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基于RNA-Seq技术的米曲霉RIB40转录组学研究

摘要第1-8页
Abstract第8-20页
第一章 绪论第20-44页
   ·转录组学概述第20-21页
   ·转录组学研究的基本方法第21-28页
     ·表达序列标签(EST)技术第21-24页
     ·基因芯片技术第24-28页
   ·高通量测序条件下的转录组学研究第28-32页
     ·基因表达系列分析技术第29-30页
     ·大规模平行测序技术第30-32页
   ·利用RNA-Seq 技术的转录组学研究第32-37页
   ·米曲霉的转录组学研究第37-42页
     ·米曲霉研究概述第37-40页
     ·米曲霉转录组学研究现状第40-42页
   ·本课题的研究目的及主要内容第42-44页
     ·选题背景及研究目的第42页
     ·本研究的主要内容第42-44页
第二章 米曲霉转录组样品制备及RNA-Seq 测序第44-60页
   ·引言第44页
   ·实验材料第44-47页
     ·菌种第44-45页
     ·主要试剂第45-46页
     ·主要试剂的配制第46页
     ·主要仪器设备第46-47页
   ·实验方法第47-54页
     ·米曲霉培养第47-48页
     ·RNA 提取及纯化第48-50页
     ·RNA 样品质量检测第50-52页
     ·RNA-Seq 测序文库制备第52-53页
     ·RNA-Seq 文库测序第53-54页
   ·结果与讨论第54-59页
     ·米曲霉的内质网压力胁迫状态的建立第54-55页
     ·米曲霉RNA 样品制备第55-56页
     ·米曲霉RNA 样品质量分析(NanoDrop1000 分光光度计)第56页
     ·米曲霉RNA 样品质量分析(Agilent Technologies 2100 Bioanalyzer)第56-57页
     ·米曲霉内质网压力胁迫状态的qPCR 验证第57-59页
     ·RNA-Seq 文库制备及测序第59页
   ·本章小结第59-60页
第三章 米曲霉转录组的全局分析第60-80页
   ·引言第60页
   ·实验材料第60-62页
     ·转录组分析的原始数据第60页
     ·主要试剂第60-61页
     ·主要试剂的配制第61页
     ·主要仪器设备第61-62页
   ·数据分析方法及实验方法第62-68页
     ·测序数据匹配到米曲霉基因组及基因上第62-63页
     ·基因表达水平的确定及标准化第63-64页
     ·基因非翻译区(UTR)分析第64-65页
     ·基于RNA-Seq 数据的新转录本分析第65-66页
     ·基因的GO 功能注释及富集分析第66-67页
     ·RT-PCR 验证RNA-Seq 数据的分析结果第67-68页
   ·结果与讨论第68-78页
     ·RNA-Seq reads 在米曲霉基因组及基因上的匹配统计第68-69页
     ·RNA-Seq 技术的准确性分析第69-72页
     ·米曲霉全基因组水平的转录分析第72-73页
     ·基因非翻译区(UTR)的分布和功能预测第73-75页
     ·米曲霉基因uORF 和uATG 的分析第75-76页
     ·米曲霉新转录本和新外显子的分析第76-78页
   ·本章小结第78-80页
第四章 米曲霉转录组中的可变剪接分析第80-93页
   ·引言第80页
   ·实验材料第80-82页
     ·可变剪接分析的原始数据第80页
     ·主要试剂第80-81页
     ·主要试剂的配制第81-82页
     ·主要仪器设备第82页
   ·实验方法第82-85页
     ·可变剪接分析方法第82-84页
     ·RT-PCR 验证米曲霉中的可变剪接事件第84页
     ·实时荧光定量PCR(qPCR)验证可变剪接事件第84-85页
   ·结果与讨论第85-92页
     ·米曲霉中可变剪接的种类和数量第85-86页
     ·RT-PCR 和qPCR 验证米曲霉中的可变剪接事件第86-90页
     ·米曲霉中可变剪接发生机制的推测第90-92页
   ·本章小结第92-93页
第五章 固体和液体培养条件下米曲霉转录组的基因差异表达分析第93-102页
   ·引言第93页
   ·原始数据第93-94页
   ·数据分析方法第94-96页
     ·基于R 语言软件包DEGseq 的差异表达基因分析方法第94页
     ·差异表达基因的GO 功能富集分析第94页
     ·基于Cytoscape 软件的差异表达基因的KEGG 代谢途径分析第94-96页
   ·结果与讨论第96-101页
     ·米曲霉固体和液体培养条件下基因差异表达分析第96页
     ·差异表达基因的功能聚类第96-97页
     ·差异表达基因在米曲霉代谢网络中的功能分析第97-99页
     ·能量代谢途径基因的差异表达第99页
     ·蛋白合成相关基因的差异表达第99-101页
   ·本章小结第101-102页
第六章 内质网压力胁迫下米曲霉的蛋白分泌研究第102-113页
   ·引言第102-103页
   ·实验材料第103-104页
     ·原始数据第103-104页
     ·主要试剂第104页
     ·主要仪器设备第104页
   ·实验方法第104-106页
     ·分析米曲霉内质网压力胁迫下的差异表达基因第104-105页
     ·差异表达基因的GO 功能富集分析第105页
     ·差异表达基因的实时荧光定量PCR(qPCR)验证第105-106页
   ·结果与讨论第106-112页
     ·米曲霉内质网压力胁迫下的差异表达基因第106-107页
     ·内质网压力胁迫下米曲霉的蛋白分泌调控第107-109页
     ·内质网压力胁迫下米曲霉中的RESS 机制第109-111页
     ·内质网压力胁迫下蛋白翻译水平的调控第111-112页
   ·本章小结第112-113页
结论与展望第113-116页
参考文献第116-127页
附录第127-145页
攻读博士学位期间取得的研究成果第145-146页
致谢第146页

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