| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 第1章 引言 | 第12-20页 |
| 1.1 茶叶研究现状 | 第12-13页 |
| 1.2 茶汤作用机制研究新视角 | 第13-14页 |
| 1.3 茶叶中相关蛋白质的研究现状 | 第14-16页 |
| 1.3.1 糖蛋白 | 第14-15页 |
| 1.3.2 多酚氧化酶 | 第15-16页 |
| 1.4 蛋白质纳米颗粒自组装行为 | 第16-17页 |
| 1.5 本课题的研究目的和意义 | 第17-18页 |
| 1.6 本课题的研究内容 | 第18-20页 |
| 第2章 正山小种茶叶中水溶性热稳定蛋白确定及提取研究 | 第20-44页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第20-30页 |
| 2.2.0 研究材料 | 第20页 |
| 2.2.1 主要试剂表 | 第20-21页 |
| 2.2.2 主要仪器与设备表 | 第21-22页 |
| 2.2.3 正山小种成品茶茶汤制备方法 | 第22页 |
| 2.2.4 超滤分离正山小种茶汤 | 第22-23页 |
| 2.2.5 正山小种鲜叶蛋白质的提取 | 第23页 |
| 2.2.6 正山小种鲜叶蛋白质提取条件的优化 | 第23-25页 |
| 2.2.6.1 提取缓冲液体系的选择 | 第23-24页 |
| 2.2.6.2 不同pH缓冲液对鲜叶蛋白提取的影响 | 第24页 |
| 2.2.6.3 不同料液比对鲜叶蛋白提取的影响 | 第24页 |
| 2.2.6.4 不同PVPP添加量对鲜叶蛋白提取的影响 | 第24-25页 |
| 2.2.6.5 不同尿素添加量对鲜叶蛋白提取的影响 | 第25页 |
| 2.2.7 微纳米颗粒粒径分布—动态光散射技术 | 第25-26页 |
| 2.2.8 微纳米颗粒稳定性测定—Zeta电位 | 第26页 |
| 2.2.9 蛋白质定量检测 | 第26-29页 |
| 2.2.9.1 蛋白质分子量鉴定—SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第26-28页 |
| 2.2.9.2 蛋白质含量测定—福林酚法 | 第28-29页 |
| 2.2.10 统计与分析方法 | 第29-30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-42页 |
| 2.3.1 正山小种茶汤中微纳米颗粒性质 | 第30-31页 |
| 2.3.2 正山小种茶汤电泳图 | 第31-32页 |
| 2.3.3 正山小种茶汤超滤截留液、滤过液电泳图 | 第32-33页 |
| 2.3.4 正山小种鲜叶蛋白质电泳图 | 第33-34页 |
| 2.3.5 正山小种鲜叶中粗蛋白提取条件优化 | 第34-42页 |
| 2.3.5.1 提取缓冲液体系对鲜叶蛋白质提取的影响 | 第35-36页 |
| 2.3.5.2 提取缓冲液pH对鲜叶蛋白质提取的影响 | 第36-37页 |
| 2.3.5.3 料液比对鲜叶蛋白质提取的影响 | 第37-38页 |
| 2.3.5.4 PVPP添加量对鲜叶蛋白质提取的影响 | 第38-40页 |
| 2.3.5.5 尿素添加量对鲜叶蛋白质提取的影响 | 第40-42页 |
| 2.3.6 正山小种鲜叶蛋白粗提液的制备 | 第42页 |
| 2.4 本章小结 | 第42-44页 |
| 第3章 正山小种茶叶水溶性热稳定蛋白的分离纯化及其在茶汤中状态的研究 | 第44-63页 |
| 3.1 引言 | 第44页 |
| 3.2 材料与方法 | 第44-50页 |
| 3.2.1 研究材料 | 第44页 |
| 3.2.2 主要试剂表 | 第44页 |
| 3.2.3 主要仪器与设备表 | 第44-45页 |
| 3.2.4 沉淀分离 | 第45-47页 |
| 3.2.4.1 硫酸铵沉降 | 第45-46页 |
| 3.2.4.2 乙醇沉降 | 第46页 |
| 3.2.4.3 透析 | 第46-47页 |
| 3.2.5 层析分离 | 第47-49页 |
| 3.2.5.1 正山小种鲜叶蛋白分离纯化-UNOsphere Q阴离子交换色谱 | 第47-48页 |
| 3.2.5.2 正山小种茶汤蛋白分离纯化—UNOsphere Q阴离子交换色谱 | 第48页 |
| 3.2.5.3 正山小种茶汤截留组分蛋白分离纯化—UNOsphere Q阴离子交换色谱 | 第48-49页 |
| 3.2.6 蛋白质定量检测 | 第49页 |
| 3.2.6.1 蛋白质分子量鉴定—SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第49页 |
| 3.2.6.2 蛋白质含量测定—福林酚法 | 第49页 |
| 3.2.7 多酚氧化酶活性测定 | 第49-50页 |
| 3.2.8 统计与分析方法 | 第50页 |
| 3.3 结果与分析 | 第50-61页 |
| 3.3.1 正山小种鲜叶粗提液的沉淀分离 | 第50-52页 |
| 3.3.1.1 硫酸铵分级沉降 | 第50-51页 |
| 3.3.1.2 乙醇分级沉降 | 第51-52页 |
| 3.3.2 正山小种鲜叶蛋白的分离纯化 | 第52-56页 |
| 3.3.3 水溶性热稳定蛋白在茶汤中状态的研究 | 第56-61页 |
| 3.3.3.1 水溶性热稳定蛋白在正山小种成品茶茶汤中状态的研究 | 第56-58页 |
| 3.3.3.2 水溶性热稳定蛋白在正山小种成品茶茶汤颗粒中状态的研究 | 第58-61页 |
| 3.4 本章小结 | 第61-63页 |
| 第4章 正山小种蛋白表征、酶学性质研究及微纳米颗粒自组装的初步探索 | 第63-85页 |
| 4.1 引言 | 第63页 |
| 4.2 材料与方法 | 第63-69页 |
| 4.2.1 材料与试剂 | 第63页 |
| 4.2.2 主要仪器与设备 | 第63-64页 |
| 4.2.3 蛋白的浓缩—超滤 | 第64页 |
| 4.2.4 糖蛋白的鉴定—过碘酸-希夫(periodic acid-Schiff stain,PAS)染色法 | 第64-65页 |
| 4.2.5 蛋白质等电点的测定—等电聚焦 | 第65-66页 |
| 4.2.6 多酚氧化酶酶学性质的探究 | 第66-67页 |
| 4.2.6.1 多酚氧化酶活性测定 | 第66页 |
| 4.2.6.2 多酚氧化酶活性的最适温度 | 第66页 |
| 4.2.6.3 多酚氧化酶活性的最适pH | 第66-67页 |
| 4.2.6.4 Cu~(2+)对多酚氧化酶活性的作用 | 第67页 |
| 4.2.6.5 抑制剂对多酚氧化酶活性的作用 | 第67页 |
| 4.2.6.6 多酚氧化酶动力学实验 | 第67页 |
| 4.2.7 观察微纳米颗粒形状—透射电镜技术 | 第67-68页 |
| 4.2.8 蛋白质微纳米颗粒自组装初步探索 | 第68-69页 |
| 4.2.8.1 微纳米颗粒粒径分布—动态光散射 | 第68页 |
| 4.2.8.2 微纳米颗粒稳定性测定—Zeta电位 | 第68页 |
| 4.2.8.3 溶液pH和时间、温度对P66蛋白聚集的影响 | 第68-69页 |
| 4.2.9 统计与分析方法 | 第69页 |
| 4.3 结果与分析 | 第69-84页 |
| 4.3.1 正山小种鲜叶蛋白的超滤浓缩 | 第69-70页 |
| 4.3.2 正山小种鲜叶糖蛋白的鉴定 | 第70-73页 |
| 4.3.3 正山小种鲜叶蛋白等电聚焦 | 第73-74页 |
| 4.3.4 正山小种鲜叶蛋白多酚氧化酶活力的检测 | 第74-75页 |
| 4.3.5 正山小种鲜叶蛋白多酚氧化酶性质研究 | 第75-80页 |
| 4.3.5.1 正山小种鲜叶蛋白多酚氧化酶反应的最适温度 | 第75-76页 |
| 4.3.5.2 正山小种鲜叶蛋白多酚氧化酶反应的最适pH | 第76-77页 |
| 4.3.5.3 Cu~(2+)对正山小种鲜叶蛋白多酚氧化酶反应的影响 | 第77-78页 |
| 4.3.5.4 抑制剂对正山小种鲜叶蛋白多酚氧化酶反应的作用 | 第78-79页 |
| 4.3.5.5 正山小种鲜叶蛋白多酚氧化酶动力学参数 | 第79-80页 |
| 4.3.6 正山小种鲜叶蛋白水溶液的透射电镜观察 | 第80页 |
| 4.3.7 正山小种鲜叶蛋白聚集行为的研究 | 第80-83页 |
| 4.3.7.1 选择最适溶液pH | 第81页 |
| 4.3.7.2 选择最适恒温时间 | 第81-83页 |
| 4.3.8 正山小种鲜叶蛋白微纳米颗粒电镜观察 | 第83-84页 |
| 4.4 本章小结 | 第84-85页 |
| 第五章 主要研究结论与展望 | 第85-87页 |
| 5.1 主要研究结论 | 第85-86页 |
| 5.2 研究展望 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
