| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-35页 |
| ·立题背景 | 第15-18页 |
| ·米曲霉酸性蛋白酶研究进展 | 第18-22页 |
| ·米曲霉酸性蛋白酶的酶学特性与结构研究 | 第18-20页 |
| ·米曲霉酸性蛋白酶的分子生物学研究 | 第20-22页 |
| ·工业微生物育种途径及其在米曲霉性状改良中的应用 | 第22-32页 |
| ·常规育种途径概述 | 第22-24页 |
| ·基于基因组重组的原生质体融合育种 | 第24-28页 |
| ·工业微生物菌种选育途径在米曲霉性状改良上的应用 | 第28-32页 |
| ·本文研究意义与内容 | 第32-35页 |
| ·本文研究意义 | 第32-33页 |
| ·本文研究内容与架构 | 第33-35页 |
| 第二章 亲本原生质体的制备与灭活 | 第35-50页 |
| ·材料与方法 | 第35-38页 |
| ·菌株与酶制剂 | 第35-36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·主要培养基与溶液的配制 | 第36-37页 |
| ·菌丝体的培养与预处理 | 第37页 |
| ·原生质体的制备 | 第37-38页 |
| ·原生质体的染色观察 | 第38页 |
| ·原生质体的灭活 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-47页 |
| ·制备条件对原生质体释放和再生的影响 | 第38-46页 |
| ·灭活强度对原生质体致死率的影响 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| ·本章小结 | 第49-50页 |
| 第三章 原生质体融合与融合子筛选及验证 | 第50-84页 |
| ·材料与方法 | 第50-59页 |
| ·亲本原生质体 | 第50页 |
| ·培养基 | 第50-51页 |
| ·主要试剂 | 第51页 |
| ·主要仪器 | 第51页 |
| ·主要试剂的配制 | 第51-52页 |
| ·原生质体的融合 | 第52页 |
| ·杂核体的稳定化与单倍体化 | 第52-53页 |
| ·融合株的筛选 | 第53-56页 |
| ·融合株的鉴定 | 第56-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-81页 |
| ·亲本原生质体的电融合 | 第59-61页 |
| ·融合株的筛选 | 第61-68页 |
| ·融合株的鉴定 | 第68-81页 |
| ·讨论 | 第81-83页 |
| ·本章小结 | 第83-84页 |
| 第四章 融合株F76 种曲酸性蛋白酶的分离纯化与表征 | 第84-110页 |
| ·材料与方法 | 第84-90页 |
| ·主要试剂 | 第84-85页 |
| ·主要仪器 | 第85页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第85页 |
| ·酸性蛋白酶活性测定 | 第85页 |
| ·粗酶的提取 | 第85页 |
| ·融合株F76 酸性蛋白酶的纯化 | 第85-86页 |
| ·融合株F76 酸性蛋白酶的表征 | 第86-89页 |
| ·统计分析 | 第89-90页 |
| ·结果与分析 | 第90-108页 |
| ·融合株F76 酸性蛋白酶的分离纯化 | 第90-93页 |
| ·融合株F76 酸性蛋白酶的表征 | 第93-108页 |
| ·讨论 | 第108-109页 |
| ·本章小结 | 第109-110页 |
| 第五章 融合株F76 种曲发酵产酸性蛋白酶的优化 | 第110-133页 |
| ·材料与方法 | 第110-113页 |
| ·菌种与主要试剂 | 第110-111页 |
| ·主要设备 | 第111页 |
| ·主要培养基与配制 | 第111页 |
| ·发酵提酶与酶活测定 | 第111页 |
| ·培养基优化 | 第111-113页 |
| ·培养条件的优化 | 第113页 |
| ·统计分析 | 第113页 |
| ·结果与分析 | 第113-131页 |
| ·培养基组成的优化 | 第113-123页 |
| ·培养条件的优化 | 第123-131页 |
| ·讨论 | 第131-132页 |
| ·本章小结 | 第132-133页 |
| 第六章 F76 在酱油发酵中的促发酵作用研究 | 第133-154页 |
| ·材料与方法 | 第133-138页 |
| ·菌株与主要试剂 | 第133-134页 |
| ·主要设备 | 第134页 |
| ·可溶性无盐固形物 | 第134-135页 |
| ·总酸的测定 | 第135-136页 |
| ·总氮的测定 | 第136页 |
| ·游离氮的测定 | 第136-137页 |
| ·分子量分布测定 | 第137页 |
| ·氨基酸分析 | 第137-138页 |
| ·风味化合物的分离与鉴定 | 第138页 |
| ·结果与分析 | 第138-151页 |
| ·F76 对酱油发酵体系无盐固形物含量的影响 | 第138-139页 |
| ·F76 对酱油发酵体系总酸含量的影响 | 第139-140页 |
| ·F76 对酱油发酵体系总氮和氨基氮的影响 | 第140-142页 |
| ·F76 对体系分子量分布的影响 | 第142-144页 |
| ·F76 对发酵体系中氨基酸释放规律的影响 | 第144-146页 |
| ·F76 对发酵酱油主要风味化合物的影响 | 第146-151页 |
| ·讨论 | 第151-152页 |
| ·本章小结 | 第152-154页 |
| 结论与展望 | 第154-157页 |
| 一、结论 | 第154-155页 |
| 二、本研究主要创新点 | 第155-156页 |
| 三、展望 | 第156-157页 |
| 参考文献 | 第157-177页 |
| 附录 | 第177-198页 |
| 组分Ⅰ 串联质谱 | 第177-181页 |
| 组分Ⅱ 串联质谱 | 第181-185页 |
| 组分Ⅲ 串联质谱 | 第185-189页 |
| 组分Ⅳ 串联质谱 | 第189-194页 |
| 组分Ⅴ 串联质谱 | 第194-198页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第198-199页 |
| 致谢 | 第199页 |