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红曲霉在红曲黄酒酿造过程中的作用研究

中文摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第一章 绪论第11-23页
    1.1 红曲黄酒概述第11-12页
        1.1.1 红曲黄酒简介第11页
        1.1.2 红曲黄酒酿造工艺及其功能第11页
        1.1.3 红曲黄酒酿造主要微生物第11-12页
    1.2 红曲霉概述第12-15页
        1.2.1 红曲霉与红曲第12页
        1.2.2 红曲霉的分类及分离鉴定第12-13页
        1.2.3 红曲霉的代谢产物及特性第13-15页
            1.2.3.1 酶类活性物质第13-14页
            1.2.3.2 脂肪酸和有机酸第14页
            1.2.3.3 红曲色素和桔霉素第14-15页
            1.2.3.4 其他活性物质第15页
    1.3 红曲黄酒“色香味”及其形成机制研究第15-19页
        1.3.1 红曲黄酒“色香味”的研究进展第15-16页
        1.3.2 酿造主要微生物对挥发性风味物质的影响第16-18页
            1.3.2.1 红曲霉对挥发性风味物质的影响第16-17页
            1.3.2.2 酵母菌对挥发性风味物质的影响第17页
            1.3.2.3 细菌对挥发性风味物质的影响第17-18页
        1.3.3 酿造主要微生物之间的相互作用第18-19页
    1.4 红曲黄酒酿造过程中菌群结构研究及其方法第19-20页
    1.5 本课题的研究意义、目标及内容第20-23页
        1.5.1 本课题的研究意义第20-21页
        1.5.2 本课题的研究目标及内容第21-23页
第二章 古田红曲中优势真菌菌群及其成曲特性研究第23-37页
    2.1 引言第23页
    2.2 实验材料与设备第23-25页
        2.2.1 红曲样品采集与处理第23-24页
        2.2.2 主要仪器和设备第24页
        2.2.3 主要药品试剂和培养基第24-25页
            2.2.3.1 主要药品试剂第24-25页
            2.2.3.2 主要培养基第25页
    2.3 实验方法第25-30页
        2.3.1 传统分离纯化法观察酒曲真菌菌群结构第25页
        2.3.2 分子生态学技术分析酒曲真菌菌群结构第25-28页
            2.3.2.1 酒曲真菌基因组DNA的提取第25-26页
            2.3.2.2 酒曲真菌18S rDNA可变区的巢式PCR扩增第26-27页
            2.3.2.3 变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析第27页
            2.3.2.4 实时荧光定量PCR (qPCR)分析第27-28页
        2.3.3 成曲特性分析第28-30页
            2.3.3.1 红曲糖化酶活力测定第28页
            2.3.3.2 红曲色价测定第28-29页
            2.3.3.3 红曲挥发性风味物质测定第29-30页
    2.4 结果与讨论第30-36页
        2.4.1 古田红曲简介第30页
        2.4.2 古田红曲中优势真菌菌群的分析第30-33页
            2.4.2.1 传统分离纯化法观察真菌菌群结构第30-32页
            2.4.2.2 分子生态学技术分析真菌菌群结构第32-33页
        2.4.3 古田红曲中成曲特性的分析第33-36页
            2.4.3.1 红曲糖化力比较第33-34页
            2.4.3.2 红曲色价比较第34页
            2.4.3.3 红曲挥发性风味物质比较第34-36页
    2.5 本章小结第36-37页
第三章 平湖红曲黄酒酿造过程中的真菌菌群动态及相关产物分析第37-51页
    3.1 引言第37页
    3.2 实验材料与设备第37-39页
        3.2.1 实验材料第37-38页
        3.2.2 主要仪器和设备第38页
        3.2.3 主要药品试剂第38-39页
    3.3 实验方法第39-42页
        3.3.1 酿造及取样流程第39页
        3.3.2 发酵样品预处理第39页
        3.3.3 酿造过程真菌菌群分析方法第39-40页
            3.3.3.1 发酵样品真菌基因组DNA的提取第39-40页
            3.3.3.2 发酵样品真菌18S rDNA可变区的巢式PCR扩增第40页
            3.3.3.3 变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析第40页
            3.3.3.4 实时荧光定量PCR(qPCR)分析第40页
        3.3.4 酿造过程代谢产物分析方法第40-42页
            3.3.4.1 还原糖的测定第40-41页
            3.3.4.2 酒精度(乙醇含量)的测定第41页
            3.3.4.3 色差的测定第41页
            3.3.4.4 色价的测定第41页
            3.3.4.5 有机酸的测定第41-42页
            3.3.4.6 挥发性风味物质的测定第42页
    3.4 结果与讨论第42-50页
        3.4.1 平湖红曲黄酒酿造过程中取样时间的设置第42页
        3.4.2 平湖红曲黄酒酿造过程中优势真菌菌群的变化第42-45页
            3.4.2.1 采用PCR-DGGE解析优势真菌菌群结构第42-43页
            3.4.2.2 采用实时荧光定量PCR跟踪优势真菌菌群数量第43-45页
        3.4.3 平湖红曲黄酒酿造过程中相关代谢产物的变化第45-50页
            3.4.3.1 还原糖、乙醇和pH随酿造时间的变化第45-46页
            3.4.3.2 色差和色价随酿造时间的变化第46-48页
            3.4.3.3 有机酸随酿造时间的变化第48页
            3.4.3.4 挥发性风味物质随酿造时间的变化第48-50页
    3.5 本章小结第50-51页
第四章 红曲霉在红曲黄酒酿造体系中的生长机制探究第51-63页
    4.1 引言第51页
    4.2 实验材料与设备第51-52页
        4.2.1 实验菌株第51页
        4.2.2 主要仪器和设备第51页
        4.2.3 主要药品试剂和培养基第51-52页
            4.2.3.1 主要药品试剂第51页
            4.2.3.2 主要培养基第51-52页
    4.3 实验方法第52-55页
        4.3.1 试验流程第52-53页
        4.3.2 平湖红曲霉(C1)的鉴定第53-54页
            4.3.2.1 形态学鉴定第53页
            4.3.2.2 分子生物学鉴定第53-54页
        4.3.3 平湖红曲霉(C1)的培养方法第54页
            4.3.3.1 菌株活化第54页
            4.3.3.2 孢子悬浮液制备第54页
        4.3.4 发酵体系的构建第54-55页
        4.3.5 各体系红曲霉菌量变化的跟踪方法第55页
            4.3.5.1 发酵样品预处理第55页
            4.3.5.2 样品真菌基因组DNA的提取第55页
            4.3.5.3 实时荧光定量PCR(qPCR)分析第55页
    4.4 结果与讨论第55-62页
        4.4.1 平湖红曲霉(C1)的鉴定第55-58页
            4.4.1.1 平湖红曲霉(C1)的菌落特征第55-56页
            4.4.1.2 平湖红曲霉(C1)的显微特征第56-57页
            4.4.1.3 ITS片段和18S rDNA片段扩增结果第57页
            4.4.1.4 测序结果第57-58页
        4.4.2 平湖红曲霉(C1)的生长机制探究第58-62页
            4.4.2.1 影响因子的初步猜测第58-59页
            4.4.2.2 影响因子的实验验证第59-61页
            4.4.2.3 传统酿造中不同酒精度对红曲霉菌量的影响第61-62页
    4.5 本章小结第62-63页
第五章 红曲霉对红曲黄酒特征风味物质形成的贡献第63-78页
    5.1 引言第63页
    5.2 实验材料与设备第63-66页
        5.2.1 实验菌株第63-64页
        5.2.2 主要仪器和设备第64页
        5.2.3 主要药品试剂和培养基第64-66页
            5.2.3.1 主要药品试剂第64-65页
            5.2.3.2 主要培养基第65-66页
    5.3 实验方法第66-68页
        5.3.1 试验流程第66页
        5.3.2 菌株培养方法第66-67页
            5.3.2.1 菌株活化第66页
            5.3.2.2 发酵培养第66-67页
        5.3.3 液化液、糖化液研究方法第67-68页
            5.3.3.1 液化液制备第67页
            5.3.3.2 DE值测定第67-68页
            5.3.3.3 糖化液制备第68页
        5.3.4 代谢产物分析方法第68页
            5.3.4.1 还原糖的测定第68页
            5.3.4.2 酒精度(乙醇含量)的测定第68页
            5.3.4.3 有机酸的测定第68页
            5.3.4.4 挥发性风味物质的测定第68页
    5.4 结果与讨论第68-77页
        5.4.1 液化液和糖化液酶解条件的确定第68-71页
            5.4.1.1 液化液的研究第69页
            5.4.1.2 糖化液的研究第69-71页
        5.4.2 红曲霉对基础代谢产物变化的影响第71-72页
        5.4.3 红曲霉对主要有机酸含量的影响第72页
        5.4.4 红曲霉对特征挥发性风味物质形成的影响第72-77页
            5.4.4.1 液化液、糖化液及发酵终点挥发性风味物质含量的比较第72-75页
            5.4.4.2 实验组和对照组中两大特征酯类物质的变化第75-76页
            5.4.4.3 实验组和对照组中主要高级醇及其相应的乙酸酯类的变化第76-77页
    5.5 本章小结第77-78页
结论与展望第78-81页
    结论第78-80页
    展望第80-81页
参考文献第81-88页
致谢第88-89页
附录1 各特异性引物的qPCR标准曲线及溶解曲线第89-90页
附录2 还原糖标准曲线的绘制第90-91页
附录3 气相色谱内标法的建立第91-93页
附录4 NCBI比对结果第93-94页
附录5 乙醇标准曲线的绘制第94-95页
附录6 有机酸标准曲线的绘制第95-96页
附录7 平湖红曲霉菌株(C1)序列第96-98页
个人简历第98页

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