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发酵乳杆菌grx07发酵剂的制备及冻干保护机制的研究

摘要第2-4页
Abstract第4-5页
1 绪论第11-21页
    1.1 乳酸菌第11页
    1.2 发酵乳杆菌第11-13页
        1.2.1 发酵乳杆菌简介第11页
        1.2.2 发酵乳杆菌益生特性第11-13页
    1.3 乳酸菌高密度培养第13-15页
        1.3.1 高密度发酵培养基第13-14页
        1.3.2 乳酸菌高密度培养条件第14页
        1.3.3 乳酸菌高密度培养方法第14-15页
        1.3.4 发酵乳杆菌培养研究进展第15页
    1.4 乳酸菌真空冷冻干燥第15-18页
        1.4.1 乳酸菌冻干发酵剂研究进展第15-16页
        1.4.2 乳酸菌冻干生理损伤研究进展第16-17页
        1.4.3 冻干过程中影响乳酸菌活力的因素第17-18页
        1.4.4 冻干过程中存在的问题第18页
    1.5 研究方案第18-21页
        1.5.1 研究目的及意义第18-19页
        1.5.2 研究方法和试验设计第19-21页
2 水解脱脂乳培养基对乳杆菌grx07生长代谢特性的影响第21-30页
    2.1 实验材料与设备第21-22页
        2.1.1 主要药品及试剂第21页
        2.1.2 培养基第21页
        2.1.3 主要仪器及设备第21-22页
    2.2 实验方法第22-24页
        2.2.1 菌种的活化和培养第22页
        2.2.2 脱脂乳水解液的制备第22页
        2.2.3 活菌数测定第22页
        2.2.4 发酵液乳酸含量的测定第22页
        2.2.5 还原糖含量的测定第22-23页
        2.2.6 乳酸菌蛋白酶活力的测定第23页
        2.2.7 乳酸菌生长模型和产酸模型的建立第23-24页
        2.2.8 不同培养基乳酸菌生长对照实验第24页
        2.2.9 数据统计分析第24页
    2.3 结果与分析第24-29页
        2.3.1 脱脂乳水解度对乳杆菌grx07生长及代谢的影响第24-25页
        2.3.2 脱脂乳水解度对发酵液中残糖的影响第25页
        2.3.3 脱脂乳水解度对乳杆菌grx07蛋白酶活力的影响第25-26页
        2.3.4 脱脂乳水解度对乳杆菌grx07生长及产酸速率的影响第26-28页
        2.3.5 不同培养基对乳杆菌grx07生长的影响第28-29页
    2.4 本章小结第29-30页
3 高密度发酵工艺的优化第30-35页
    3.1 实验材料与设备第30页
        3.1.1 主要药品与试剂第30页
        3.1.2 培养基第30页
        3.1.3 主要仪器及设备第30页
    3.2 实验方法第30-31页
        3.2.1 活菌数测定第30页
        3.2.2 溶液中还原糖含量的测定第30页
        3.2.3 发酵液pH测定第30页
        3.2.4 气体及搅拌对乳杆菌grx07培养的影响第30页
        3.2.5 中和培养的优化第30-31页
        3.2.6 恒pH残糖反馈补料实验第31页
        3.2.7 补料液最适碳氮比的确定第31页
        3.2.8 补料培养与分批培养的对比第31页
        3.2.9 数据统计分析第31页
    3.3 结果与分析第31-34页
        3.3.1 气体及搅拌对乳杆菌grx07生长的影响第31-32页
        3.3.2 中和培养的优化第32页
        3.3.3 恒pH残糖反馈补料培养优化第32-33页
        3.3.4 补料液碳氮比的确定第33-34页
        3.3.5 补料培养与分批培养的对比第34页
    3.4 本章小结第34-35页
4 保护剂对乳杆菌grx07冻干损伤保护机制的研究第35-55页
    4.1 实验材料与设备第35页
        4.1.1 主要药品与试剂第35页
        4.1.2 主要仪器及设备第35页
    4.2 实验方法第35-41页
        4.2.1 离心条件的优化第35-36页
        4.2.2 乳酸菌冻干工艺第36页
        4.2.3 冻干保护剂的筛选第36-37页
        4.2.4 冻干保护剂优化试验设计第37页
        4.2.5 菌体存活率的测定第37-38页
        4.2.6 粗酶液的制备第38页
        4.2.7 β-半乳糖苷酶活力的测定第38-39页
        4.2.8 乳酸脱氢酶活力的测定第39页
        4.2.9 丙酮酸激酶活力的测定第39页
        4.2.10 己糖激酶活力的测定第39页
        4.2.11 ATP酶活力的测定第39页
        4.2.12 细胞膜流动性的测定第39页
        4.2.13 细胞膜完整性的测定第39-40页
        4.2.14 胞内Ca~(2+)离子含量的测定第40页
        4.2.15 数据统计分析第40-41页
    4.3 结果与分析第41-53页
        4.3.1 离心条件的优化第41页
        4.3.2 冻干保护剂的筛选第41-43页
        4.3.3 保护剂各成分添加量的优化第43-44页
        4.3.4 复合冻干保护剂的选择第44-48页
        4.3.5 不同保护剂对乳杆菌grx07 β-半乳糖苷酶活力的影响第48页
        4.3.6 不同保护剂对乳杆菌grx07乳酸脱氢酶酶活力的影响第48-49页
        4.3.7 不同保护剂对乳杆菌grx07丙酮酸酶活力的影响第49页
        4.3.8 不同保护剂对乳杆菌grx07己糖激酶活力的影响第49-50页
        4.3.9 不同保护剂对乳杆菌grx07 ATP酶活力的影响第50页
        4.3.10 不同保护剂对乳杆菌grx07细胞膜流动性的影响第50-51页
        4.3.11 不同保护剂对乳杆菌grx07细胞膜完整性的影响第51-52页
        4.3.12 不同保护剂对乳杆菌grx07胞内Ca~(2+)含量的影响第52-53页
    4.4 本章小结第53-55页
5 乳杆菌grx07预培养条件的优化第55-63页
    5.1 实验材料与设备第55页
        5.1.1 主要药品与试剂第55页
        5.1.2 主要仪器及设备第55页
    5.2 实验方法第55-56页
        5.2.1 预培养条件的优化第55页
        5.2.2 乳酸菌活菌数提高率的测定第55页
        5.2.3 相关酶活的测定第55页
        5.2.4 细胞膜相关特性的测定第55-56页
        5.2.5 数据统计分析第56页
    5.3 结果与分析第56-62页
        5.3.1 菌泥与保护剂混合比例对乳杆菌grx07提高率的影响第56页
        5.3.2 预培养温度对乳杆菌grx07提高率的影响第56-57页
        5.3.3 预培养时间对乳杆菌grx07提高率的影响第57-58页
        5.3.4 预培养条件旋转正交优化第58-59页
        5.3.5 预培养对冻干乳杆菌grx07 β-半乳糖苷酶活力的影响第59页
        5.3.6 预培养对冻干乳杆菌grx07乳酸脱氢酶活力的影响第59页
        5.3.7 预培养对冻干乳杆菌grx07ATP酶活力的影响第59-60页
        5.3.8 预培养对冻干乳杆菌grx07细胞膜流动性的影响第60页
        5.3.9 预培养对冻干乳杆菌grx07细胞膜完整性的影响第60-61页
        5.3.10 预培养对冻干乳杆菌grx07胞内Ca~(2+)浓度的影响第61-62页
    5.4 本章小结第62-63页
6 贮藏温度对发酵剂活力的影响第63-70页
    6.1 实验材料与设备第63页
        6.1.1 主要药品与试剂第63页
        6.1.2 主要仪器及设备第63页
    6.2 实验方法第63-64页
        6.2.1 冻干发酵剂的制备第63页
        6.2.2 活菌数的和存活率的计算第63页
        6.2.3 水分含量和水分活度的测定第63页
        6.2.4 乳酸菌发酵活力的测定第63-64页
        6.2.5 相关酶的测定第64页
        6.2.6 数据处理第64页
    6.3 实验结果与分析第64-69页
        6.3.1 贮藏温度对发酵剂活菌数的影响第64页
        6.3.2 贮藏温度对发酵剂水分活度的变化第64-65页
        6.3.3 贮藏温度对乳杆菌grx07发酵活力的影响第65-66页
        6.3.4 贮藏温度对乳杆菌grx07乳酸脱氢酶活力的影响第66-67页
        6.3.5 贮藏温度对乳杆菌grx07 β-半乳糖苷酶活力的影响第67页
        6.3.6 贮藏温度对乳杆菌grx07 ATP酶活力的影响第67-69页
    6.4 本章小结第69-70页
7 结论与展望第70-72页
    7.1 结论第70-71页
    7.2 展望第71-72页
参考文献第72-82页
致谢第82-83页
攻读学位期间发表的学术论文目录第83-84页

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