摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-12页 |
符号说明 | 第12-13页 |
前言 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-28页 |
·细菌素的分类 | 第14-16页 |
·羊毛硫细菌素(1antibiotics) | 第14-15页 |
·小分子热稳定的非修饰肽(small heat-stable peptide,SHSP) | 第15页 |
·热不稳定性大分子蛋白质(1arge heat-labile protein,LHLP) | 第15页 |
·蛋白复合体(Protein complexes) | 第15-16页 |
·细菌素的作用机制 | 第16页 |
·细菌素与抗生素的区别 | 第16-18页 |
·细菌素的产生菌 | 第18-24页 |
·芽孢杆菌细菌素 | 第18-20页 |
·枯草杆菌素(subtilin) | 第18-19页 |
·蜡状芽孢杆菌细菌素 | 第19页 |
·凝乳芽孢杆菌细菌素 | 第19页 |
·巨大芽孢杆菌细菌素 | 第19-20页 |
·地衣芽孢杆菌细菌素 | 第20页 |
·丙酸菌细菌素 | 第20-22页 |
·变链素 | 第22页 |
·葡萄球菌素 | 第22-23页 |
·类细菌素 | 第23-24页 |
·细菌素的分离纯化方法 | 第24-26页 |
·细菌素的应用 | 第26-27页 |
·细菌素在食品上的应用 | 第26页 |
·细菌素在生物农药上的应用 | 第26页 |
·细菌素在饲料上的应用 | 第26页 |
·细菌素在医药卫生上的应用 | 第26-27页 |
·本课题的研究意义及前景 | 第27-28页 |
第二章 高产细菌素菌株的筛选、鉴定及其所产细菌素性质的初步研究 | 第28-44页 |
·实验材料 | 第28-29页 |
·菌株来源 | 第28页 |
·供试指示菌株 | 第28页 |
·实验仪器 | 第28-29页 |
·实验试剂 | 第29页 |
·实验所需培养基、试剂的配制 | 第29-31页 |
·培养基 | 第29-30页 |
·实验所需试剂 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-35页 |
·菌株的复筛 | 第31页 |
·菌株的保存 | 第31页 |
·菌株的活化 | 第31页 |
·菌株的鉴定 | 第31-35页 |
·菌落及菌体形态观察 | 第31页 |
·革兰氏染色 | 第31-32页 |
·菌株 Y-32-1 基因组 DNA 的提取 | 第32-33页 |
·电泳检测提取 DNA | 第33-34页 |
·配制 PCR 所需体系 | 第34页 |
·PCR 扩增 | 第34页 |
·PCR 扩增产物电泳检测 | 第34-35页 |
·序列分析 | 第35页 |
·细菌素的生化特征 | 第35页 |
·发酵上清液的制备 | 第35页 |
·pH 对细菌素活性的影响 | 第35页 |
·温度对细菌素活性的影响 | 第35页 |
·酶对细菌素活性的影响 | 第35页 |
·结果与讨论 | 第35-43页 |
·菌株的筛选 | 第35-37页 |
·菌落及菌体形态观察 | 第37-38页 |
·Y-32-1 的鉴定 | 第38-41页 |
·Y-32-1 的总 DNA 电泳图 | 第38页 |
·Y-32-116S rDNA 的 PCR 扩增产物电泳图 | 第38-39页 |
·Y-32-1 的系统发育树 | 第39-41页 |
·Y-32-1 所产细菌素的特性研究 | 第41-43页 |
·pH 对细菌素活性的影响 | 第41页 |
·温度对细菌素活性的影响 | 第41-42页 |
·酶对细菌素活性的影响 | 第42-43页 |
·本章小结 | 第43-44页 |
第三章 Y-32-1 所产细菌素的发酵条件优化 | 第44-70页 |
·实验材料 | 第44-46页 |
·菌种 | 第44页 |
·实验仪器 | 第44-45页 |
·实验试剂及药品 | 第45页 |
·培养基 | 第45-46页 |
·实验方法 | 第46-49页 |
·菌株的活化 | 第46页 |
·种子液培养 | 第46页 |
·菌株生长曲线及产物活性曲线的绘制 | 第46页 |
·培养条件对菌株 Y-32-1 发酵产细菌素的影响 | 第46-47页 |
·种龄对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第46页 |
·接种量对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第46页 |
·装液量对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第46-47页 |
·摇床转速对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第47页 |
·培养基初始 pH 对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第47页 |
·培养温度对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第47页 |
·培养基组成对菌株 Y-32-1 发酵产细菌素的影响 | 第47-48页 |
·不同碳源对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第47页 |
·碳源浓度对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第47页 |
·不同氮源对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第47-48页 |
·氮源浓度对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第48页 |
·磷源浓度对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第48页 |
·缓冲液配比对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第48页 |
·氯化钠浓度对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第48页 |
·金属离子对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第48页 |
·Plackett-Burman 实验 | 第48页 |
·最陡爬坡实验 | 第48-49页 |
·Box-Behnken 实验设计 | 第49页 |
·验证实验 | 第49页 |
·结果与分析 | 第49-69页 |
·菌株生长曲线及产物活性曲线 | 第49-50页 |
·培养条件对菌株 Y-32-1 发酵产细菌素的影响 | 第50-55页 |
·种龄对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第50页 |
·接种量对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第50-51页 |
·装液量对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第51-52页 |
·摇床转速对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第52-53页 |
·培养基初始 pH 值对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第53-54页 |
·培养温度对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第54-55页 |
·培养基组成对菌株 Y-32-1 发酵产细菌素的影响 | 第55-61页 |
·不同碳源对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第55页 |
·碳源浓度对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第55-56页 |
·不同氮源对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第56-57页 |
·氮源浓度对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第57页 |
·磷源总浓度对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第57-58页 |
·缓冲液配比对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第58-59页 |
·氯化钠浓度对细菌素产量的影响 | 第59-60页 |
·金属离子对菌株 Y-32-1 抑菌活性的影响 | 第60-61页 |
·Plackett-Burman 实验结果及分析 | 第61-63页 |
·最陡爬坡实验 | 第63-64页 |
·响应面优化 | 第64-68页 |
·Box-Behnken 实验设计 | 第64-65页 |
·回归模型方差分析 | 第65-68页 |
·回归模型的验证 | 第68-69页 |
·本章小结 | 第69-70页 |
第四章 Y-32-1 所产细菌素的分离纯化及结构鉴定 | 第70-79页 |
·实验材料 | 第70-71页 |
·菌种 | 第70页 |
·实验仪器 | 第70页 |
·实验试剂及药品 | 第70-71页 |
·培养基 | 第71页 |
·实验所需试剂的配制 | 第71页 |
·实验方法 | 第71-73页 |
·细菌素的分离和纯化 | 第71-73页 |
·酸沉淀与有机溶剂相结合方法提取细菌素 | 第71-72页 |
·硅胶柱层析纯化细菌素 | 第72页 |
·薄层层析法定性分析细菌素 | 第72-73页 |
·电喷雾质谱(ESI-MS) | 第73页 |
·结果与分析 | 第73-78页 |
·细菌素的分离和纯化 | 第73-76页 |
·酸沉淀与有机溶剂相结合方法提取细菌素 | 第73-74页 |
·硅胶柱层析纯化细菌素 | 第74-76页 |
·薄层层析法定性分析细菌素 | 第76页 |
·电喷雾质谱(ESI-MS) | 第76-78页 |
·本章小结 | 第78-79页 |
结论 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-87页 |
附录1 | 第87-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
攻读学位期间发表的学术论文及申请专利目录 | 第89-90页 |