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解淀粉芽孢杆菌Y-32-1产细菌素的研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-12页
符号说明第12-13页
前言第13-14页
第一章 文献综述第14-28页
   ·细菌素的分类第14-16页
     ·羊毛硫细菌素(1antibiotics)第14-15页
     ·小分子热稳定的非修饰肽(small heat-stable peptide,SHSP)第15页
     ·热不稳定性大分子蛋白质(1arge heat-labile protein,LHLP)第15页
     ·蛋白复合体(Protein complexes)第15-16页
   ·细菌素的作用机制第16页
   ·细菌素与抗生素的区别第16-18页
   ·细菌素的产生菌第18-24页
     ·芽孢杆菌细菌素第18-20页
       ·枯草杆菌素(subtilin)第18-19页
       ·蜡状芽孢杆菌细菌素第19页
       ·凝乳芽孢杆菌细菌素第19页
       ·巨大芽孢杆菌细菌素第19-20页
       ·地衣芽孢杆菌细菌素第20页
     ·丙酸菌细菌素第20-22页
     ·变链素第22页
     ·葡萄球菌素第22-23页
     ·类细菌素第23-24页
   ·细菌素的分离纯化方法第24-26页
   ·细菌素的应用第26-27页
     ·细菌素在食品上的应用第26页
     ·细菌素在生物农药上的应用第26页
     ·细菌素在饲料上的应用第26页
     ·细菌素在医药卫生上的应用第26-27页
   ·本课题的研究意义及前景第27-28页
第二章 高产细菌素菌株的筛选、鉴定及其所产细菌素性质的初步研究第28-44页
   ·实验材料第28-29页
     ·菌株来源第28页
     ·供试指示菌株第28页
     ·实验仪器第28-29页
     ·实验试剂第29页
   ·实验所需培养基、试剂的配制第29-31页
     ·培养基第29-30页
     ·实验所需试剂第30-31页
   ·实验方法第31-35页
     ·菌株的复筛第31页
     ·菌株的保存第31页
     ·菌株的活化第31页
     ·菌株的鉴定第31-35页
       ·菌落及菌体形态观察第31页
       ·革兰氏染色第31-32页
       ·菌株 Y-32-1 基因组 DNA 的提取第32-33页
       ·电泳检测提取 DNA第33-34页
       ·配制 PCR 所需体系第34页
       ·PCR 扩增第34页
       ·PCR 扩增产物电泳检测第34-35页
       ·序列分析第35页
   ·细菌素的生化特征第35页
     ·发酵上清液的制备第35页
     ·pH 对细菌素活性的影响第35页
     ·温度对细菌素活性的影响第35页
     ·酶对细菌素活性的影响第35页
   ·结果与讨论第35-43页
     ·菌株的筛选第35-37页
     ·菌落及菌体形态观察第37-38页
     ·Y-32-1 的鉴定第38-41页
       ·Y-32-1 的总 DNA 电泳图第38页
       ·Y-32-116S rDNA 的 PCR 扩增产物电泳图第38-39页
       ·Y-32-1 的系统发育树第39-41页
     ·Y-32-1 所产细菌素的特性研究第41-43页
       ·pH 对细菌素活性的影响第41页
       ·温度对细菌素活性的影响第41-42页
       ·酶对细菌素活性的影响第42-43页
   ·本章小结第43-44页
第三章 Y-32-1 所产细菌素的发酵条件优化第44-70页
   ·实验材料第44-46页
     ·菌种第44页
     ·实验仪器第44-45页
     ·实验试剂及药品第45页
     ·培养基第45-46页
   ·实验方法第46-49页
     ·菌株的活化第46页
     ·种子液培养第46页
     ·菌株生长曲线及产物活性曲线的绘制第46页
     ·培养条件对菌株 Y-32-1 发酵产细菌素的影响第46-47页
       ·种龄对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第46页
       ·接种量对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第46页
       ·装液量对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第46-47页
       ·摇床转速对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第47页
       ·培养基初始 pH 对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第47页
       ·培养温度对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第47页
     ·培养基组成对菌株 Y-32-1 发酵产细菌素的影响第47-48页
       ·不同碳源对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第47页
       ·碳源浓度对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第47页
       ·不同氮源对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第47-48页
       ·氮源浓度对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第48页
       ·磷源浓度对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第48页
       ·缓冲液配比对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第48页
       ·氯化钠浓度对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第48页
       ·金属离子对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第48页
     ·Plackett-Burman 实验第48页
     ·最陡爬坡实验第48-49页
     ·Box-Behnken 实验设计第49页
     ·验证实验第49页
   ·结果与分析第49-69页
     ·菌株生长曲线及产物活性曲线第49-50页
     ·培养条件对菌株 Y-32-1 发酵产细菌素的影响第50-55页
       ·种龄对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第50页
       ·接种量对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第50-51页
       ·装液量对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第51-52页
       ·摇床转速对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第52-53页
       ·培养基初始 pH 值对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第53-54页
       ·培养温度对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第54-55页
     ·培养基组成对菌株 Y-32-1 发酵产细菌素的影响第55-61页
       ·不同碳源对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第55页
       ·碳源浓度对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第55-56页
       ·不同氮源对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第56-57页
       ·氮源浓度对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第57页
       ·磷源总浓度对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第57-58页
       ·缓冲液配比对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第58-59页
       ·氯化钠浓度对细菌素产量的影响第59-60页
       ·金属离子对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响第60-61页
     ·Plackett-Burman 实验结果及分析第61-63页
     ·最陡爬坡实验第63-64页
     ·响应面优化第64-68页
       ·Box-Behnken 实验设计第64-65页
       ·回归模型方差分析第65-68页
     ·回归模型的验证第68-69页
   ·本章小结第69-70页
第四章 Y-32-1 所产细菌素的分离纯化及结构鉴定第70-79页
   ·实验材料第70-71页
     ·菌种第70页
     ·实验仪器第70页
     ·实验试剂及药品第70-71页
     ·培养基第71页
   ·实验所需试剂的配制第71页
   ·实验方法第71-73页
     ·细菌素的分离和纯化第71-73页
       ·酸沉淀与有机溶剂相结合方法提取细菌素第71-72页
       ·硅胶柱层析纯化细菌素第72页
       ·薄层层析法定性分析细菌素第72-73页
     ·电喷雾质谱(ESI-MS)第73页
   ·结果与分析第73-78页
     ·细菌素的分离和纯化第73-76页
       ·酸沉淀与有机溶剂相结合方法提取细菌素第73-74页
       ·硅胶柱层析纯化细菌素第74-76页
       ·薄层层析法定性分析细菌素第76页
     ·电喷雾质谱(ESI-MS)第76-78页
   ·本章小结第78-79页
结论第79-80页
参考文献第80-87页
附录1第87-88页
致谢第88-89页
攻读学位期间发表的学术论文及申请专利目录第89-90页

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