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中国食源性副溶血性弧菌遗传多样性分析与冷胁迫研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
第一章 绪论第15-29页
    1.1 副溶血性弧菌的生物学特性第15页
    1.2 副溶血性弧菌检测方法进展第15-17页
    1.3 副溶血性弧菌的遗传特征第17-21页
        1.3.1 副溶血性弧菌毒力因子第17-18页
        1.3.2 副溶血性弧菌血清型第18-19页
        1.3.3 副溶血性弧菌抗药性第19-20页
        1.3.4 副溶血性弧菌分子溯源研究第20-21页
    1.4 副溶血性弧菌的组学研究第21-24页
        1.4.1 副溶血性弧菌基因组学第21-22页
        1.4.2 副溶血性弧菌转录组学第22-23页
        1.4.3 副溶血性弧菌蛋白组学第23-24页
    1.5 副溶血性弧菌的低温诱导第24-25页
    1.6 本论文研究目的、意义和主要内容第25-29页
        1.6.1 本论文研究目的和意义第26页
        1.6.2 本论文研究内容第26-28页
        1.6.3 本论文技术路线第28-29页
第二章 全国食品中副溶血性弧菌分布规律研究第29-45页
    2.1 材料第30页
        2.1.1 主要仪器第30页
        2.1.2 主要培养基与试剂第30页
    2.2 方法第30-33页
        2.2.1 样品采集第30-31页
        2.2.2 样品定性和定量分析第31-33页
            2.2.2.1 样品制备第31页
            2.2.2.2 检测方法第31-32页
            2.2.2.3 菌株分离第32-33页
            2.2.2.4 菌株鉴定第33页
            2.2.2.5 保存菌株第33页
            2.2.2.6 报告结果第33页
            2.2.2.7 数据分析第33页
    2.3 结果第33-41页
        2.3.1 副溶血性弧菌总体污染情况第33-39页
            2.3.1.1 副溶血性弧菌污染程度第34-35页
            2.3.1.2 各城市间副溶血性弧菌的污染情况分析第35-39页
        2.3.2 副溶血性弧菌在熟食和水产品中的污染情况第39页
        2.3.3 超市和集贸样品中副溶血性弧菌污染情况第39-41页
    2.4 讨论第41-43页
    2.5 本章小结第43-45页
第三章 熟食中副溶血性弧菌遗传多样性第45-58页
    3.1 材料第46-47页
        3.1.1 菌株及培养条件第46页
        3.1.2 主要仪器第46-47页
        3.1.3 主要试剂第47页
    3.2 方法第47-50页
        3.2.1 熟食中副溶血性弧菌分离及鉴定第47页
        3.2.2 抗生素敏感性试验第47-48页
        3.2.3 毒力基因tdh、trh检测第48页
        3.2.4 多重PCR分析血清型第48页
        3.2.5 ERIC-PCR分析第48-49页
        3.2.6 MLST多态性分析第49-50页
    3.3 结果第50-54页
        3.3.1 抗生素敏感性分析第50-51页
        3.3.2 毒力基因检测结果第51页
        3.3.3 血清型结果分析第51-52页
        3.3.4 ERIC-PCR分型第52页
        3.3.5 MLST分型第52-54页
    3.4 讨论第54-57页
    3.5 本章小结第57-58页
第四章 华南地区水产品副溶血性弧菌风险识别与遗传多样性第58-68页
    4.1 材料第59-60页
        4.1.1 菌株及培养条件第59页
        4.1.2 主要仪器第59页
        4.1.3 主要试剂第59-60页
    4.2 方法第60-61页
        4.2.1 水产品样品采集,副溶血性弧菌分离及鉴定第60页
        4.2.2 毒力基因检测第60页
        4.2.3 血清型分析第60页
        4.2.4 ERIC-PCR分型第60页
        4.2.5 抗生素敏感性试验第60-61页
    4.3 结果第61-64页
        4.3.1 华南地区水产品中副溶血性弧菌的污染率与污染水平第61页
        4.3.2 毒力基因分析第61-62页
        4.3.3 血清型分析第62页
        4.3.4 ERIC-PCR分型第62-64页
        4.3.5 抗生素敏感性结果第64页
    4.4 讨论第64-66页
    4.5 本章小结第66-68页
第五章 副溶血性弧菌基因组学研究第68-83页
    5.1 材料第68-70页
        5.1.1 菌株及培养条件第69页
        5.1.2 主要仪器第69-70页
        5.1.3 主要试剂第70页
    5.2 方法第70-72页
        5.2.0 基因组DNA提取第71页
        5.2.1 基因组文库构建、测序与组装第71页
        5.2.2 基因组注释与泛基因组分析第71页
        5.2.3 比较基因组分析毒力基因和抗生素抗性基因第71-72页
        5.2.4 CRISPR-Cas系统与噬菌体分析第72页
        5.2.5 生物膜形成相关蛋白分析第72页
    5.3 结果第72-79页
        5.3.1 副溶血性弧菌的基因组特点第72-75页
        5.3.2 毒力基因和抗性基因分析结果第75-76页
        5.3.3 CRISPR-Cas和噬菌体分析结果第76-78页
        5.3.4 生物膜形成相关蛋白比较结果第78-79页
    5.4 讨论第79-81页
    5.5 本章小结第81-83页
第六章 冷胁迫下副溶血性弧菌转录组与蛋白组研究第83-107页
    6.1 材料第83-84页
        6.1.1 菌株及培养条件第83-84页
        6.1.2 主要仪器第84页
        6.1.3 主要试剂第84页
    6.2 方法第84-90页
        6.2.1 转录组测序第84-85页
        6.2.2 转录组结果分析第85-86页
            6.2.2.1 测序结果的产量统计、序列组装及功能注释第86页
            6.2.2.2 Unigene的GO分析和基因代谢通路分析第86页
            6.2.2.3 差异表达基因的确认及其GO分析、基因代谢通路分析第86页
        6.2.3 iTRAQ分析蛋白质组第86-88页
            6.2.3.1 蛋白提取及iTRAQ实验第87页
            6.2.3.2 质谱分析第87-88页
        6.2.4 蛋白质组结果分析第88-89页
            6.2.4.1 蛋白质的鉴定及定量第88-89页
        6.2.5 转录组与蛋白组联合分析第89页
        6.2.6 荧光定量PCR(qRT-PCR)验证第89-90页
        6.2.7 脂肪酸测定第90页
        6.2.8 生长曲线测定第90页
    6.3 结果第90-104页
        6.3.1 冷诱导下副溶血性弧菌的转录组结果第90-97页
            6.3.1.1 转录组测序结果评估第90-92页
            6.3.1.2 基因表达结果分析第92-93页
            6.3.1.3 差异基因结果分析第93-97页
        6.3.2 冷诱导下副溶血性弧菌的蛋白组结果第97-99页
        6.3.3 冷诱导下副溶血性弧菌转录组与蛋白组联合分析结果第99-102页
        6.3.4 丙酮酸盐降低副溶血性弧菌的低温适应第102-104页
    6.4 讨论第104-105页
    6.5 本章小结第105-107页
结论与展望第107-111页
参考文献第111-127页
附录第127-156页
攻读博士论文取得的研究成果第156-158页
致谢第158-159页
附件第159页

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