法 | 第20页 |
·酶法 | 第20-21页 |
·生物学法 | 第21页 |
·立题意义及研究内容 | 第21-24页 |
·立题意义 | 第21页 |
·研究内容 | 第21-24页 |
第二章 国产与进口婴幼儿配方食品专用大豆分离蛋白比较研究 | 第24-35页 |
·前言 | 第24页 |
·材料与方法 | 第24-27页 |
·实验材料与主要试剂 | 第24页 |
·主要仪器设备 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-27页 |
·不连续SDS-聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳 | 第24-25页 |
·分子量分布测定 | 第25页 |
·显微结构测定 | 第25页 |
·过敏原含量的测定 | 第25-26页 |
·耐草甘磷(CP4 EPSPS)与耐草丁磷(PAT/pat)转基因蛋白的检测 | 第26页 |
·蛋白质体外消化率的测定 | 第26页 |
·氨基酸组成分析 | 第26-27页 |
·触变性的测定 | 第27页 |
·数据统计 | 第27页 |
·结果与讨论 | 第27-34页 |
·大豆分离蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳、分子量分布与显微结构 | 第27-29页 |
·大豆分离蛋白致敏性 | 第29页 |
·耐草甘磷与耐草丁磷转基因大豆成分检测 | 第29-30页 |
·大豆分离蛋白体外消化率的测定 | 第30-31页 |
·大豆分离蛋白氨基酸组成分析 | 第31-33页 |
·大豆分离蛋白触变性及粘度 | 第33-34页 |
·本章小结 | 第34-35页 |
第三章 引起我国婴幼儿大豆过敏的致敏原的鉴定 | 第35-59页 |
·前言 | 第35页 |
·材料与方法 | 第35-39页 |
·实验材料及主要试剂 | 第35-36页 |
·免疫印迹所需试剂配制 | 第35-36页 |
·双向电泳所需试剂配制 | 第36页 |
·主要仪器设备 | 第36-37页 |
·实验方法 | 第37-39页 |
·大豆过敏患者血清中大豆特异性免疫蛋白sIgE的测定 | 第37页 |
·大豆过敏者血清与大豆分离蛋白的免疫印迹 | 第37-38页 |
·双向电泳与免疫印迹(2D-WB)及质谱鉴定 | 第38-39页 |
·结果与讨论 | 第39-57页 |
·不同个体对大豆致敏蛋白的识别结果 | 第39-44页 |
·双向电泳、免疫印迹及串联质谱对大豆过敏原的鉴定结果 | 第44页 |
·鉴定出的致敏原与国际免疫学会联合会批准的过敏原比对结果 | 第44-56页 |
·引起我国婴幼儿大豆过敏致敏原的结构特点 | 第56-57页 |
·本章小结 | 第57-59页 |
第四章 超高静压降低大豆分离蛋白致敏性机理的研究与优化 | 第59-76页 |
·前言 | 第59页 |
·材料与方法 | 第59-62页 |
·实验材料及主要试剂 | 第59页 |
·主要仪器设备 | 第59页 |
·实验方法 | 第59-62页 |
·微波处理 | 第59-60页 |
·超声波处理 | 第60页 |
·高压均质处理 | 第60页 |
·超高静压处理 | 第60页 |
·过敏原含量的测定 | 第60页 |
·间接ELISA法测定大豆分离蛋白的抗体滴度 | 第60-61页 |
·游离巯基含量的测定 | 第61页 |
·表面疏水性(Ho)的测定 | 第61页 |
·外源荧光光谱 | 第61页 |
·Zeta电位的测定 | 第61页 |
·远紫外圆二色光谱的测定 | 第61页 |
·近紫外圆二色光谱的测定 | 第61-62页 |
·双向电泳与免疫印迹 | 第62页 |
·超高静压工艺优化 | 第62页 |
·数据统计 | 第62页 |
·结果与讨论 | 第62-75页 |
·四种物理方法对大豆分离蛋白过敏原含量及抗体滴度的影响 | 第62-64页 |
·超高静压对大豆分离蛋白致敏性的影响 | 第64页 |
·超高静压对大豆分离蛋白结构的影响 | 第64-73页 |
·超高静压对大豆分离蛋白游离巯基的影响 | 第64-65页 |
·超高静压对大豆分离蛋白表面疏水性及外源荧光光谱的影响 | 第65-67页 |
·超高静压对大豆分离蛋白Zeta电位的影响 | 第67-68页 |
·超高静压对大豆分离蛋白二级结构的影响 | 第68-70页 |
·超高静压对大豆分离蛋白高级结构的影响 | 第70-71页 |
·双向电泳与免疫印迹的结果 | 第71-73页 |
·超高静压工艺响应面优化 | 第73-75页 |
·本章小结 | 第75-76页 |
第五章 复合酶法降低专用大豆分离蛋白致敏性的研究 | 第76-95页 |
·前言 | 第76页 |
·材料与方法 | 第76-80页 |
·实验材料及主要试剂 | 第76页 |
·主要仪器设备 | 第76-77页 |
·实验方法 | 第77-80页 |
·大豆分离蛋白酶解反应 | 第77页 |
·大豆分离蛋白复合酶分步酶解反应 | 第77页 |
·大豆分离蛋白复合酶同步酶解反应 | 第77页 |
·水解度的测定 | 第77-78页 |
·过敏原含量的测定 | 第78页 |
·不连续SDS-PAGE电泳 | 第78页 |
·复合酶法工艺优化 | 第78页 |
·复合酶的Selwyn曲线测定 | 第78页 |
·初始底物浓度对酶法过敏原降低反应初始速率的影响 | 第78页 |
·超高静压处理后样品底物浓度对酶法过敏原降低初始速率的影响 | 第78-79页 |
·酶水解大豆分离蛋白的Vmax和Km的测定 | 第79页 |
·分子量分布测定 | 第79页 |
·超高静压预处理和复合酶解物超滤分级 | 第79页 |
·反相超高效液相色谱分析过 3000Da超滤膜滤液的酶解物 | 第79页 |
·超高压协同酶解产物与Solae大豆分离蛋白的品质比较 | 第79页 |
·数据统计 | 第79-80页 |
·结果与讨论 | 第80-93页 |
·不同种类蛋白酶对大豆分离蛋白的水解度及致敏性的影响 | 第80-82页 |
·酶的复配与酶解路线对大豆分离蛋白致敏性的影响 | 第82-83页 |
·复合酶法工艺优化 | 第83-86页 |
·超高静压预处理对大豆分离蛋白复合酶酶解物致敏性的影响 | 第86-87页 |
·超高静压对复合酶动力学参数的影响 | 第87-93页 |
·复合酶的稳定性分析 | 第87页 |
·复合酶法降低致敏性数据集误差结构的分析 | 第87-88页 |
·超高静压对复合酶法降低致敏性的动力学参数的影响 | 第88-91页 |
·超高静压预处理对大豆分离蛋白复合酶解物分子量分布的影响 | 第91页 |
·超高静压预处理对复合酶解物低于 3000Da组分反相高效液相图谱的影响 | 第91-92页 |
·超高压协同酶解产物与Solae大豆分离蛋白的品质比较 | 第92-93页 |
·本章小结 | 第93-95页 |
主要结论及展望 | 第95-98页 |
主要结论 | 第95-96页 |
展望 | 第96-98页 |
论文创新点 | 第98-99页 |
致谢 | 第99-100页 |
参考文献 | 第100-109页 |
附录 1: 作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第109-110页 |
附录 2: 超高静压处理样品与对照的远紫外CD图谱 | 第110页 |