| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第8-20页 |
| 1.1 研究背景 | 第8-9页 |
| 1.2 研究现状 | 第9-18页 |
| 1.2.1 cyclin D1 的研究进展 | 第9-12页 |
| 1.2.2 c1orf109 功能和表达的研究 | 第12-13页 |
| 1.2.3 转录因子与启动子相互作用研究的主要手段和现状 | 第13-18页 |
| 1.3 本文的主要研究内容 | 第18页 |
| 1.4 技术路线 | 第18-20页 |
| 第2章 实验方法和实验材料 | 第20-27页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.2.1 细胞系 | 第20页 |
| 2.2.2 菌株和重组体 | 第20-21页 |
| 2.2.3 抗体 | 第21页 |
| 2.2.4 常用缓冲液及其他试剂 | 第21-22页 |
| 2.2.5 主要仪器设备 | 第22页 |
| 2.2.6 主要软件 | 第22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-26页 |
| 2.3.1 启动子序列分析 | 第22-23页 |
| 2.3.2 PCR实验 | 第23页 |
| 2.3.3 限制性内切酶双酶切实验 | 第23页 |
| 2.3.4 DNA连接酶连接实验 | 第23页 |
| 2.3.5 重组质粒转化实验 | 第23页 |
| 2.3.6 质粒提取 | 第23-24页 |
| 2.3.7 siRNA转染实验 | 第24页 |
| 2.3.8 免疫印迹实验 | 第24-25页 |
| 2.3.9 琼脂糖凝胶电泳 | 第25页 |
| 2.3.10 细胞传代培养 | 第25页 |
| 2.3.11 细胞的裂解 | 第25页 |
| 2.3.12 重组质粒转染细胞实验 | 第25-26页 |
| 2.3.13 荧光素酶水平检测 | 第26页 |
| 2.4 本章小结 | 第26-27页 |
| 第3章cyclin D1 启动子重组质粒的构建 | 第27-38页 |
| 3.1 引言 | 第27页 |
| 3.2 cyclin D1 启动子序列分析 | 第27-29页 |
| 3.3 重组质粒的构建和筛选 | 第29-36页 |
| 3.3.1 引物的设计 | 第29-32页 |
| 3.3.2 重组质粒的构建 | 第32-34页 |
| 3.3.3 重组质粒的筛选 | 第34-36页 |
| 3.4 重组质粒表达荧光素酶效果的检验 | 第36页 |
| 3.5 本章小结 | 第36-38页 |
| 第4章 重组质粒转染细胞荧光素酶表达实验 | 第38-47页 |
| 4.1 引言 | 第38页 |
| 4.2 siRNA干扰c1orf109 蛋白表达水平 | 第38-40页 |
| 4.3 重组质粒转染和荧光素酶的检测 | 第40-45页 |
| 4.4 本章小结 | 第45-47页 |
| 结论 | 第47页 |
| 展望 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 附录 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58页 |