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嗜酸乳杆菌S-层蛋白激活巨噬细胞免疫调节作用的信号机制研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第1章 绪论第11-23页
    1.1 乳酸菌的研究进展第11-14页
        1.1.1 乳酸菌的特性第11页
        1.1.2 乳酸菌益生功能第11-13页
        1.1.3 乳酸菌的应用第13-14页
    1.2 乳酸菌S-层蛋白研究进展第14-18页
        1.2.1 S-层蛋白基本特征第14-15页
        1.2.2 S-层蛋白的提取纯化第15-16页
        1.2.3 S-层蛋白的功能第16-17页
        1.2.4 乳酸菌S-层蛋白应用第17-18页
    1.3 巨噬细胞免疫功能的研究进展第18-21页
        1.3.1 巨噬细胞与其极化第18页
        1.3.2 巨噬细胞免疫应答信号通路第18-20页
        1.3.3 乳酸菌与巨噬细胞研究进展第20-21页
    1.4 本课题研究意义、目的与研究内容第21-23页
        1.4.1 研究意义与目的第21-22页
        1.4.2 研究内容第22-23页
第2章 嗜酸乳杆菌S-层蛋白对巨噬细胞TNF-α、IL-10 mRNA表达的影响第23-33页
    2.1 材料与仪器第23-25页
        2.1.1 主要试剂第23-24页
        2.1.2 主要仪器第24-25页
    2.2 实验方法第25-27页
        2.2.1 S-层蛋白提取第25页
        2.2.2 S-层蛋白分离纯化及纯化效果分析第25页
        2.2.3 巨噬细胞的培养与分组第25页
        2.2.4 嗜酸乳杆菌S-层蛋白对巨噬细胞TNF-α及IL-I0的mRNA表达的影响第25-27页
        2.2.5 结果分析第27页
    2.3 实验结果与分析第27-32页
        2.3.1 S-层蛋白纯化效果第27-28页
        2.3.2 RAW264.7巨噬细胞生长状态第28-29页
        2.3.3 细胞RNA提取及qPCR扩增特异性效果第29-30页
        2.3.4 S-层蛋白对刺激巨噬细胞的TNF-α、 IL-10 mRNA表达量的影响第30-32页
    2.4 本章小结第32-33页
第3章 嗜酸乳杆菌S-层蛋白对小鼠巨噬细胞信号分子NF-κB和ERK以及AP-1影响第33-50页
    3.1 材料与仪器第33-34页
        3.1.1 主要试剂第33-34页
        3.1.2 主要仪器第34页
    3.2 实验方法第34-38页
        3.2.1 巨噬细胞的培养与分组第34-35页
        3.2.2 荧光显微镜观察巨噬细胞NF-κB核移位第35页
        3.2.3 Western Blot测定巨噬细胞磷酸化ERK1/2和IκBα蛋白的表达水平第35-36页
        3.2.4 凝胶电泳迁移分析(EMSA) NF-κB及AP-1的DNA结合活性第36-37页
        3.2.5 数据统计分析第37-38页
    3.3 实验结果与分析第38-48页
        3.3.1 巨噬细胞NF-κB核移位观察结果第38-39页
        3.3.2 巨噬细胞内IκBα蛋白表达的检测结果第39-41页
        3.3.3 巨噬细胞内磷酸化ERK1/2蛋白表达的检测结果第41-45页
        3.3.4 巨噬细胞中NF-κB的DNA结合活性的检测结果第45-46页
        3.3.5 巨噬细胞中AP-1的DNA结合活性的检测结果第46-48页
    3.4 本章小结第48-50页
第4章 S-层蛋白激活巨噬细胞的iTRAQ蛋白组学分析第50-61页
    4.1 材料与仪器第50-51页
        4.1.1 主要试剂第50-51页
        4.1.2 主要仪器第51页
    4.2 实验方法第51-54页
        4.2.1 实验分组第51页
        4.2.2 样品制备第51-52页
        4.2.3 蛋白定量第52页
        4.2.4 SDS-PAGE电泳样品检测实验第52页
        4.2.5 蛋白还原烷基化、酶解及标记第52-53页
        4.2.7 2D-LC-MSMS分析第53-54页
        4.2.8 生物信息学分析第54页
    4.3 实验结果与分析第54-60页
        4.3.1 iTRAQ鉴定蛋白统计第54-55页
        4.3.2 S-层蛋白刺激巨噬细胞中差异蛋白生物信息功能分析第55-57页
        4.3.3 S-层蛋白刺激巨噬细胞中KEGG信号途径分析第57-60页
    4.4 本章小结第60-61页
全文结论第61-62页
    论文创新性第61页
    项目基金来源第61-62页
参考文献第62-68页
致谢第68页

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