| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 英文缩略词 | 第11-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-51页 |
| 1.1 面筋蛋白概述 | 第18-19页 |
| 1.2 小麦高分子量麦谷蛋白亚基 | 第19-23页 |
| 1.2.1 HMW-GS表达翻译位点 | 第19-20页 |
| 1.2.2 HMW-GS与小麦加工品质间的关系 | 第20-23页 |
| 1.3 小麦HMW-GS的氨基酸序列及分子结构 | 第23-29页 |
| 1.3.1 HMW-GS的氨基酸组成 | 第23-26页 |
| 1.3.2 HMW-GS的分子结构 | 第26-29页 |
| 1.4 HMW-GS相互作用及对面筋蛋白品质的贡献 | 第29-39页 |
| 1.4.1 HMW-GS间的共价交联作用 | 第29-34页 |
| 1.4.2 HMW-GS间的非共价作用 | 第34-37页 |
| 1.4.3 HMW-GS功能结构域对面粉加工品质的贡献作用 | 第37-39页 |
| 1.5 本课题的研究意义及内容 | 第39-43页 |
| 1.5.1 研究背景和意义 | 第39-40页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第40-42页 |
| 1.5.3 研究技术路线 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-51页 |
| 第二章 重组1Dx5-N聚集行为研究 | 第51-71页 |
| 2.1 引言 | 第51-52页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第52页 |
| 2.2.1 实验菌株与质粒 | 第52页 |
| 2.2.2 实验材料 | 第52页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第52页 |
| 2.3 实验方法 | 第52-57页 |
| 2.3.1 1Dx5-N的克隆、表达及分离纯化 | 第52-54页 |
| 2.3.2 实验样品的制备 | 第54-55页 |
| 2.3.3 蛋白电泳 | 第55页 |
| 2.3.4 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF-MS) | 第55-56页 |
| 2.3.5 内源荧光测量 | 第56页 |
| 2.3.6 分子排阻色谱(SEC) | 第56页 |
| 2.3.7 圆二色光谱(CD)和动态光散色(DLS) | 第56页 |
| 2.3.8 数据分析 | 第56-57页 |
| 2.4 结果与分析 | 第57-66页 |
| 2.4.1 1Dx5-N的可溶性分析 | 第57-58页 |
| 2.4.2 疏水作用和二硫键作用力对1Dx5-N聚集体形成的影响 | 第58-62页 |
| 2.4.3 食用盐NaCl和Na_2CO_3对1Dx5-N聚集体形成的影响 | 第62-66页 |
| 2.5 本章小结 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 第三章 热处理协同食用盐诱导1Dx5-N聚集及其对界面性质的影响 | 第71-99页 |
| 3.1 引言 | 第71-72页 |
| 3.2 材料与仪器 | 第72-73页 |
| 3.2.1 实验菌株与质粒 | 第72页 |
| 3.2.2 实验材料 | 第72页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第72-73页 |
| 3.3 实验方法 | 第73-79页 |
| 3.3.1 1Dx5-N的表达及分离纯化 | 第73页 |
| 3.3.2 实验流程 | 第73-74页 |
| 3.3.3 目的蛋白溶解度和浊度测量 | 第74页 |
| 3.3.4 目的蛋白表面疏水性(H_0)测定 | 第74页 |
| 3.3.5 圆二色光谱(CD)和动态光散色测定 | 第74-75页 |
| 3.3.6 分子排阻色谱(SE-HPLC) | 第75页 |
| 3.3.7 总自由巯基含量的测定 | 第75页 |
| 3.3.8 还原型SDS-PAGE和非还原型SDS-PAGE | 第75-76页 |
| 3.3.9 原子力显微镜(AFM)测试 | 第76页 |
| 3.3.10 氧化还原电位测定(ζ-电位) | 第76页 |
| 3.3.11 表面张力测定 | 第76-77页 |
| 3.3.12 界面流变测定 | 第77-78页 |
| 3.3.13 数据分析 | 第78-79页 |
| 3.4 结果与分析 | 第79-92页 |
| 3.4.1 热处理协同NaCl和Na_2CO_3对1Dx5-N溶解度和浊度的影响 | 第79页 |
| 3.4.2 热处理协同NaCl和Na_2CO_3对1Dx5-N二级结构和表面疏水性(H0)的影响 | 第79-82页 |
| 3.4.3 热处理协同NaCl和Na_2CO_3对1Dx5-N粒径和分子量的影响 | 第82-85页 |
| 3.4.4 热处理协同NaCl和Na_2CO_3诱导1Dx5-N分子间二硫键交联 | 第85-87页 |
| 3.4.5 热处理协同NaCl和Na_2CO_3对1Dx5-N界面性质的影响 | 第87-92页 |
| 3.5 本章小结 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-99页 |
| 第四章 1Dx5-N贡献面团结构和加工品质的作用机制 | 第99-123页 |
| 4.1 引言 | 第99-100页 |
| 4.2 材料与仪器 | 第100-101页 |
| 4.2.1 实验菌株与质粒 | 第100页 |
| 4.2.2 实验材料 | 第100页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第100-101页 |
| 4.3 实验方法 | 第101-105页 |
| 4.3.1 1Dx5-N表达及分离纯化 | 第101页 |
| 4.3.2 面团和面筋蛋白样品的制备 | 第101-102页 |
| 4.3.3 面粉粉质实验 | 第102页 |
| 4.3.4 1Dx5-N对面团流变性能的影响 | 第102页 |
| 4.3.5 分子排阻色谱(SEC) | 第102-103页 |
| 4.3.6 还原型和非还原型SDS-PAGE | 第103页 |
| 4.3.7 总自由巯基(Totalfreesulfhydryl)含量的测定 | 第103-104页 |
| 4.3.8 扫描电镜(SEM) | 第104页 |
| 4.3.9 傅里叶转换红外光谱(FT-IR) | 第104-105页 |
| 4.3.10 数据分析 | 第105页 |
| 4.4 结果与分析 | 第105-117页 |
| 4.4.1 1Dx5-N对面团粉质特性参数和流变学性能的影响 | 第105-107页 |
| 4.4.2 1Dx5-N对面筋蛋白聚集体和二硫键形成的影响 | 第107-111页 |
| 4.4.3 1Dx5-N对面团微观结构以及面筋蛋白二级结构的影响 | 第111-115页 |
| 4.4.4 讨论 | 第115-117页 |
| 4.5 本章小结 | 第117-119页 |
| 参考文献 | 第119-123页 |
| 第五章 解析1Dx5-N半胱氨酸的交联机制及其对蛋白结构稳定性的影响 | 第123-147页 |
| 5.1 引言 | 第123页 |
| 5.2 材料与仪器 | 第123-124页 |
| 5.2.1 实验菌株与质粒 | 第123页 |
| 5.2.2 实验材料 | 第123-124页 |
| 5.2.3 实验仪器 | 第124页 |
| 5.3 实验方法 | 第124-129页 |
| 5.3.1 1Dx5-N的基因定点突变 | 第124-125页 |
| 5.3.3 实验样品的制备 | 第125-126页 |
| 5.3.4 蛋白胶内酶解辅助高分辨液质(LC-MS/MS)分析 | 第126-127页 |
| 5.3.5 还原型SDS-PAGE和非还原型SDS-PAGE | 第127-128页 |
| 5.3.6 圆二色光谱和内源荧光光谱 | 第128页 |
| 5.3.7 蛋白表面疏水性(H0)测量 | 第128页 |
| 5.3.8 蛋白分子排阻色谱 | 第128-129页 |
| 5.3.9 原子力显微镜(AFM) | 第129页 |
| 5.3.10 数据分析 | 第129页 |
| 5.4 结果与分析 | 第129-142页 |
| 5.4.1 基因定点突变和胶内酶解辅助高分辨质谱技术解析1Dx5-N二硫键的交联方式 | 第129-135页 |
| 5.4.2 半胱氨酸残基对1Dx5-N结构稳定性和表面疏水性的影响 | 第135-140页 |
| 5.4.3 1Dx5-N中半胱氨酸残基参与的其它类型共价交联反应 | 第140-142页 |
| 5.5 本章小结 | 第142-143页 |
| 参考文献 | 第143-147页 |
| 第六章 1Dx5-N不同位点半胱氨酸对面团结构和加工品质的影响 | 第147-164页 |
| 6.1 引言 | 第147页 |
| 6.2 材料与仪器 | 第147-148页 |
| 6.2.1 实验菌株与质粒 | 第147-148页 |
| 6.2.2 实验材料 | 第148页 |
| 6.3 实验方法 | 第148-152页 |
| 6.3.1 1Dx5-N表达及分离纯化 | 第148页 |
| 6.3.2 面团和面筋蛋白样品的制备 | 第148-149页 |
| 6.3.3 面团搅混实验 | 第149-150页 |
| 6.3.4 1Dx5-N及其突变体对面团流变性能的影响 | 第150页 |
| 6.3.5 分子排阻色谱(SEC) | 第150页 |
| 6.3.6 还原型SDS-PAGE和非还原型SDS-PAGE | 第150-151页 |
| 6.3.7 扫描电镜(SEM) | 第151页 |
| 6.3.8 傅里叶转换红外光谱(FT-IR) | 第151-152页 |
| 6.3.9 数据分析 | 第152页 |
| 6.4 结果与分析 | 第152-160页 |
| 6.4.1 1Dx5-N及其突变体对面团粉质特性参数和流变学性能的影响.. | 第152-154页 |
| 6.4.2 1Dx5-N及其突变体对面筋蛋白聚集体和二硫键形成的影响 | 第154-156页 |
| 6.4.3 1Dx5-N及其突变体对面团微观结构和面筋蛋白二级结构的影响 | 第156-160页 |
| 6.5 本章小结 | 第160-161页 |
| 参考文献 | 第161-164页 |
| 结论与展望 | 第164-167页 |
| 一、结论 | 第164-165页 |
| 二、论文的创新点 | 第165页 |
| 三、展望 | 第165-167页 |
| 附录 | 第167-171页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第171-172页 |
| 致谢 | 第172-173页 |
| 附件 | 第173页 |
