摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
第一章 绪论 | 第7-13页 |
1.1 酿酒酵母概述 | 第7-10页 |
1.1.1 酿酒酵母的生长发育 | 第7页 |
1.1.2 双倍体酿酒酵母的产孢过程 | 第7-9页 |
1.1.3 以酿酒酵母为模式生物研究人类生物学的方式 | 第9-10页 |
1.2 GatewayTM技术介绍 | 第10-11页 |
1.3 本论文的研究意义和要内容 | 第11-13页 |
1.3.1 本论文的研究意义 | 第11页 |
1.3.2 本论文的研究内容 | 第11-13页 |
第二章 材料与方法 | 第13-28页 |
2.1 实验材料 | 第13-20页 |
2.1.1 菌株 | 第13页 |
2.1.2 质粒 | 第13-14页 |
2.1.3 引物 | 第14-15页 |
2.1.4 酶、试剂及主要耗材 | 第15-16页 |
2.1.5 主要仪器设备 | 第16-17页 |
2.1.6 培养基以及主要溶液的配制 | 第17-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-28页 |
2.2.1 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第20页 |
2.2.2 重组质粒构建的通用方法 | 第20-22页 |
2.2.3 LR重组反应法构建表达载体(Expressionvector) | 第22-23页 |
2.2.4 PCR介导的基因定点突变 | 第23-24页 |
2.2.5 酿酒酵母中质粒的转化方法 | 第24页 |
2.2.6 筛选方法 | 第24-25页 |
2.2.7 酿酒酵母生长的检测方法 | 第25页 |
2.2.8 酿酒酵母的液体产孢法及产孢率计算 | 第25页 |
2.2.9 荧光定位观察 | 第25-26页 |
2.2.10 酿酒酵母全蛋白的提取 | 第26页 |
2.2.11 蛋白质免疫印迹 | 第26-27页 |
2.2.12 酿酒酵母孢子细胞DNA量检测 | 第27-28页 |
第三章 结果与讨论 | 第28-45页 |
3.1 抑制酿酒酵母营养生长的人类基因的研究 | 第28-33页 |
3.1.1 抑制酿酒酵母生长的人类基因的筛选与复验 | 第28-29页 |
3.1.2 抑制酿酒酵母生长的人类基因的生物学信息 | 第29-30页 |
3.1.3 候选基因表达产物在酿酒酵母中的定位观察和功能分析 | 第30-32页 |
3.1.4 小结 | 第32-33页 |
3.2 特异性抑制酿酒酵母产孢的人类基因的研究 | 第33-45页 |
3.2.1 特异性抑制酿酒酵母产孢的候选基因的验证 | 第33-34页 |
3.2.2 候选基因的表达产物在酿酒酵母中的定位分析 | 第34-36页 |
3.2.3 流式细胞术分析候选基因对酿酒酵母减数分裂的影响 | 第36-39页 |
3.2.4 IDO1、RAD1和UBE2D4显著抑制酿酒酵母产孢的原因分析 | 第39-44页 |
3.2.5 小结 | 第44-45页 |
主要结论与展望 | 第45-46页 |
主要结论 | 第45页 |
展望 | 第45-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的文章 | 第51页 |