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酒酒球菌不同菌株16S rDNA PCR-RFLP分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 文献综述第12-32页
   ·葡萄酒苹果酸-乳酸菌研究第12-16页
     ·葡萄酒乳酸菌的种类第12-13页
     ·发酵过程中葡萄酒乳酸菌种类的变化第13-14页
     ·酒球菌属的建立第14-15页
     ·酒酒球菌的特征第15-16页
   ·葡萄酒中的苹果酸-乳酸发酵第16-21页
     ·苹果酸-乳酸发酵的作用第16-19页
     ·葡萄酒乳酸菌的物质代谢第19-21页
   ·影响葡萄酒乳酸菌生存与生长的因素第21-25页
     ·葡萄酒的理化特性与组成第22-24页
     ·酿造工艺的影响第24页
     ·微生物间的相互关系第24-25页
   ·葡萄酒乳酸菌的分离第25页
     ·苹果酸-乳酸菌的分离方法第25页
     ·酒酒球菌的分离第25页
   ·乳酸菌研究中常用的分子生物学方法第25-28页
     ·16S rRNA 序列分析第25-26页
     ·随机扩增多态DNA 技术第26页
     ·限制性片段长度多态性分析第26-27页
     ·扩增片段长度多态性第27页
     ·全细胞可溶性蛋白电泳第27页
     ·核酸杂交第27-28页
   ·酒酒球菌分子研究进展第28-30页
     ·基于种水平的研究第28-29页
     ·基于菌株水平的研究第29-30页
   ·试验目的及意义第30-32页
第二章 材料与方法第32-38页
   ·试验材料第32-34页
     ·试验菌株第32页
     ·培养基第32-33页
     ·主要试剂及来源第33页
     ·主要仪器和设备第33-34页
   ·方法第34-38页
     ·菌种的活化、分离第34页
     ·乳酸菌的初步鉴定第34页
     ·生长曲线绘制第34-35页
     ·酒酒球菌基因组DNA 提取第35页
     ·酒酒球菌16S rRNA 特异引物第35-36页
     ·特异引物反应体系的建立和优化第36页
     ·特异引物的特异性验证和未知菌株的鉴定第36页
     ·PCR 产物限制性内切酶分析第36-37页
     ·不同谱型菌株对pH、SO_2、酒精单因子抗性实验第37-38页
第三章 结果与分析第38-52页
   ·菌株的形态学初步鉴定第38-39页
     ·培养特征第38页
     ·其他形态学特征第38-39页
   ·菌株生长曲线的绘制第39页
   ·基因组DNA 的提取及纯度检测分析第39-42页
   ·PCR 反应体系影响因素的优化第42-44页
     ·Taq 酶的优化第42页
     ·三磷酸脱氧核苷酸(dNTP)浓度的影响第42-43页
     ·不同Mg~(2+)浓度对PCR 扩增结果的影响第43页
     ·引物浓度对酒酒球菌PCR 反应体系的影响第43页
     ·DNA 模板量的影响第43-44页
   ·特异引物的验证及菌株的鉴定第44-46页
   ·PCR 产物酶切结果第46-47页
     ·数据分析第47页
   ·不同谱型菌株对pH、SO_2、酒精单因子抗性实验第47-52页
     ·不同谱型菌株对酒精的抗性第48-49页
     ·不同谱型菌株对pH 的抗性第49-50页
     ·不同谱型菌株对SO_2 的抗性第50-52页
第四章 讨论第52-55页
   ·株菌的分离、培养第52页
   ·基因组提取方法的选择第52页
   ·PCR 扩增因素的优化第52-53页
   ·特异引物的鉴定第53页
   ·酶切及酿酒适应性分析第53-55页
第五章 结论第55-56页
参考文献第56-62页
致谢第62-63页
作者简介第63页

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