| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-24页 |
| ·胆盐水解酶的研究现状 | 第10-15页 |
| ·胆盐水解酶概述 | 第10页 |
| ·乳酸菌中胆盐水解酶的性质 | 第10-11页 |
| ·胆盐水解酶的功能 | 第11-12页 |
| ·胆盐水解酶对宿主的影响 | 第12-14页 |
| ·BSH 编码基因的背景研究及序列分析 | 第14-15页 |
| ·乳酸菌食品级基因表达系统的研究进展 | 第15-21页 |
| ·食品级基因表达系统基本要求 | 第15-16页 |
| ·乳酸菌作为基因工程受体菌的优点 | 第16页 |
| ·乳酸菌表达系统的诱导物 | 第16-17页 |
| ·乳酸菌基因表达系统的筛选标记 | 第17-18页 |
| ·食品级表达调控因子 | 第18-19页 |
| ·乳酸乳球菌基因表达载体 | 第19-20页 |
| ·乳酸菌食品级基因表达系统的特点 | 第20-21页 |
| ·乳酸菌口服安全性 | 第21-22页 |
| ·乳酸菌对免疫功能的调节作用 | 第21-22页 |
| ·提供营养促进生长 | 第22页 |
| ·抗菌功能 | 第22页 |
| ·抗肿瘤作用 | 第22页 |
| ·乳酸菌食品级基因表达系统的应用前景与展望 | 第22-24页 |
| 第二章 BSH 基因的人工合成及原核表达系统的构建 | 第24-40页 |
| ·材料与仪器 | 第24-27页 |
| ·实验菌株、质粒以及引物 | 第24页 |
| ·主要试剂与工具酶 | 第24页 |
| ·培养基及主要溶剂配制 | 第24-27页 |
| ·仪器与设备 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-34页 |
| ·BSH 基因的扩增 | 第27-28页 |
| ·BSH 基因的克隆 | 第28-29页 |
| ·重组阳性克隆 pMD18-BSH 的筛选鉴定 | 第29-30页 |
| ·构建重组表达质粒 pNZ8148-BSH | 第30-32页 |
| ·重组阳性克隆子 pNZ8148-BSH/NZ9000 的筛选鉴定 | 第32页 |
| ·重组质粒 pNZ8148-BSH 在乳酸乳球菌 NZ9000 中诱导表达 | 第32页 |
| ·表达产物 SDS-PAGE 分析、纯化结果 | 第32-33页 |
| ·乳酸乳球菌 NZ9000 表达胆盐水解酶免疫反应鉴定 (Western-blotting ) | 第33页 |
| ·胆盐水解酶活性检测 | 第33-34页 |
| ·实验结果 | 第34-40页 |
| ·胆盐水解酶基因 PCR 扩增产物的鉴定 | 第34页 |
| ·BSH 基因的克隆及 PCR 鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组克隆质粒的酶切鉴定结果 | 第35-36页 |
| ·重组克隆质粒的测序鉴定结果 | 第36页 |
| ·重组表达质粒的 PCR 鉴定 | 第36页 |
| ·重组表达质粒的酶切鉴定结果 | 第36-37页 |
| ·表达产物的 SDS-PAGE 鉴定、纯化结果 | 第37-38页 |
| ·表达产物的 Western blot 鉴定结果 | 第38页 |
| ·表达产物活性检测 | 第38-40页 |
| 第三章 讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 结论与展望 | 第42-43页 |
| ·结论 | 第42页 |
| ·创新点 | 第42页 |
| ·展望 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 附录 | 第53-54页 |
| 作者简历 | 第54页 |
