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青养蛋白抗氧化肽的分离纯化及胃肠道消化特性研究

摘要第8-9页
Abstract第9-10页
第一章 绪论第11-30页
    1.1 青养概述第11-12页
        1.1.1 青养简介第11页
        1.1.2 青养的营养价值第11-12页
    1.2 抗氧化肽的研究进展第12-20页
        1.2.1 抗氧化肽概述第12-14页
            1.2.1.1 内源性抗氧化肽第13页
            1.2.1.2 食源性蛋白的降解第13页
            1.2.1.3 化学合成法制备抗氧化肽第13-14页
        1.2.2 抗氧化肽的抗氧化作用机理第14-15页
        1.2.3 抗氧化活性测定方法第15-17页
            1.2.3.1 抑制脂类物质过氧化法第15-16页
            1.2.3.2 测定抗氧化剂清除自由基能力的方法第16-17页
            1.2.3.3 细胞实验第17页
            1.2.3.4 动物实验或人体实验第17页
        1.2.4 抗氧化肽的分离纯化方法研究第17-19页
            1.2.4.1 超滤法第17-18页
            1.2.4.2 离子交换色谱第18页
            1.2.4.3 凝胶色谱法第18页
            1.2.4.4 反相高效液相色谱(RP-HPLC)第18-19页
            1.2.4.5 其他分离方法第19页
        1.2.5 抗氧化肽的结构鉴定第19-20页
        1.2.6 抗氧化肽的应用前景第20页
    1.3 抗氧化肽的稳定性研究第20-21页
        1.3.1 抗氧化肽的体外稳定性研究第20-21页
        1.3.2 抗氧化肽的体内稳定性研究第21页
    1.4 研究意义和主要内容第21-23页
        1.4.1 研究意义第21-22页
        1.4.2 研究内容第22-23页
    参考文献第23-30页
第二章 青养蛋白抗氧化肽的制备及胃肠道消化研究第30-42页
    2.1 前言第30页
    2.2 材料与方法第30-34页
        2.2.1 材料第30页
        2.2.2 主要试剂第30-31页
        2.2.3 主要仪器第31-32页
        2.2.4 实验方法第32-34页
            2.2.4.1 酶解工艺流程[8]第32页
            2.2.4.2 模拟胃肠消化道酶系对青养多肽抗氧化活性的影响第32页
            2.2.4.3 蛋白质利用率的测定第32页
            2.2.4.4 水解度的测定[11]第32页
            2.2.4.5 肽分子量分布测定第32-33页
            2.2.4.6 氨基酸分析第33页
            2.2.4.7 抗氧化活性的测定第33页
                2.2.4.7.1 清除 DPPH 自由基能力的测定[12]第33页
                2.2.4.7.2 氧自由基吸收能力(ORAC)实验第33页
            2.2.4.8 数据统计与分析第33-34页
    2.3 结果与讨论第34-38页
        2.3.1 酶对蛋白质利用率、水解度和抗氧化活性的影响第34页
        2.3.2 最佳抗氧化活性水解物的氨基酸组成及营养评价第34-35页
        2.3.3 酶解产物分子量分布第35-36页
        2.3.4 模拟胃肠道消化酶解对青养蛋白肽抗氧化活性的影响第36-38页
            2.3.4.1 模拟胃肠道消化过程中青养多肽清除 DPPH·能力的变化第36-37页
            2.3.4.2 模拟胃肠道消化过程中青养多肽 ORAC 值的变化第37-38页
    2.4 本章小结第38-40页
    参考文献第40-42页
第三章 青养抗氧化肽的分离纯化及结构鉴定第42-61页
    3.1 前言第42-43页
    3.2 材料与方法第43-46页
        3.2.1 材料第43页
        3.2.2 主要试剂第43页
        3.2.3 主要仪器第43-44页
        3.2.4 实验方法第44-46页
            3.2.4.1 BCA 法测定蛋白浓度(96 孔板)第44页
            3.2.4.2 膜超滤法分离青养蛋白水解物(FPH)第44-45页
            3.2.4.3 离子交换色谱法分离 FPH第45页
            3.2.4.4 凝胶过滤色谱分离 FPH第45页
            3.2.4.5 反相高效液相色谱法(RP-HPLC)分离纯化 FPH第45-46页
            3.2.4.6 ESI-MS/MS 鉴定抗氧化肽第46页
            3.2.4.7 ORAC 值的测定第46页
            3.2.4.8 清除 DPPH·能力的测定方法第46页
            3.2.4.9 还原力的测定方法第46页
            3.2.4.10 数据统计与分析第46页
    3.3 结果与讨论第46-55页
        3.3.1 膜超滤法纯化 FPH第46-47页
        3.3.2 离子交换色谱法纯化 FPH第47-49页
        3.3.3 凝胶过滤色谱法纯化 FPH第49-50页
        3.3.4 反相-高效液相色谱法纯化 FPH第50-53页
        3.3.5 多肽氨基酸序列的鉴定第53-55页
    3.4 本章小结第55-57页
    参考文献第57-61页
第四章 不同分子量段青养蛋白抗氧化肽的胃肠道消化特性第61-77页
    4.1 前言第61-62页
    4.2 材料与方法第62-64页
        4.2.1 材料第62页
        4.2.2 主要试剂第62页
        4.2.3 主要仪器第62-63页
        4.2.4 实验方法第63-64页
            4.2.4.1 养蛋白水解物的制备第63页
            4.2.4.2 青养蛋白水解物的分离第63页
            4.2.4.3 胃肠道消化模拟第63页
            4.2.4.4 抗氧化活性的测定第63-64页
                4.2.4.4.1 氧自由基吸收能力(ORAC)测定第63页
                4.2.4.4.2 清除 DPPH 自由基能力测定第63页
                4.2.4.4.3 清除 ABTS+自由基能力测定第63-64页
                4.2.4.4.4 还原力的测定第64页
            4.2.4.5 分子量分布测定第64页
            4.2.4.6 游离氨基酸测定-磺基水杨酸法第64页
            4.2.4.7 高效液相色谱法分析第64页
            4.2.4.8 数据统计与分析第64页
    4.3 结果与讨论第64-75页
        4.3.1 不同分子量肽段青养抗氧化肽的制备第64-65页
        4.3.2 不同分子量肽段的特性第65-66页
            4.3.2.1 不同分子量肽段的分子量分布第65-66页
            4.3.2.2 不同分子量肽段的抗氧化活性第66页
        4.3.3 模拟体外消化过程中分子特性的变化第66-71页
            4.3.3.1 模拟体外消化过程中分子量分布的变化第67-68页
            4.3.3.2 模拟体外消化过程中游离氨酸的释放变化第68-69页
            4.3.3.3 模拟体外消化过程中 HPLC 谱图的变化第69-71页
        4.3.4 体外模拟胃肠道消化后组分 B 和 S 的抗氧化活性变化第71-75页
            4.3.4.1 模拟胃肠道消化过程中组分 B 和 S 清除 DPPH 自由基能力变化第71-72页
            4.3.4.2 模拟体外胃肠道消化过程中清除 ABTS·+能力变化第72-73页
            4.3.4.3 模拟体外胃肠道消化过程中 ORAC 值得变化第73-74页
            4.3.4.4 模拟体外胃肠道消化过程中还原力的变化第74-75页
    4.4 本章小结第75-77页
参考文献第77-78页
结论与展望第78-80页
    结论第78页
    本论文的主要创新点第78-79页
    展望第79-80页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第80-83页
致谢第83-84页
附件第84页

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