| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-7页 |
| 缩略语表 | 第8-13页 |
| 第1章 前言 | 第13-23页 |
| 1.1 花生过敏 | 第13-14页 |
| 1.2 花生主要过敏原Ara h 2 | 第14页 |
| 1.3 加工对花生蛋白性质的影响 | 第14-17页 |
| 1.3.1 致敏性 | 第14-15页 |
| 1.3.2 分子的聚集特性 | 第15-16页 |
| 1.3.3 消化吸收性 | 第16-17页 |
| 1.3.4 其它性质 | 第17页 |
| 1.4 转谷氨酰胺酶改性过敏原蛋白 | 第17-20页 |
| 1.4.1 MTGase催化机理 | 第18-19页 |
| 1.4.2 交联反应 | 第19页 |
| 1.4.3 脱酰胺作用 | 第19-20页 |
| 1.5 研究意义和研究内容 | 第20-23页 |
| 1.5.1 研究意义 | 第20-21页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第21-23页 |
| 第2章 MTGase催化Ara h 2反应体系的研究 | 第23-39页 |
| 2.1 前言 | 第23页 |
| 2.2 材料与方法 | 第23-29页 |
| 2.2.1 试剂与材料 | 第23-24页 |
| 2.2.2 主要仪器设备 | 第24页 |
| 2.2.3 溶液的配制 | 第24-25页 |
| 2.2.4 花生蛋白Ara h 2的制备 | 第25页 |
| 2.2.5 转谷氨酰胺酶液配制 | 第25页 |
| 2.2.6 酶催化还原前后Ara h 2反应 | 第25页 |
| 2.2.7 SDS-PAGE电泳实验 | 第25-26页 |
| 2.2.8 Native-PAGE电泳实验 | 第26页 |
| 2.2.9 Tricine-SDS-PAGE电泳实验 | 第26-28页 |
| 2.2.10 SEC液相色谱 | 第28页 |
| 2.2.11 酶催化反应过程中pH测定 | 第28页 |
| 2.2.12 酶催化反应中游离氨的测定 | 第28-29页 |
| 2.3 结果分析 | 第29-37页 |
| 2.3.1 花生过敏原Ara h 2的制备 | 第29页 |
| 2.3.2 电泳法鉴定MTGase催化Ara h 2 产物 | 第29-31页 |
| 2.3.3 酶催化产物胰蛋白酶酶解分析 | 第31-35页 |
| 2.3.4 MTGase催化Ara h 2脱酰胺作用 | 第35-37页 |
| 2.4 讨论 | 第37-38页 |
| 2.4.1 MTGase催化Ara h 2的外交联反应 | 第37页 |
| 2.4.2 MTGase催化Ara h 2的内交联反应 | 第37-38页 |
| 2.4.3 MTGase催化Ara h 2的脱酰胺作用 | 第38页 |
| 2.5 本章小结 | 第38-39页 |
| 第3章 不同反应条件对反应体系的影响 | 第39-50页 |
| 3.1 前言 | 第39页 |
| 3.2 材料与方法 | 第39-41页 |
| 3.2.1 试剂材料 | 第39页 |
| 3.2.2 主要仪器设备 | 第39-40页 |
| 3.2.3 溶液的配制 | 第40页 |
| 3.2.4 不同蛋白浓度对反应的影响 | 第40页 |
| 3.2.5 不同反应温度对反应的影响 | 第40-41页 |
| 3.2.6 不同还原程度对反应的影响 | 第41页 |
| 3.2.7 激光粒度仪粒度分析 | 第41页 |
| 3.3 结果分析 | 第41-48页 |
| 3.3.1 不同蛋白浓度对还原Ara h 2反应的影响 | 第41-44页 |
| 3.3.2 不同蛋白浓度对天然Ara h 2反应的影响 | 第44-45页 |
| 3.3.3 不同温度对天然Ara h 2反应的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.4 不同还原程度对还原Ara h 2反应的影响 | 第46-48页 |
| 3.4 讨论 | 第48-49页 |
| 3.4.1 蛋白浓度对酶催化反应的影响 | 第48页 |
| 3.4.2 反应温度对天然Ara h 2反应的影响 | 第48页 |
| 3.4.3 还原程度对还原Ara h 2反应的影响 | 第48-49页 |
| 3.5 本章小结 | 第49-50页 |
| 第4章 酶催化反应对Ara h 2结构的影响 | 第50-61页 |
| 4.1 前言 | 第50页 |
| 4.2 材料与方法 | 第50-53页 |
| 4.2.1 试剂材料 | 第50-51页 |
| 4.2.2 主要仪器设备 | 第51页 |
| 4.2.3 溶液的配制 | 第51页 |
| 4.2.4 还原蛋白酶催化产物的分离 | 第51页 |
| 4.2.5 内交联产物交联位点分析 | 第51-52页 |
| 4.2.6 MTGase催化产物二级结构变化 | 第52页 |
| 4.2.7 MTGase催化产物三级结构变化 | 第52页 |
| 4.2.8 MTGase催化产物表面疏水性变化 | 第52-53页 |
| 4.3 结果分析 | 第53-59页 |
| 4.3.1 交联产物的分离 | 第53-54页 |
| 4.3.2 交联位点的分析 | 第54-55页 |
| 4.3.3 交联蛋白分离产物二级结构的变化 | 第55-57页 |
| 4.3.4 交联蛋白分离产物紫外吸收的变化 | 第57-58页 |
| 4.3.5 Ara h 2加工前后表面疏水性的变化 | 第58-59页 |
| 4.4 讨论 | 第59-60页 |
| 4.4.1 酶催化的还原Ara h 2交联产物的分离 | 第59页 |
| 4.4.2 交联位点 | 第59-60页 |
| 4.4.3 MTGase酶催化对Ara h 2结构的影响 | 第60页 |
| 4.5 本章小结 | 第60-61页 |
| 第5章 MTGase酶催化对Arah 2消化性及致敏性的影响 | 第61-78页 |
| 5.1 引言 | 第61页 |
| 5.2 材料与方法 | 第61-63页 |
| 5.2.1 试剂材料 | 第61-62页 |
| 5.2.2 主要仪器设备 | 第62页 |
| 5.2.3 溶液配制 | 第62-63页 |
| 5.3 实验方法 | 第63-66页 |
| 5.3.1 体外模拟消化 | 第63-64页 |
| 5.3.2 体外IgG结合能力评估 | 第64-65页 |
| 5.3.3 体外IgE结合能力评估 | 第65-66页 |
| 5.4 结果分析 | 第66-74页 |
| 5.4.1 酶催化还原前后蛋白模拟胃消化分析 | 第66-68页 |
| 5.4.2 酶催化还原前后蛋白模拟胃肠消化分析 | 第68-69页 |
| 5.4.3 体外IgG结合能力评估 | 第69-73页 |
| 5.4.4 体外IgE结合能力评估 | 第73-74页 |
| 5.5 讨论 | 第74-77页 |
| 5.5.1 酶催化对Ara h 2胃消化性的影响 | 第74-75页 |
| 5.5.2 酶催化对Ara h 2胃肠消化性的影响 | 第75-76页 |
| 5.5.3 酶催化对Ara h 2抗原性及潜在致敏性的影响 | 第76-77页 |
| 5.6 本章小结 | 第77-78页 |
| 第6章 结论与展望 | 第78-80页 |
| 6.1 结论 | 第78-79页 |
| 6.2 创新点 | 第79页 |
| 6.3 展望 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-87页 |
| 攻读学位期间研究成果 | 第87页 |
