摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-16页 |
第一章 绪论 | 第16-37页 |
·丝胶的性质与结构 | 第16-17页 |
·丝胶提取方法的研究进展 | 第17-18页 |
·化学方法 | 第17-18页 |
·酸析法 | 第17页 |
·化学混凝法 | 第17页 |
·有机溶剂沉淀法 | 第17-18页 |
·物理方法 | 第18页 |
·离心法 | 第18页 |
·超滤浓缩法 | 第18页 |
·丝胶的开发和利用 | 第18-23页 |
·在食品中的应用 | 第19-21页 |
·丝胶及其水解产物的营养价值和生物活性功能 | 第19-21页 |
·丝胶及其水解产物食品开发现状及前景 | 第21页 |
·在医药中的应用 | 第21-22页 |
·在化妆品中的应用 | 第22-23页 |
·在材料中的应用 | 第23页 |
·酶法制备生物活性肽的研究进展 | 第23-25页 |
·类黑精的研究进展 | 第25-27页 |
·本课题立题背景和意义 | 第27-28页 |
·本论文主要研究内容 | 第28页 |
参考文献 | 第28-37页 |
第二章 丝绸废水中丝胶的提取及其理化性质 | 第37-60页 |
·前言 | 第37页 |
·实验材料与仪器 | 第37-38页 |
·实验材料与主要试剂 | 第37-38页 |
·主要仪器 | 第38页 |
·实验方法 | 第38-42页 |
·原料的预处理 | 第38页 |
·酸析法提取丝胶 | 第38-39页 |
·低温乙醇沉淀法提取丝胶 | 第39页 |
·丝绸生产废水中丝胶的提取工艺 | 第39页 |
·分析方法 | 第39-41页 |
·基本成分分析 | 第39页 |
·氮可溶解指数(NSI)测定 | 第39-40页 |
·蚕腥味的分析 | 第40页 |
·氨基酸组成分析 | 第40页 |
·蛋白质或多肽疏水值的计算[7] | 第40页 |
·HPLC 测定相对分子质量分布(<10,000) | 第40页 |
·凝胶过滤色谱和SDS-PAGE 电泳测定相对分子质量分布(>10,000) | 第40-41页 |
·丝胶蛋白质的超微结构测定 | 第41页 |
·丝胶蛋白质的热性质测定 | 第41页 |
·圆二色性(CD)测定 | 第41页 |
·红外光谱(IR)测定 | 第41页 |
·气相色谱质谱联用分析丝胶中挥发性组分 | 第41-42页 |
·挥发性组分的固相微萃取(SPME) | 第41-42页 |
·气相色谱质谱联用分析 | 第42页 |
·结果与讨论 | 第42-57页 |
·丝胶提取方法的比较 | 第42-44页 |
·预处理的丝胶及醇提的丝胶理化性质 | 第44-45页 |
·醇提丝胶蛋白质氨基酸组成和疏水性 | 第45-46页 |
·醇提丝胶蛋白质相对分子质量分布 | 第46-48页 |
·丝胶蛋白质的超微结构 | 第48-49页 |
·丝胶蛋白质的热性质 | 第49-51页 |
·丝胶蛋白质分子构象 | 第51-53页 |
·圆二色性 | 第51-52页 |
·红外光谱 | 第52-53页 |
·丝胶中挥发性组分 | 第53-57页 |
·本章小结 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-60页 |
第三章 酶法水解丝胶蛋白的研究 | 第60-74页 |
·前言 | 第60页 |
·实验材料与设备 | 第60-61页 |
·实验材料和主要试剂 | 第60页 |
·仪器设备 | 第60-61页 |
·实验方法 | 第61-62页 |
·水解度(DH)测定 | 第61页 |
·酶解工艺及酶解产物的分离 | 第61页 |
·丝胶酶解工艺条件的优化 | 第61-62页 |
·理化性质分析 | 第62页 |
·基本成分分析 | 第62页 |
·氨基酸组成测定 | 第62页 |
·相对分子质量分布测定 | 第62页 |
·结果与讨论 | 第62-72页 |
·不同蛋白酶对丝胶蛋白水解能力的比较 | 第62-64页 |
·AS1398 蛋白酶水解丝胶蛋白的影响因素 | 第64-66页 |
·底物浓度对丝胶蛋白水解度的影响 | 第64页 |
·pH 对丝胶蛋白水解度的影响 | 第64-65页 |
·加酶量([E]/[S])对丝胶蛋白水解度的影响 | 第65-66页 |
·AS1398 蛋白酶酶解条件的优化 | 第66-70页 |
·回归分析 | 第67-70页 |
·最优酶解条件的确定及其验证 | 第70页 |
·丝胶蛋白酶解产物的组成分析 | 第70-72页 |
·本章小结 | 第72页 |
参考文献 | 第72-74页 |
第四章 丝胶酶解产物的精制及其生物活性的的研究 | 第74-95页 |
·前言 | 第74页 |
·实验材料与设备 | 第74-75页 |
·实验材料和主要试剂 | 第74-75页 |
·仪器设备 | 第75页 |
·实验方法 | 第75-79页 |
·DA201-C 大孔吸附树脂对丝胶酶解产物的分离 | 第75-76页 |
·采用DA201-C 大孔吸附树脂对丝胶酶解产物进行脱盐 | 第76页 |
·DA201-C 大孔吸附树脂对丝胶酶解产物脱色效果的分析 | 第76页 |
·理化性质分析 | 第76页 |
·基本成分分析 | 第76页 |
·氨基酸组成测定 | 第76页 |
·相对分子量分布测定 | 第76页 |
·生物活性的分析 | 第76-79页 |
·二苯基苦味肼基自由基(DPPH·)清除能力的测定 | 第76-77页 |
·Fe~(2+) 螯合力的测定 | 第77页 |
·抑制酪氨酸酶活性的测定 | 第77-78页 |
·对鱼糜肌动球蛋白质冷冻变性保护作用的分析 | 第78-79页 |
·结果与讨论 | 第79-91页 |
·丝胶酶解产物的初分离 | 第79-82页 |
·丝胶酶解产物的脱盐 | 第82-83页 |
·丝胶酶解产物的脱色 | 第83-85页 |
·DK-3 组分生物活性分析 | 第85-88页 |
·DK-3 组分清除DPPH·的效果 | 第86-87页 |
·DK-3 组分对酪氨酸酶活性的抑制作用 | 第87页 |
·DK-3 组分对Fe2+螯合能力 | 第87-88页 |
·DK-1 组分对鱼糜肌动球蛋白质冷冻变性保护作用 | 第88-91页 |
·DK-1 组分对肌动球蛋白总巯基含量变化的影响 | 第89页 |
·DK-1 组分对肌动球蛋白表面疏水性变化的影响 | 第89-90页 |
·DK-1 组分对肌动球蛋白降解的影响 | 第90-91页 |
·本章小结 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-95页 |
第五章 丝胶酶解产物中抗氧化性类黑精的研究 | 第95-130页 |
·前言 | 第95-96页 |
·实验材料与设备 | 第96-97页 |
·实验材料和主要试剂 | 第96页 |
·仪器设备 | 第96-97页 |
·实验方法 | 第97-100页 |
·SDS-PAGE 结合过碘酸--希夫(PAS)染色鉴定糖蛋白 | 第97页 |
·O-糖肽键的测定――β-消去反应 | 第97页 |
·气相色谱质谱联用测定丝胶酶解产物中挥发性杂环化合物 | 第97页 |
·聚酰胺色谱分离类黑精 | 第97-98页 |
·半制备RP-HPLC 分离类黑精 | 第98页 |
·RP-HPLC 分析类黑精 | 第98页 |
·清除DPPH·自由基活性分析 | 第98页 |
·对过氧化氢(H202)氧化损伤的PC12 细胞保护作用 | 第98-99页 |
·相对分子质量分布测定 | 第99页 |
·氨基酸组成分析 | 第99页 |
·MALDI-TOF MS 质谱测定类黑精质量指纹图谱 | 第99页 |
·ESI-MS-MS 质谱分析特征肽段氨基酸序列 | 第99页 |
·红外光谱分析 | 第99页 |
·类黑精组分的酸水解 | 第99-100页 |
·半制备RP-HPLC 分离酸水解样品中色素组分 | 第100页 |
·RP-HPLC 分析酸水解样品中色素组分 | 第100页 |
·核磁共振(NMR)分析 | 第100页 |
·结果与讨论 | 第100-125页 |
·丝胶酶解产物中类黑精的形成 | 第100-104页 |
·丝胶糖蛋白的性质 | 第100-102页 |
·丝胶酶解产物中挥发性杂环化合物 | 第102-104页 |
·丝胶酶解产物中类黑精的分离纯化 | 第104-108页 |
·聚酰胺柱层析分离纯化DK-3 组分 | 第104-105页 |
·RP-HPLC 分离纯化P-2 组分 | 第105-108页 |
·RP-M 类黑精组分抗氧化活性 | 第108-109页 |
·清除DPPH·自由基的能力 | 第108页 |
·RP-M 类黑精组分对过氧化氢(H_2O_2)氧化损伤的PC12 细胞保护作用 | 第108-109页 |
·RP-M 类黑精组分相对分子质量 | 第109-110页 |
·RP-M 类黑精组分氨基酸组成 | 第110-111页 |
·RP-M 类黑精组分质量指纹图谱 | 第111-112页 |
·RP-M 类黑精组分的结构特征 | 第112-120页 |
·ESI-MS-MS 解析RP-M 类黑精组分中特征短肽的氨基酸序列 | 第112-118页 |
·RP-M 类黑精组分的红外光谱 | 第118-120页 |
·RP-M 类黑精组分的紫外-可见吸收光谱 | 第120页 |
·酸水解样品中色素组分的分离及结构特征的分析 | 第120-125页 |
·本章小结 | 第125-126页 |
参考文献 | 第126-130页 |
第六章 丝胶肽抗衰老作用的研究 | 第130-146页 |
·前言 | 第130-131页 |
·实验材料与设备 | 第131-133页 |
·实验材料和主要试剂 | 第131-132页 |
·实验动物 | 第131页 |
·实验材料 | 第131页 |
·主要试剂 | 第131-132页 |
·仪器设备 | 第132-133页 |
·实验方法 | 第133-137页 |
·动物分组、造模及给药 | 第133页 |
·水迷宫实验 | 第133-134页 |
·血清中SOD 活力和MDA 含量的测定 | 第134页 |
·脏器系数测定 | 第134-135页 |
·大鼠脑组织海马区组织形态学的观察(HE 染色) | 第135页 |
·大鼠脑组织中Bcl-2 mRNA 表达水平的半定量RT-PCR 分析 | 第135-136页 |
·大鼠脑组织取材 | 第135页 |
·组织中总RNA 的抽提 | 第135页 |
·PCR 引物序列及扩增片断长度 | 第135-136页 |
·RT-PCR 反应 | 第136页 |
·目的片断的扩增 | 第136页 |
·数据统计学处理 | 第136-137页 |
·结果与讨论 | 第137-143页 |
·丝胶肽对D-半乳糖致衰老模型老鼠血清中SOD 活性和MDA 含量的影响 | 第137-138页 |
·丝胶肽对D-半乳糖致衰老模型老鼠免疫器官重量的影响 | 第138-139页 |
·丝胶肽对D-半乳糖致衰老模型老鼠脑组织老化的影响 | 第139-143页 |
·丝胶肽对D-半乳糖致衰老模型老鼠学习记忆能力的影响 | 第139-141页 |
·丝胶肽对D-半乳糖致衰老模型老鼠脑组织海马神经细胞形态学的影响 | 第141-142页 |
·丝胶肽对D-半乳糖致衰老模型老鼠脑组织Bcl-2 mRNA 表达的影响 | 第142-143页 |
·本章小结 | 第143页 |
参考文献 | 第143-146页 |
主要结论 | 第146-148页 |
展望 | 第148-149页 |
论文创新点 | 第149-150页 |
致谢 | 第150-151页 |
附录:作者攻读博士学位期间发表的论文 | 第151页 |