| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第7-21页 |
| ·镉的生物学特性 | 第7-9页 |
| ·镉的理化性质 | 第7页 |
| ·自然界中镉的分布及存在状态 | 第7-8页 |
| ·镉的毒性 | 第8-9页 |
| ·镉对信号传导途径的影响 | 第9-14页 |
| ·镉对 MAPK 信号的影响 | 第9-12页 |
| ·镉对其他信号通路的影响 | 第12-14页 |
| ·镉离子的吸收以及细胞脱毒机制 | 第14-18页 |
| ·镉离子的吸收系统 | 第14-16页 |
| ·细胞对镉的脱毒机制 | 第16-18页 |
| ·酿酒酵母 VPS 系统及其对重金属胁迫的应答 | 第18-19页 |
| ·本课题研究的主要内容和意义 | 第19-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-35页 |
| ·实验仪器与材料 | 第21-26页 |
| ·实验所用仪器 | 第21页 |
| ·主要实验试剂、酶制剂及其他商品 | 第21-22页 |
| ·实验所用试剂盒、DNA 及蛋白质样品 | 第22-23页 |
| ·实验所用溶液及其配制 | 第23-26页 |
| ·实验用菌株、质粒及引物 | 第26-30页 |
| ·实验方法 | 第30-35页 |
| ·质粒构建 | 第30-32页 |
| ·酵母转化 | 第32页 |
| ·酵母基因组提取 | 第32页 |
| ·倍比稀释表型分析 | 第32页 |
| ·β-半乳糖苷酶活力测定 | 第32-33页 |
| ·Western Blot | 第33-34页 |
| ·原子吸收法测定细胞内离子浓度 | 第34-35页 |
| 第三章 酿酒酵母 HOG 途径和 CWI 途径对镉的应答机制 | 第35-51页 |
| ·MAPKs-CWI-HOG 途径表型分析 | 第35-37页 |
| ·镉胁迫下 HOG 途径对 Hog1p 的激活 | 第37-40页 |
| ·Hog1p 磷酸化水平随镉处理时间和浓度变化 | 第37-38页 |
| ·HOG 途径两条分支参与 Hog1p 的激活 | 第38-39页 |
| ·镉胁迫下 Hog1p 的定位 | 第39-40页 |
| ·镉胁迫下 CWI 途径中 Slt2p 的激活 | 第40-43页 |
| ·Slt2p 磷酸化水平随镉处理时间变化 | 第40-41页 |
| ·CWI 途径组分对 Slt2p 激活的影响 | 第41-43页 |
| ·镉胁迫条件下 Slt2p 的定位于 | 第43页 |
| ·其他信号传导途径对 Slt2p 激活的影响 | 第43-47页 |
| ·TOR 途径对 Slt2p 激活的影响 | 第43-45页 |
| ·镉胁迫下 Slt2p 的激活与 HOG 途径无关 | 第45-46页 |
| ·镉胁迫下 Ca~(2+)对 MAPK 激活的影响 | 第46-47页 |
| ·本章小结与讨论 | 第47-51页 |
| ·小结 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-51页 |
| 第四章 细胞膜通道蛋白在镉胁迫下的调控机制 | 第51-68页 |
| ·通道蛋白缺失后的表型分析 | 第51-53页 |
| ·通道蛋白缺失菌株内镉含量测定 | 第53页 |
| ·通道蛋白与 HOG & CWI 途径的关系 | 第53-65页 |
| ·双基因缺失株构建 | 第53-54页 |
| ·双基因缺失菌株表型分析 | 第54-58页 |
| ·Hog1p 和 Slt2p 对 SMF1 & SMF2 基因的转录调控 | 第58-61页 |
| ·SMF1, SMF2 启动子区 SWI6/SMP1 结合位点的定点突变 | 第61-64页 |
| ·Pca1p 与 HOG1 & SLT2 的关系 | 第64-65页 |
| ·Fet4p 与 HOG1 & SLT2 的关系 | 第65页 |
| ·本章小结与讨论 | 第65-68页 |
| ·SMF1 的表达受 Hog1 和 Slt2 的调控，SMF2 主要由 Slt2 调控 | 第65-66页 |
| ·FET4 与 Hog1 / Slt2 遗传互作 | 第66-67页 |
| ·PCA1 的转录与 Hog1 / Slt2 有关 | 第67-68页 |
| 第五章 锌通道蛋白在镉胁迫下的降解机制 | 第68-78页 |
| ·VPS Class E 与 ZRT1/ZRT2 双基因缺失菌株构建 | 第68-69页 |
| ·VPS Class E 与 ZRT1/ZRT2 双基因缺失菌株表型分析 | 第69-72页 |
| ·双基因缺失菌株对镉的表型分析 | 第69-70页 |
| ·双基因缺失菌株对锌的表型分析 | 第70-72页 |
| ·VPS Class E 基因缺失菌株中 ZRT1, ZRT2 转录和翻译后修饰 | 第72-75页 |
| ·质粒构建 | 第72-73页 |
| ·VPS Class E 基因缺失菌株中 ZRT1, ZRT2 转录水平分析 | 第73-74页 |
| ·VPS Class E 基因缺失菌株中 Zrt1p, Zrt2p 的降解情况分析 | 第74-75页 |
| ·Hog1p & Slt2p 对 ZRT1, ZRT2 转录水平的影响 | 第75-76页 |
| ·本章小结与讨论 | 第76-78页 |
| ·小结 | 第76页 |
| ·讨论 | 第76-78页 |
| 第六章 镉离子敏感菌株对其它必需金属离子的敏感性 | 第78-82页 |
| ·镉胁迫下酿酒酵母 BY4743 背景基因缺失菌株文库筛选 | 第78页 |
| ·镉敏感性基因缺失菌株对必需金属 Mn, Zn, Fe 的表型分析 | 第78-80页 |
| ·本章小结与讨论 | 第80-82页 |
| ·小结 | 第80-81页 |
| ·讨论 | 第81-82页 |
| 第七章 总结与展望 | 第82-85页 |
| ·总结 | 第82-83页 |
| ·展望 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-106页 |
| 发表论文和参加科研情况 | 第106-107页 |
| 致谢 | 第107页 |
