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适合乳果糖制备的β-半乳糖苷酶高产株的筛选及产酶条件的优化

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
第一章 绪论第8-18页
   ·功能性低聚糖第8页
   ·乳果糖第8-12页
     ·乳果糖的生理学性质第9-11页
     ·乳果糖的生产第11-12页
   ·Β-半乳糖苷酶第12-17页
     ·β-半乳糖苷酶应用现状第12-14页
     ·β-半乳糖苷酶来源第14-17页
   ·立题背景和意义第17页
   ·论文主要研究内容第17-18页
第二章 适合乳果糖的Β-半乳糖苷酶高产株的筛选及培养条件的优化第18-39页
   ·引言第18页
   ·实验材料与仪器第18-19页
     ·实验材料第18-19页
     ·试验仪器第19页
   ·试验方法第19-24页
     ·菌株第19页
     ·培养基第19-20页
     ·菌种活化第20页
     ·菌悬液的制备方法第20页
     ·菌株诱变的流程第20-21页
     ·筛选方法第21页
     ·粗酶液提取方法第21页
     ·酶活测定方法第21-22页
     ·诱变菌株的遗传稳定性试验第22页
     ·薄层层析第22-23页
     ·乳果糖的生成及反应产物的成分分析方法第23页
     ·发酵培养基的优化方法第23-24页
     ·培养条件的优化方法第24页
   ·结果与讨论第24-38页
     ·诱变剂量的选择第24-26页
     ·菌株诱变筛选结果第26页
     ·遗传稳定性试验第26页
     ·最佳发酵培养基配方的确定第26-34页
     ·培养条件的优化第34-38页
     ·乳酸克鲁维酵母突变株K.lacti51-16-7 所产β-半乳糖苷酶的特点第38页
   ·本章小结第38-39页
第三章 K.LACT151-16-7Β-半乳糖苷酶酶学性质研究第39-49页
   ·引言第39页
   ·实验材料与仪器第39页
     ·实验材料第39页
     ·试验仪器第39页
   ·试验方法第39-43页
     ·菌株第39-40页
     ·培养基及培养条件第40页
     ·粗酶液提取方法第40页
     ·β-半乳糖苷酶的初步分离纯化第40-42页
       ·硫酸铵分级沉淀第40-41页
       ·透析第41页
       ·酶液浓缩第41页
       ·蛋白质浓度的测定第41-42页
     ·酶活测定方法第42页
     ·酶反应最适温度和热稳定性的研究第42页
     ·酶反应最适pH 和pH 稳定性的研究第42页
     ·金属离子对酶活的影响第42页
     ·Lineweaver-Burk 双倒数法测定酶的米氏常数(Km)和最大反应速率(Vmax)第42页
     ·酶的低温保藏稳定性第42-43页
   ·结果与讨论第43-48页
     ·乳酸克鲁维酵母K.lacti51-16-7β-半乳糖苷酶的分离纯化第43-44页
     ·乳酸克鲁维酵母K.lacti51-16-7β-半乳糖苷酶的基本酶学性质第44-47页
     ·乳酸克鲁维酵母K.lacti51-16-7β-半乳糖苷酶的动力学参数第47-48页
     ·酶的低温保藏稳定性第48页
   ·本章小节第48-49页
第四章 2L 发酵罐的小试研究第49-60页
   ·引言第49页
   ·实验材料与仪器第49-50页
     ·实验材料第49页
     ·试验仪器第49-50页
   ·试验方法第50-52页
     ·菌株第50页
     ·种子液的培养第50页
     ·发酵罐发酵第50页
     ·菌体浓度的测定第50页
     ·粗酶液提取方法第50页
     ·酶活测定方法第50页
     ·发酵液还原糖浓度的测定第50-51页
     ·温度对发酵产酶的影响第51页
     ·通气量对发酵产酶的影响第51页
     ·搅拌速度对发酵产酶的影响第51页
     ·补料对发酵产酶的影响第51页
     ·改变初始碳源并补料对发酵产酶的影响第51-52页
   ·结果与讨论第52-59页
     ·2L 发酵罐试验第52-53页
     ·温度对发酵产酶的影响第53-54页
     ·通气量对发酵产酶的影响第54-55页
     ·搅拌速度对发酵产酶的影响第55-57页
     ·不同发酵条件下产酶时间进程的比较第57页
     ·补料对发酵产酶的影响第57-58页
     ·改变初始碳源并补料对发酵产酶的影响第58-59页
   ·本章小结第59-60页
第五章 影响酶法合成乳果糖的因素第60-66页
   ·引言第60页
   ·实验材料与仪器第60-61页
     ·实验材料第60页
     ·试验仪器第60-61页
   ·试验方法第61-62页
     ·酶反应生成乳果糖的条件第61页
     ·底物浓度对乳果糖合成的影响第61页
     ·加酶量对乳果糖合成的影响第61页
     ·温度对乳果糖合成的影响第61页
     ·反应体系pH 值对乳果糖合成的影响第61页
     ·反应时间对乳果糖合成的影响第61页
     ·高效液相色谱(HPLC)测定条件第61-62页
   ·结果与讨论第62-65页
     ·乳果糖的测定第62页
     ·乳果糖合成条件的优化第62-65页
       ·加酶量对乳果糖合成的影响第63页
       ·温度对乳果糖合成的影响第63-64页
       ·反应体系pH 对乳果糖合成的影响第64页
       ·反应时间对乳果糖合成的影响第64-65页
   ·本章小结第65-66页
主要结论第66-68页
致谢第68-69页
参考文献第69-74页
附录A: 紫外诱变筛选菌株乳果糖合成的HPLC 图谱第74-80页
附录B: 超声诱变筛选菌株乳果糖合成的HPLC 图谱第80-83页
附录C: EMS 诱变筛选菌株乳果糖合成的HPLC 图谱第83-88页
附录D:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第88页

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