莱茵衣藻纤毛内运输蛋白IFT25和DYF-1的多克隆抗体制备
| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第9-19页 |
| 1.1 纤毛及纤毛病 | 第9-10页 |
| 1.2 纤毛运输机制 | 第10-11页 |
| 1.3 IFT25研究进展 | 第11-12页 |
| 1.4 DYF-1研究进展 | 第12-14页 |
| 1.5 原核表达系统及蛋白纯化 | 第14-18页 |
| 1.6 多克隆抗体的制备及其意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-40页 |
| 2.1 试验材料 | 第19-26页 |
| 2.1.1 试验菌种、基因、表达载体和引物 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第19-21页 |
| 2.1.3 仪器与设备 | 第21-22页 |
| 2.1.4 溶液配制 | 第22-26页 |
| 2.2 试验方法 | 第26-40页 |
| 2.2.1 试验技术路线图 | 第26页 |
| 2.2.2 构建表达载体 | 第26-32页 |
| 2.2.3 目的蛋白的诱导表达 | 第32-33页 |
| 2.2.4 目的蛋白的纯化 | 第33-36页 |
| 2.2.5 动物免疫 | 第36-37页 |
| 2.2.6 抗体纯化 | 第37-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-56页 |
| 3.1 目的蛋白的生物信息和理化特性分析 | 第40-43页 |
| 3.1.1 目的蛋白的基因序列和氨基酸序列 | 第40-42页 |
| 3.1.2 目的蛋白的理化特性 | 第42-43页 |
| 3.2 载体构建 | 第43-47页 |
| 3.2.1 目的基因的获取 | 第43-44页 |
| 3.2.2 载体的获取 | 第44-46页 |
| 3.2.3 目的基因和载体的连接 | 第46-47页 |
| 3.3 目的蛋白的诱导表达 | 第47-51页 |
| 3.3.1 IFT25表达情况 | 第47-49页 |
| 3.3.2 DYF-1(380)表达情况 | 第49-51页 |
| 3.4 目的蛋白的纯化 | 第51-52页 |
| 3.5 免疫兔子及抗血清的分离 | 第52-53页 |
| 3.6 多克隆抗体的纯化及特异性检测 | 第53-56页 |
| 4 结论 | 第56-58页 |
| 5 展望 | 第58-59页 |
| 6 参考文献 | 第59-65页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第65-66页 |
| 8 致谢 | 第66页 |
