| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 英文缩略语索引 | 第10-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-23页 |
| 1.1 副溶血弧菌 | 第14-15页 |
| 1.1.1 生物学特性 | 第14-15页 |
| 1.1.2 副溶血弧菌引起的食物中毒临床症状 | 第15页 |
| 1.2 副溶血弧菌主要致病因子 | 第15-18页 |
| 1.2.1 溶血毒素 | 第15-16页 |
| 1.2.2 三型分泌系统 | 第16页 |
| 1.2.3 尿素酶 | 第16-17页 |
| 1.2.4 侵袭力相关因子 | 第17页 |
| 1.2.5 粘附力相关因子 | 第17-18页 |
| 1.2.6 胞外蛋白酶 | 第18页 |
| 1.3 影响副溶血弧菌毒素分泌及溶血效果的因素 | 第18-19页 |
| 1.4 副溶血弧菌TDH分泌调控基因 | 第19-20页 |
| 1.4.1 toxRS | 第19页 |
| 1.4.2 hfq | 第19-20页 |
| 1.5 弧菌属基因插入与缺失突变株构建方法 | 第20-21页 |
| 1.5.1 电转化法 | 第20-21页 |
| 1.5.2 接合转座法 | 第21页 |
| 1.6 本课题主要研究内容及意义 | 第21-23页 |
| 第二章 影响副溶血弧菌耐热直接溶血毒素表达的外界因素 | 第23-35页 |
| 2.1 菌株及材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 菌株 | 第23页 |
| 2.1.2 主要培养基 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第24页 |
| 2.1.4 主要仪器和设备 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-25页 |
| 2.2.1 菌株活化及菌液制备 | 第24-25页 |
| 2.2.2 不同条件下培养副溶血弧菌 | 第25页 |
| 2.2.3 培养上清液处理及溶血研究 | 第25页 |
| 2.2.4 溶血值测量及溶血率计算 | 第25页 |
| 2.3 实验结果 | 第25-32页 |
| 2.3.1 可产生明显溶血现象培养基筛选结果 | 第25-26页 |
| 2.3.2 影响耐热直接溶血素表达因素鉴定 | 第26-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-35页 |
| 第三章 副溶血弧菌突变体库的构建和溶血相关基因的筛选 | 第35-57页 |
| 3.1 材料 | 第35-39页 |
| 3.1.1 菌株及质粒 | 第35页 |
| 3.1.2 培养基 | 第35-37页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第37-38页 |
| 3.1.4 主要仪器和设备 | 第38-39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-45页 |
| 3.2.1 Vp 突变体库构建 | 第39-41页 |
| 3.2.2 阳性接合子溶血能力筛查 | 第41-42页 |
| 3.2.3 以15号培养基检测溶血稳定变化菌株溶血能力 | 第42页 |
| 3.2.4 溶血能力变化菌株表型测定 | 第42-43页 |
| 3.2.5 质粒拯救获得Tn5插入位点侧翼序列 | 第43-45页 |
| 3.3 实验结果 | 第45-52页 |
| 3.3.1 接合条件优化结果 | 第45-46页 |
| 3.3.2 接合子PCR鉴定结果 | 第46-47页 |
| 3.3.3 阳性接合子溶血能力筛查结果 | 第47-48页 |
| 3.3.4 溶血能力稳定菌株tdh基因PCR鉴定 | 第48页 |
| 3.3.5 15号培养基检测溶血能力结果 | 第48-49页 |
| 3.3.6 溶血能力变化菌株生长曲线测定 | 第49-50页 |
| 3.3.7 溶血能力变化菌株运动能力测定 | 第50-51页 |
| 3.3.8 溶血能力变化菌株菌膜形成能力测定 | 第51-52页 |
| 3.3.9 连接产物转化E. coli DH5α 及测序结果 | 第52页 |
| 3.4 讨论 | 第52-57页 |
| 第四章 总结与展望 | 第57-59页 |
| 4.1 总结 | 第57页 |
| 4.2 展望 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-68页 |
| 附录 | 第68-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第72页 |
