| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-31页 |
| ·概述 | 第11页 |
| ·世界燃料酒精工业的发展现状 | 第11-13页 |
| ·酒精的发酵工艺 | 第13-16页 |
| ·高浓度酒精发酵 | 第13页 |
| ·连续发酵 | 第13-14页 |
| ·细胞固定化 | 第14-16页 |
| ·酿酒酵母的絮凝研究 | 第16-21页 |
| ·酵母絮凝的遗传因子研究 | 第16-17页 |
| ·酵母絮凝的影响因素 | 第17-19页 |
| ·酵母絮凝的遗传工程 | 第19-20页 |
| ·酵母絮凝蛋白Flo1p的研究 | 第20-21页 |
| ·本课题立题背景和研究内容 | 第21-22页 |
| 参考文献 | 第22-31页 |
| 第二章 絮凝重组菌Saccharomyces cerevisiae W303-1A F4的构建 | 第31-44页 |
| ·引言 | 第31页 |
| ·材料与方法 | 第31-37页 |
| ·菌株和质粒 | 第31页 |
| ·培养基 | 第31-32页 |
| ·培养方法 | 第32页 |
| ·工具酶和试剂 | 第32-33页 |
| ·主要仪器 | 第33页 |
| ·分子克隆技术 | 第33-36页 |
| ·分析方法 | 第36页 |
| ·重组菌发酵实验 | 第36-37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-40页 |
| ·含酿酒酵母絮凝基因FLO1的重组质粒pYX-FLO的构建 | 第37页 |
| ·酿酒酵母絮凝基因FLO1的核苷酸序列分析 | 第37页 |
| ·重组质粒pYX-FLO转化S. cerevisiae W303-1A | 第37-38页 |
| ·重组酿酒酵母W303-1A F4 的絮凝能力及絮凝传代稳定性 | 第38-39页 |
| ·初始pH值对重组酿酒酵母W303-1A F4的絮凝能力的影响 | 第39-40页 |
| ·葡萄糖浓度对重组菌W303-1A F4絮凝性能的影响及絮凝启动点 | 第40页 |
| ·本章小结 | 第40-42页 |
| 参考文献 | 第42-44页 |
| 第三章 安琪酵母絮凝基因工程菌Ay-F12的构建 | 第44-59页 |
| ·引言 | 第44页 |
| ·材料与方法 | 第44-46页 |
| ·菌株和质粒 | 第44页 |
| ·培养基 | 第44-45页 |
| ·发酵方法 | 第45页 |
| ·工具酶和试剂 | 第45页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| ·分子克隆技术 | 第45页 |
| ·质粒pYX-FLO-kan的构建 | 第45-46页 |
| ·分析方法 | 第46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-57页 |
| ·重组质粒pYX-FLO-kan的构建及验证 | 第46-48页 |
| ·重组质粒pYX-FLO-kan转化安琪酵母 | 第48页 |
| ·重组菌 Angel yeast F12 的絮凝性能 | 第48页 |
| ·初始 pH 值对重组菌 Angel yeast F12 絮凝性能的影响 | 第48-50页 |
| ·重组菌Ay-F12的发酵性能 | 第50-51页 |
| ·温度对重组菌Ay-F12絮凝性能的影响 | 第51-52页 |
| ·不同温度条件下重组菌Ay-F12的发酵 | 第52页 |
| ·重组菌Ay-F12的细胞回用反复分批发酵 | 第52-57页 |
| ·本章小结 | 第57页 |
| 参考文献 | 第57-59页 |
| 第四章 工业酿酒酵母絮凝基因工程菌ZWA46-F2的构建 | 第59-69页 |
| ·引言 | 第59页 |
| ·材料与方法 | 第59-60页 |
| ·菌株和质粒 | 第59页 |
| ·培养基 | 第59-60页 |
| ·培养方法 | 第60页 |
| ·工具酶和试剂 | 第60页 |
| ·主要仪器 | 第60页 |
| ·分子克隆技术 | 第60页 |
| ·分析方法 | 第60页 |
| ·结果与讨论 | 第60-66页 |
| ·重组质粒pYX-FLO-kan转化S. cerevisiae ZWA46 | 第60页 |
| ·重组菌ZWA46-F2的絮凝性能 | 第60-61页 |
| ·初始pH值对重组菌ZWA46-F2絮凝性能的影响 | 第61-62页 |
| ·温度对重组菌ZWA46-F2絮凝性能的影响 | 第62-63页 |
| ·葡萄糖浓度对重组菌ZWA46-F2絮凝性能的影响及絮凝启动点 | 第63-65页 |
| ·重组菌ZWA46-F2的发酵特性 | 第65-66页 |
| ·重组菌ZWA46-F2和Ay-F12的比较 | 第66页 |
| ·本章小结 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-69页 |
| 第五章 工业酿酒酵母絮凝基因工程菌ZWA46-F2生产酒精的发酵工艺研究 | 第69-81页 |
| ·引言 | 第69页 |
| ·材料与方法 | 第69-70页 |
| ·菌株 | 第69页 |
| ·培养基 | 第69-70页 |
| ·发酵方法 | 第70页 |
| ·分析方法 | 第70页 |
| ·结果与讨论 | 第70-79页 |
| ·絮凝重组酵母ZWA46-F2细胞回用的反复分批发酵 | 第70-73页 |
| ·絮凝重组酵母ZWA46-F2的连续发酵 | 第73-74页 |
| ·絮凝重组酵母ZWA46-F2的连续发酵耦合细胞回用反复分批发酵 | 第74-78页 |
| ·几种发酵结果的比较 | 第78-79页 |
| ·本章小结 | 第79页 |
| 参考文献 | 第79-81页 |
| 第六章 酿酒酵母絮凝蛋白 Flo1p 的研究 | 第81-97页 |
| ·引言 | 第81页 |
| ·材料与方法 | 第81-85页 |
| ·菌株和质粒 | 第81页 |
| ·培养基 | 第81页 |
| ·培养方法 | 第81页 |
| ·工具酶和试剂 | 第81-82页 |
| ·主要仪器 | 第82页 |
| ·分子克隆技术 | 第82-83页 |
| ·酵母质粒的提取 | 第83-84页 |
| ·酵母阳性重组子的鉴定 | 第84页 |
| ·酵母胞壁蛋白 Flo1p 的分离和纯化 | 第84页 |
| ·酵母胞壁蛋白SDS-PAGE分析 | 第84页 |
| ·酵母胞壁蛋白 Flo1p 的 western blot 鉴定 | 第84-85页 |
| ·单糖类抑制酵母细胞絮凝的分析 | 第85页 |
| ·Flo1p 的 N 端序列分析 | 第85页 |
| ·分析方法 | 第85页 |
| ·结果与讨论 | 第85-94页 |
| ·酿酒酵母胞壁蛋白 Flo1p 的分离纯化及 Western blot 鉴定 | 第85-86页 |
| ·单糖对酿酒酵母胞壁蛋白 Flo1p 絮凝性能的抑制作用及 Flo1p 的分类 | 第86-88页 |
| ·酿酒酵母胞壁蛋白 Flo1p 的 N 端活性区域研究 | 第88-94页 |
| ·本章小结 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-97页 |
| 主要结论 | 第97-99页 |
| 创新点 | 第99-100页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101-103页 |
| 主要符号对照表 | 第103页 |
