摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
1 前言 | 第10-19页 |
1.1 食品中的亚硝酸盐 | 第10-14页 |
1.1.1 亚硝酸盐对人体健康的影响 | 第10-11页 |
1.1.2 蔬菜中硝酸盐及亚硝酸盐的来源 | 第11页 |
1.1.3 降低发酵蔬菜亚硝酸盐含量的方法 | 第11-14页 |
1.2 乳酸菌发酵降解亚硝酸盐机理研究进展 | 第14-16页 |
1.2.1 乳酸菌降解亚硝酸盐机理 | 第14页 |
1.2.2 亚硝酸盐还原酶降解亚硝酸盐 | 第14-16页 |
1.3 马奶酒样乳杆菌ZW3 | 第16-17页 |
1.4 本课题研究目的、意义及内容 | 第17-19页 |
1.4.1 本课题的研究目的及意义 | 第17-18页 |
1.4.2 本课题的研究内容 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-34页 |
2.1 材料 | 第19-23页 |
2.1.1 实验原材料 | 第19页 |
2.1.2 实验用菌种 | 第19页 |
2.1.3 试剂 | 第19-21页 |
2.1.4 工具酶、抗生素及DNA Marker | 第21页 |
2.1.5 实验用质粒 | 第21页 |
2.1.6 试验用引物 | 第21-22页 |
2.1.7 仪器与设备 | 第22-23页 |
2.1.8 培养基的配制 | 第23页 |
2.2 试验方法 | 第23-34页 |
2.2.1 实验技术方案 | 第23-24页 |
2.2.2 ZW3亚硝酸盐还原能力分析 | 第24-25页 |
2.2.3 与亚硝酸盐降解相关基因的生物信息学分析 | 第25-26页 |
2.2.4 与亚硝酸盐降解相关基因编码蛋白的功能与性质分析 | 第26页 |
2.2.5 与亚硝酸盐降解相关基因在大肠中的表达 | 第26-29页 |
2.2.6 蛋白的酶活测定 | 第29-30页 |
2.2.7 与亚硝酸盐降解相关基因的荧光定量PCR分析 | 第30-31页 |
2.2.8 马奶酒样乳杆菌ZW3在豇豆发酵中的应用 | 第31-34页 |
3 结果与讨论 | 第34-89页 |
3.1 马奶酒样乳杆菌ZW3分解亚硝酸能力试验 | 第34-37页 |
3.1.1 亚硝酸盐对马奶酒样乳杆菌ZW3生长状况的影响 | 第34页 |
3.1.2 马奶酒样乳杆菌ZW3对亚硝酸盐降解能力的测定 | 第34-35页 |
3.1.3 不同亚硝酸盐浓度对亚硝酸盐降解能力的影响 | 第35页 |
3.1.4 乳酸对亚硝酸盐降解能力的影响 | 第35-37页 |
3.2 与亚硝酸盐降解相关基因的生物信息学分析 | 第37-45页 |
3.2.1 与亚硝酸盐降解相关的基因序列和蛋白序列的获得 | 第37-42页 |
3.2.2 与亚硝酸盐降解相关基因的比对 | 第42-43页 |
3.2.3 与亚硝酸盐降解相关蛋白保守功能区分析 | 第43-44页 |
3.2.4 与亚硝酸盐降解相关蛋白序列同源性搜索和分析 | 第44-45页 |
3.2.5 与亚硝酸盐降解相关基因的获得 | 第45页 |
3.3 与亚硝酸盐降解相关基因编码蛋白的功能与性质分析 | 第45-57页 |
3.3.1 WANG_0769蛋白的功能与性质分析 | 第45-49页 |
3.3.2 WANG_0780编码蛋白的功能与性质分析 | 第49-53页 |
3.3.3 WANG_1034编码蛋白的功能与性质分析 | 第53-57页 |
3.4 与亚硝酸盐降解相关基因在大肠中表达及亚硝酸盐还原酶活性测定 | 第57-69页 |
3.4.1 亚硝酸盐降解相关基因的扩增 | 第57-58页 |
3.4.2 构建重组质粒 | 第58-59页 |
3.4.3 重组质粒的双酶切验证 | 第59-60页 |
3.4.4 重组质粒测序结果 | 第60-62页 |
3.4.5 与亚硝酸盐降解相关蛋白的表达及纯化 | 第62-67页 |
3.4.6 与亚硝酸盐降解相关蛋白溶液浓度测定 | 第67-68页 |
3.4.7 与亚硝酸盐降解相关蛋白酶活的测定 | 第68-69页 |
3.5 亚硝酸盐降解相关基因的表达量分析 | 第69-75页 |
3.5.1 ZW3 RNA的提取 | 第69-70页 |
3.5.2 实时荧光定量PCR的特异性验证 | 第70-72页 |
3.5.3 与亚硝酸盐降解相关基因的荧光定量PCR结果 | 第72-75页 |
3.6 ZW3在发酵食品中的应用 | 第75-89页 |
3.6.1 发酵豇豆工艺的单因素试验结果 | 第75-79页 |
3.6.2 发酵豇豆工艺的正交试验结果 | 第79-80页 |
3.6.3 发酵豇豆理化性质分析结果 | 第80-89页 |
4 结论 | 第89-91页 |
4.1 马奶酒样乳杆菌ZW3分解亚硝酸能力分析 | 第89页 |
4.2 亚硝酸盐降解相关基因的生物信息学分析 | 第89页 |
4.3 与亚硝酸盐降解相关基因编码蛋白的功能与性质分析 | 第89页 |
4.4 亚硝酸盐降解相关基因在大肠中表达 | 第89-90页 |
4.5 亚硝酸盐降解相关基因的表达量分析 | 第90页 |
4.6 ZW3在发酵食品中的应用 | 第90-91页 |
5 展望 | 第91-92页 |
6 参考文献 | 第92-101页 |
7 攻读硕士期间发表论文情况 | 第101-102页 |
8 致谢 | 第102页 |