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马奶酒样乳杆菌ZW3降解亚硝酸盐功能的研究与应用

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
1 前言第10-19页
    1.1 食品中的亚硝酸盐第10-14页
        1.1.1 亚硝酸盐对人体健康的影响第10-11页
        1.1.2 蔬菜中硝酸盐及亚硝酸盐的来源第11页
        1.1.3 降低发酵蔬菜亚硝酸盐含量的方法第11-14页
    1.2 乳酸菌发酵降解亚硝酸盐机理研究进展第14-16页
        1.2.1 乳酸菌降解亚硝酸盐机理第14页
        1.2.2 亚硝酸盐还原酶降解亚硝酸盐第14-16页
    1.3 马奶酒样乳杆菌ZW3第16-17页
    1.4 本课题研究目的、意义及内容第17-19页
        1.4.1 本课题的研究目的及意义第17-18页
        1.4.2 本课题的研究内容第18-19页
2 材料与方法第19-34页
    2.1 材料第19-23页
        2.1.1 实验原材料第19页
        2.1.2 实验用菌种第19页
        2.1.3 试剂第19-21页
        2.1.4 工具酶、抗生素及DNA Marker第21页
        2.1.5 实验用质粒第21页
        2.1.6 试验用引物第21-22页
        2.1.7 仪器与设备第22-23页
        2.1.8 培养基的配制第23页
    2.2 试验方法第23-34页
        2.2.1 实验技术方案第23-24页
        2.2.2 ZW3亚硝酸盐还原能力分析第24-25页
        2.2.3 与亚硝酸盐降解相关基因的生物信息学分析第25-26页
        2.2.4 与亚硝酸盐降解相关基因编码蛋白的功能与性质分析第26页
        2.2.5 与亚硝酸盐降解相关基因在大肠中的表达第26-29页
        2.2.6 蛋白的酶活测定第29-30页
        2.2.7 与亚硝酸盐降解相关基因的荧光定量PCR分析第30-31页
        2.2.8 马奶酒样乳杆菌ZW3在豇豆发酵中的应用第31-34页
3 结果与讨论第34-89页
    3.1 马奶酒样乳杆菌ZW3分解亚硝酸能力试验第34-37页
        3.1.1 亚硝酸盐对马奶酒样乳杆菌ZW3生长状况的影响第34页
        3.1.2 马奶酒样乳杆菌ZW3对亚硝酸盐降解能力的测定第34-35页
        3.1.3 不同亚硝酸盐浓度对亚硝酸盐降解能力的影响第35页
        3.1.4 乳酸对亚硝酸盐降解能力的影响第35-37页
    3.2 与亚硝酸盐降解相关基因的生物信息学分析第37-45页
        3.2.1 与亚硝酸盐降解相关的基因序列和蛋白序列的获得第37-42页
        3.2.2 与亚硝酸盐降解相关基因的比对第42-43页
        3.2.3 与亚硝酸盐降解相关蛋白保守功能区分析第43-44页
        3.2.4 与亚硝酸盐降解相关蛋白序列同源性搜索和分析第44-45页
        3.2.5 与亚硝酸盐降解相关基因的获得第45页
    3.3 与亚硝酸盐降解相关基因编码蛋白的功能与性质分析第45-57页
        3.3.1 WANG_0769蛋白的功能与性质分析第45-49页
        3.3.2 WANG_0780编码蛋白的功能与性质分析第49-53页
        3.3.3 WANG_1034编码蛋白的功能与性质分析第53-57页
    3.4 与亚硝酸盐降解相关基因在大肠中表达及亚硝酸盐还原酶活性测定第57-69页
        3.4.1 亚硝酸盐降解相关基因的扩增第57-58页
        3.4.2 构建重组质粒第58-59页
        3.4.3 重组质粒的双酶切验证第59-60页
        3.4.4 重组质粒测序结果第60-62页
        3.4.5 与亚硝酸盐降解相关蛋白的表达及纯化第62-67页
        3.4.6 与亚硝酸盐降解相关蛋白溶液浓度测定第67-68页
        3.4.7 与亚硝酸盐降解相关蛋白酶活的测定第68-69页
    3.5 亚硝酸盐降解相关基因的表达量分析第69-75页
        3.5.1 ZW3 RNA的提取第69-70页
        3.5.2 实时荧光定量PCR的特异性验证第70-72页
        3.5.3 与亚硝酸盐降解相关基因的荧光定量PCR结果第72-75页
    3.6 ZW3在发酵食品中的应用第75-89页
        3.6.1 发酵豇豆工艺的单因素试验结果第75-79页
        3.6.2 发酵豇豆工艺的正交试验结果第79-80页
        3.6.3 发酵豇豆理化性质分析结果第80-89页
4 结论第89-91页
    4.1 马奶酒样乳杆菌ZW3分解亚硝酸能力分析第89页
    4.2 亚硝酸盐降解相关基因的生物信息学分析第89页
    4.3 与亚硝酸盐降解相关基因编码蛋白的功能与性质分析第89页
    4.4 亚硝酸盐降解相关基因在大肠中表达第89-90页
    4.5 亚硝酸盐降解相关基因的表达量分析第90页
    4.6 ZW3在发酵食品中的应用第90-91页
5 展望第91-92页
6 参考文献第92-101页
7 攻读硕士期间发表论文情况第101-102页
8 致谢第102页

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