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高静压对解脂耶氏酵母脂肪酶的作用及其机理初探

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
1 绪论第8-16页
    1.1 脂肪酶的研究进展第8-9页
        1.1.1 脂肪酶概述第8页
        1.1.2 脂肪酶的应用与前景第8-9页
    1.2 高静压技术在食品加工中的应用第9-10页
        1.2.1 高静压技术的特点第9页
        1.2.2 高静压技术在食品中的主要应用第9-10页
    1.3 高静压对酶的作用第10-13页
        1.3.1 高静压对酶催化能力的影响第11页
        1.3.2 高静压对酶构象的影响第11-12页
        1.3.3 高静压对酶热稳定性的影响第12-13页
        1.3.4 高静压下分子作用机制第13页
    1.4 立题背景和意义第13-14页
    1.5 研究内容第14-16页
2 实验材料与方法第16-21页
    2.1 材料与设备第16页
        2.1.1 材料与试剂第16页
        2.1.2 实验设备第16页
    2.2 实验方法第16-21页
        2.2.1 脂肪酶的纯化第16-17页
        2.2.2 高静压下不同因素对脂肪酶活力的影响第17-18页
        2.2.3 缓冲介质对脂肪酶活力的影响第18-19页
        2.2.4 高静压对脂肪酶构象的影响第19-20页
        2.2.5 温度与压力的拮抗作用第20-21页
3 结果与讨论第21-44页
    3.1 脂肪酶的纯化第21-23页
        3.1.1 强阴离子交换柱纯化第21页
        3.1.2 凝胶过滤色谱柱纯化第21-22页
        3.1.3 SDS-PAGE检测纯化后脂肪酶蛋白纯度第22-23页
        3.1.4 粗酶与纯化后酶活力的比较第23页
    3.2 高静压下不同因素对脂肪酶活力的影响第23-28页
        3.2.1 压力对脂肪酶活力的影响第23-24页
        3.2.2 高压下温度对脂肪酶活力的影响第24-25页
        3.2.3 高压下pH对脂肪酶活力的影响第25-26页
        3.2.4 保压时间对脂肪酶活力的影响第26页
        3.2.5 解压后脂肪酶的复原性第26-27页
        3.2.6 高静压处理的条件优化第27-28页
    3.3 缓冲介质对脂肪酶活力的影响第28-33页
        3.3.1 常压下不同缓冲介质对脂肪酶活力的影响第29-30页
        3.3.2 高压下不同缓冲介质对脂肪酶活力的影响第30-31页
        3.3.3 多元醇对脂肪酶活力的作用第31-33页
        3.3.4 缓冲介质对固定化脂肪酶活力的影响第33页
    3.4 高静压下脂肪酶的构象变化第33-39页
        3.4.1 SDS-PAGE检测蛋白一级结构第34-35页
        3.4.2 圆二色(CD)光谱检测蛋白二级结构第35-36页
        3.4.3 内源荧光光谱检测蛋白三级结构第36-38页
        3.4.4 Native-PAGE检测蛋白四级结构第38-39页
    3.5 高静压下温度与压力的拮抗作用第39-44页
        3.5.1 零级反应机理的验证第39-40页
        3.5.2 温度-压力二元相图第40-44页
主要结论与展望第44-46页
    主要结论第44-45页
    展望第45-46页
致谢第46-47页
参考文献第47-54页
附录A:水解反应速率方程第54-57页
附录B:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第57页

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