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超高静压协同酶法降低专用大豆分离蛋白致敏性的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
中英文缩写词对照表第8-13页
第一章 绪论第13-24页
   ·豆基婴幼儿配方粉的研究概况第13-14页
   ·大豆过敏原研究概况第14-15页
   ·大豆致敏原检测方法研究概况第15-18页
     ·以蛋白质为基础的免疫方法第16-17页
       ·利用过敏者血清中特异性IgE第16页
       ·利用单克隆或多克隆抗体第16-17页
     ·以核酸为基础的检测方法第17-18页
       ·聚合酶链式反应技术(PCR)第17页
       ·实时荧光定量PCR技术第17-18页
     ·蛋白质组学检测技术(Proteome)第18页
     ·其他技术第18页
   ·大豆脱敏方法研究概况第18-21页
     ·物理方法第19-20页
       ·热处理第19页
       ·辐照第19页
       ·超高静压第19-20页
     ·化学方法第20页
     ·酶法第20-21页
     ·生物学法第21页
   ·立题意义及研究内容第21-24页
     ·立题意义第21页
     ·研究内容第21-24页
第二章 国产与进口婴幼儿配方食品专用大豆分离蛋白比较研究第24-35页
   ·前言第24页
   ·材料与方法第24-27页
     ·实验材料与主要试剂第24页
     ·主要仪器设备第24页
     ·实验方法第24-27页
       ·不连续SDS-聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳第24-25页
       ·分子量分布测定第25页
       ·显微结构测定第25页
       ·过敏原含量的测定第25-26页
       ·耐草甘磷(CP4 EPSPS)与耐草丁磷(PAT/pat)转基因蛋白的检测第26页
       ·蛋白质体外消化率的测定第26页
       ·氨基酸组成分析第26-27页
       ·触变性的测定第27页
       ·数据统计第27页
   ·结果与讨论第27-34页
     ·大豆分离蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳、分子量分布与显微结构第27-29页
     ·大豆分离蛋白致敏性第29页
     ·耐草甘磷与耐草丁磷转基因大豆成分检测第29-30页
     ·大豆分离蛋白体外消化率的测定第30-31页
     ·大豆分离蛋白氨基酸组成分析第31-33页
     ·大豆分离蛋白触变性及粘度第33-34页
   ·本章小结第34-35页
第三章 引起我国婴幼儿大豆过敏的致敏原的鉴定第35-59页
   ·前言第35页
   ·材料与方法第35-39页
     ·实验材料及主要试剂第35-36页
       ·免疫印迹所需试剂配制第35-36页
       ·双向电泳所需试剂配制第36页
     ·主要仪器设备第36-37页
     ·实验方法第37-39页
       ·大豆过敏患者血清中大豆特异性免疫蛋白sIgE的测定第37页
       ·大豆过敏者血清与大豆分离蛋白的免疫印迹第37-38页
       ·双向电泳与免疫印迹(2D-WB)及质谱鉴定第38-39页
   ·结果与讨论第39-57页
     ·不同个体对大豆致敏蛋白的识别结果第39-44页
     ·双向电泳、免疫印迹及串联质谱对大豆过敏原的鉴定结果第44页
     ·鉴定出的致敏原与国际免疫学会联合会批准的过敏原比对结果第44-56页
     ·引起我国婴幼儿大豆过敏致敏原的结构特点第56-57页
   ·本章小结第57-59页
第四章 超高静压降低大豆分离蛋白致敏性机理的研究与优化第59-76页
   ·前言第59页
   ·材料与方法第59-62页
     ·实验材料及主要试剂第59页
     ·主要仪器设备第59页
     ·实验方法第59-62页
       ·微波处理第59-60页
       ·超声波处理第60页
       ·高压均质处理第60页
       ·超高静压处理第60页
       ·过敏原含量的测定第60页
       ·间接ELISA法测定大豆分离蛋白的抗体滴度第60-61页
       ·游离巯基含量的测定第61页
       ·表面疏水性(Ho)的测定第61页
       ·外源荧光光谱第61页
       ·Zeta电位的测定第61页
       ·远紫外圆二色光谱的测定第61页
       ·近紫外圆二色光谱的测定第61-62页
       ·双向电泳与免疫印迹第62页
       ·超高静压工艺优化第62页
       ·数据统计第62页
   ·结果与讨论第62-75页
     ·四种物理方法对大豆分离蛋白过敏原含量及抗体滴度的影响第62-64页
     ·超高静压对大豆分离蛋白致敏性的影响第64页
     ·超高静压对大豆分离蛋白结构的影响第64-73页
       ·超高静压对大豆分离蛋白游离巯基的影响第64-65页
       ·超高静压对大豆分离蛋白表面疏水性及外源荧光光谱的影响第65-67页
       ·超高静压对大豆分离蛋白Zeta电位的影响第67-68页
       ·超高静压对大豆分离蛋白二级结构的影响第68-70页
       ·超高静压对大豆分离蛋白高级结构的影响第70-71页
       ·双向电泳与免疫印迹的结果第71-73页
     ·超高静压工艺响应面优化第73-75页
   ·本章小结第75-76页
第五章 复合酶法降低专用大豆分离蛋白致敏性的研究第76-95页
   ·前言第76页
   ·材料与方法第76-80页
     ·实验材料及主要试剂第76页
     ·主要仪器设备第76-77页
     ·实验方法第77-80页
       ·大豆分离蛋白酶解反应第77页
       ·大豆分离蛋白复合酶分步酶解反应第77页
       ·大豆分离蛋白复合酶同步酶解反应第77页
       ·水解度的测定第77-78页
       ·过敏原含量的测定第78页
       ·不连续SDS-PAGE电泳第78页
       ·复合酶法工艺优化第78页
       ·复合酶的Selwyn曲线测定第78页
       ·初始底物浓度对酶法过敏原降低反应初始速率的影响第78页
       ·超高静压处理后样品底物浓度对酶法过敏原降低初始速率的影响第78-79页
       ·酶水解大豆分离蛋白的Vmax和Km的测定第79页
       ·分子量分布测定第79页
       ·超高静压预处理和复合酶解物超滤分级第79页
       ·反相超高效液相色谱分析过 3000Da超滤膜滤液的酶解物第79页
       ·超高压协同酶解产物与Solae大豆分离蛋白的品质比较第79页
       ·数据统计第79-80页
   ·结果与讨论第80-93页
     ·不同种类蛋白酶对大豆分离蛋白的水解度及致敏性的影响第80-82页
     ·酶的复配与酶解路线对大豆分离蛋白致敏性的影响第82-83页
     ·复合酶法工艺优化第83-86页
     ·超高静压预处理对大豆分离蛋白复合酶酶解物致敏性的影响第86-87页
     ·超高静压对复合酶动力学参数的影响第87-93页
       ·复合酶的稳定性分析第87页
       ·复合酶法降低致敏性数据集误差结构的分析第87-88页
       ·超高静压对复合酶法降低致敏性的动力学参数的影响第88-91页
       ·超高静压预处理对大豆分离蛋白复合酶解物分子量分布的影响第91页
       ·超高静压预处理对复合酶解物低于 3000Da组分反相高效液相图谱的影响第91-92页
       ·超高压协同酶解产物与Solae大豆分离蛋白的品质比较第92-93页
   ·本章小结第93-95页
主要结论及展望第95-98页
 主要结论第95-96页
 展望第96-98页
论文创新点第98-99页
致谢第99-100页
参考文献第100-109页
附录 1: 作者在攻读博士学位期间发表的论文第109-110页
附录 2: 超高静压处理样品与对照的远紫外CD图谱第110页

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