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抑制酿酒酵母生长发育的人类基因的筛选和分析

摘要第3-4页
Abstract第4页
第一章 绪论第7-13页
    1.1 酿酒酵母概述第7-10页
        1.1.1 酿酒酵母的生长发育第7页
        1.1.2 双倍体酿酒酵母的产孢过程第7-9页
        1.1.3 以酿酒酵母为模式生物研究人类生物学的方式第9-10页
    1.2 GatewayTM技术介绍第10-11页
    1.3 本论文的研究意义和要内容第11-13页
        1.3.1 本论文的研究意义第11页
        1.3.2 本论文的研究内容第11-13页
第二章 材料与方法第13-28页
    2.1 实验材料第13-20页
        2.1.1 菌株第13页
        2.1.2 质粒第13-14页
        2.1.3 引物第14-15页
        2.1.4 酶、试剂及主要耗材第15-16页
        2.1.5 主要仪器设备第16-17页
        2.1.6 培养基以及主要溶液的配制第17-20页
    2.2 实验方法第20-28页
        2.2.1 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备第20页
        2.2.2 重组质粒构建的通用方法第20-22页
        2.2.3 LR重组反应法构建表达载体(Expressionvector)第22-23页
        2.2.4 PCR介导的基因定点突变第23-24页
        2.2.5 酿酒酵母中质粒的转化方法第24页
        2.2.6 筛选方法第24-25页
        2.2.7 酿酒酵母生长的检测方法第25页
        2.2.8 酿酒酵母的液体产孢法及产孢率计算第25页
        2.2.9 荧光定位观察第25-26页
        2.2.10 酿酒酵母全蛋白的提取第26页
        2.2.11 蛋白质免疫印迹第26-27页
        2.2.12 酿酒酵母孢子细胞DNA量检测第27-28页
第三章 结果与讨论第28-45页
    3.1 抑制酿酒酵母营养生长的人类基因的研究第28-33页
        3.1.1 抑制酿酒酵母生长的人类基因的筛选与复验第28-29页
        3.1.2 抑制酿酒酵母生长的人类基因的生物学信息第29-30页
        3.1.3 候选基因表达产物在酿酒酵母中的定位观察和功能分析第30-32页
        3.1.4 小结第32-33页
    3.2 特异性抑制酿酒酵母产孢的人类基因的研究第33-45页
        3.2.1 特异性抑制酿酒酵母产孢的候选基因的验证第33-34页
        3.2.2 候选基因的表达产物在酿酒酵母中的定位分析第34-36页
        3.2.3 流式细胞术分析候选基因对酿酒酵母减数分裂的影响第36-39页
        3.2.4 IDO1、RAD1和UBE2D4显著抑制酿酒酵母产孢的原因分析第39-44页
        3.2.5 小结第44-45页
主要结论与展望第45-46页
    主要结论第45页
    展望第45-46页
致谢第46-47页
参考文献第47-51页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的文章第51页

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