| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-18页 |
| ·功能性低聚糖 | 第8页 |
| ·乳果糖 | 第8-12页 |
| ·乳果糖的生理学性质 | 第9-11页 |
| ·乳果糖的生产 | 第11-12页 |
| ·Β-半乳糖苷酶 | 第12-17页 |
| ·β-半乳糖苷酶应用现状 | 第12-14页 |
| ·β-半乳糖苷酶来源 | 第14-17页 |
| ·立题背景和意义 | 第17页 |
| ·论文主要研究内容 | 第17-18页 |
| 第二章 适合乳果糖的Β-半乳糖苷酶高产株的筛选及培养条件的优化 | 第18-39页 |
| ·引言 | 第18页 |
| ·实验材料与仪器 | 第18-19页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·试验仪器 | 第19页 |
| ·试验方法 | 第19-24页 |
| ·菌株 | 第19页 |
| ·培养基 | 第19-20页 |
| ·菌种活化 | 第20页 |
| ·菌悬液的制备方法 | 第20页 |
| ·菌株诱变的流程 | 第20-21页 |
| ·筛选方法 | 第21页 |
| ·粗酶液提取方法 | 第21页 |
| ·酶活测定方法 | 第21-22页 |
| ·诱变菌株的遗传稳定性试验 | 第22页 |
| ·薄层层析 | 第22-23页 |
| ·乳果糖的生成及反应产物的成分分析方法 | 第23页 |
| ·发酵培养基的优化方法 | 第23-24页 |
| ·培养条件的优化方法 | 第24页 |
| ·结果与讨论 | 第24-38页 |
| ·诱变剂量的选择 | 第24-26页 |
| ·菌株诱变筛选结果 | 第26页 |
| ·遗传稳定性试验 | 第26页 |
| ·最佳发酵培养基配方的确定 | 第26-34页 |
| ·培养条件的优化 | 第34-38页 |
| ·乳酸克鲁维酵母突变株K.lacti51-16-7 所产β-半乳糖苷酶的特点 | 第38页 |
| ·本章小结 | 第38-39页 |
| 第三章 K.LACT151-16-7Β-半乳糖苷酶酶学性质研究 | 第39-49页 |
| ·引言 | 第39页 |
| ·实验材料与仪器 | 第39页 |
| ·实验材料 | 第39页 |
| ·试验仪器 | 第39页 |
| ·试验方法 | 第39-43页 |
| ·菌株 | 第39-40页 |
| ·培养基及培养条件 | 第40页 |
| ·粗酶液提取方法 | 第40页 |
| ·β-半乳糖苷酶的初步分离纯化 | 第40-42页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第40-41页 |
| ·透析 | 第41页 |
| ·酶液浓缩 | 第41页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第41-42页 |
| ·酶活测定方法 | 第42页 |
| ·酶反应最适温度和热稳定性的研究 | 第42页 |
| ·酶反应最适pH 和pH 稳定性的研究 | 第42页 |
| ·金属离子对酶活的影响 | 第42页 |
| ·Lineweaver-Burk 双倒数法测定酶的米氏常数(Km)和最大反应速率(Vmax) | 第42页 |
| ·酶的低温保藏稳定性 | 第42-43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-48页 |
| ·乳酸克鲁维酵母K.lacti51-16-7β-半乳糖苷酶的分离纯化 | 第43-44页 |
| ·乳酸克鲁维酵母K.lacti51-16-7β-半乳糖苷酶的基本酶学性质 | 第44-47页 |
| ·乳酸克鲁维酵母K.lacti51-16-7β-半乳糖苷酶的动力学参数 | 第47-48页 |
| ·酶的低温保藏稳定性 | 第48页 |
| ·本章小节 | 第48-49页 |
| 第四章 2L 发酵罐的小试研究 | 第49-60页 |
| ·引言 | 第49页 |
| ·实验材料与仪器 | 第49-50页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·试验仪器 | 第49-50页 |
| ·试验方法 | 第50-52页 |
| ·菌株 | 第50页 |
| ·种子液的培养 | 第50页 |
| ·发酵罐发酵 | 第50页 |
| ·菌体浓度的测定 | 第50页 |
| ·粗酶液提取方法 | 第50页 |
| ·酶活测定方法 | 第50页 |
| ·发酵液还原糖浓度的测定 | 第50-51页 |
| ·温度对发酵产酶的影响 | 第51页 |
| ·通气量对发酵产酶的影响 | 第51页 |
| ·搅拌速度对发酵产酶的影响 | 第51页 |
| ·补料对发酵产酶的影响 | 第51页 |
| ·改变初始碳源并补料对发酵产酶的影响 | 第51-52页 |
| ·结果与讨论 | 第52-59页 |
| ·2L 发酵罐试验 | 第52-53页 |
| ·温度对发酵产酶的影响 | 第53-54页 |
| ·通气量对发酵产酶的影响 | 第54-55页 |
| ·搅拌速度对发酵产酶的影响 | 第55-57页 |
| ·不同发酵条件下产酶时间进程的比较 | 第57页 |
| ·补料对发酵产酶的影响 | 第57-58页 |
| ·改变初始碳源并补料对发酵产酶的影响 | 第58-59页 |
| ·本章小结 | 第59-60页 |
| 第五章 影响酶法合成乳果糖的因素 | 第60-66页 |
| ·引言 | 第60页 |
| ·实验材料与仪器 | 第60-61页 |
| ·实验材料 | 第60页 |
| ·试验仪器 | 第60-61页 |
| ·试验方法 | 第61-62页 |
| ·酶反应生成乳果糖的条件 | 第61页 |
| ·底物浓度对乳果糖合成的影响 | 第61页 |
| ·加酶量对乳果糖合成的影响 | 第61页 |
| ·温度对乳果糖合成的影响 | 第61页 |
| ·反应体系pH 值对乳果糖合成的影响 | 第61页 |
| ·反应时间对乳果糖合成的影响 | 第61页 |
| ·高效液相色谱(HPLC)测定条件 | 第61-62页 |
| ·结果与讨论 | 第62-65页 |
| ·乳果糖的测定 | 第62页 |
| ·乳果糖合成条件的优化 | 第62-65页 |
| ·加酶量对乳果糖合成的影响 | 第63页 |
| ·温度对乳果糖合成的影响 | 第63-64页 |
| ·反应体系pH 对乳果糖合成的影响 | 第64页 |
| ·反应时间对乳果糖合成的影响 | 第64-65页 |
| ·本章小结 | 第65-66页 |
| 主要结论 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 附录A: 紫外诱变筛选菌株乳果糖合成的HPLC 图谱 | 第74-80页 |
| 附录B: 超声诱变筛选菌株乳果糖合成的HPLC 图谱 | 第80-83页 |
| 附录C: EMS 诱变筛选菌株乳果糖合成的HPLC 图谱 | 第83-88页 |
| 附录D:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第88页 |